《免疫学实验》预习报告

《免疫学实验》预习报告实验名称：《乙肝表面抗体的检测》姓名： 刘海涛 学号： 2012013337实验原理：在微孔板上预包被纯化的乙肝表面抗原配以酶标记抗体及

组别： 2TMB等其他试剂采用夹心法原理检测人血清或其他动物血清的乙肝表面抗体。实验方法与步骤：1样品采集；取静脉血 3-4ml于干净容器中，分离出血清或血浆标本，如果不及时处理，就将其置于冰箱中。，试剂准备；乙肝病毒表面抗体诊断试剂盒。3，平衡：将试剂盒各组分从盒中取出，平衡至室温（18~25℃），微孔板板开封后，余者即时以自封袋封存。5.2配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水去离子水按1：19稀释后使用。5.3编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。4加样：分别在相应孔中加入50ul阴、阳性对照血清或待测样本。5加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50ul；轻拍混匀。5.6温育：置37℃温育25min。6洗涤：用洗涤液充分洗涤5次、洗涤后扣干（每次应保持30~60s的浸泡时间）。7显色：每孔加入底物A、B各50ul，轻拍混匀，37℃暗置15min。8终止：每孔加入终止液50ul，混匀。9测定：用酶标仪单波长450nm或双波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定时，需用空白对照调零 ,30min钟内完成测定），并记录结果。 6结果判定与分析临界值（C.O.）的计算：临界值 =阴性对照孔 OD均值*2.1；阴性对照 OD均值小于 0.05时以0.05计算。 结果判定：样本 OD值S/C.O.>=1者为HbsAb阳性 样本OD值S/C.O.<1者为HbsAb阴性 阴性对照均值>0.1或阳性对照均值 <0.4时，实验无效，应重新试验。注意事项：1每板设阴、阳性对照血清各两孔， 设空白对照时，不加样品及酶标记抗原， 其余各步相同。2洗涤时各孔均须加满，防止孔内有游离酶未能洗净。 12.3加试剂前应将试剂瓶翻转数次，是液体混匀。3所用样品、废液和废弃物都应按传染源处理。12.5所有样本、试剂和各种废弃物应按传染物处理，严格防止交叉感染，严格健全和执行消毒隔离制度。对于含有传染病和怀疑含有传染源的物质，应有合适的生物安全保证制度。样本显色深浅与样品中抗体的含量没有一定的正相关。不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。遇到失意伤心事，多想有一个懂你的人来指点迷津，因他懂你，会以我心，换你心，站在你的位置上思虑，为你排优解难。一个人，来这世间，必须懂得一些人情事理，才能不断成长。就像躬耕于陇亩的农人，必须懂得土地与种子的情怀，才能有所收获。一个女子，一生所求，莫过于找到一个懂她的人，执手白头，相伴终老。即使芦花暖鞋，菊花枕头，也觉温暖；即使粗食布衣，陋室简静，也觉舒适，一句 “懂你”,叫人无怨无悔，愿以自己的一生来交付。懂得是彼此的欣赏，是灵魂的轻唤，是惺惺相惜，是爱，是暖，是彼此的融化；是走一段很远的路，蓦然回首却发现，我依然在你的视线里；是回眸相视一笑的无言；是一条偏僻幽静的小路，不显山，不露水，路边长满你喜爱的花草，静默无语却馨香盈怀，而路的尽头，便是通达你心灵的小屋 ⋯⋯瑟瑟严冬，窗外雪飘，絮絮自语说了这多，你可懂我了吗？若你知晓，无需说话，只报一声心灵的轻叹，那，便是我的花开春暖。你相不相信，人生有一