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文档简介
寄生虫检验
吸虫的外部形态构造1、形状与大小:多背腹扁平,叶状、舌状,也有的呈圆柱形、圆锥形,少数种类呈线状。大小差异很大,凹形隐叶吸虫小于1mm,布氏姜片吸虫大于25mm。
日本血吸虫
2、颜色:一般呈棕色或白色,但固定后均为灰白色。鲜活吸虫70%A固定后吸虫吸虫的发育
间接发育,都需要中间宿主(1个或2个)。
第一中间宿主:螺类;
第二中间宿主:鱼、虾、蟹、昆虫等。虫卵→毛蚴→胞蚴→雷蚴→尾蚴→囊蚴→童虫→成虫
吸虫虫卵大多为卵圆形、具卵盖,有的具卵丝或突起;灰白、淡黄或棕色。虫卵卵壳→卵黄细胞、胚细胞
卵壳→毛蚴
片形吸虫病
由片形科片形属的肝片形吸虫、大片形吸虫寄生于动物的肝胆管内,引起急性或慢性胆管炎、实质性肝炎和肝硬化等病变,表现为消化障碍、循环障碍和营养障碍;临床上以减重、贫血和血红蛋白量减少为特征,偶见颌下、胸下部位水肿;是一种慢性、消耗性疾病。鹿科动物、牛科动物、象科动物等易感。肝片吸虫病(牛肝部切面):肝脏纤维性肿大,总胆管和胆囊管极度扩张,纤维性肥厚,内寄生大量肝片吸虫成虫。腔阔盘吸虫胰阔盘吸虫枝睾阔盘吸虫前后盘吸虫病
由鹿前后盘吸虫和长菲策吸虫寄生于鹿、黄羊和骆驼等反刍动物的瘤胃和胆管内引起的一种吸虫病。以鹿为常见。
前后盘吸虫生活史
中间宿主为椎实螺科、扁卷螺科的淡水螺。发育过程与肝片吸虫相似。但尾蚴具有眼点。日本血吸虫病
由分体科分体属的日本分体吸虫寄生于人、畜及其它动物的肠系膜静脉和肝门静脉内所引起的吸虫病。我国已报道骆驼、貉、狐狸、鹿、野猪、金钱豹等30种野生哺乳动物感染本病。
雄虫成虫(adult)腹吸盘口吸盘睾丸雌雄合抱成虫(adult)雄虫雌虫抱雌沟
成虫头节(scolex)颈节(neck)链体(strobilus)(1)头节细小,球形或梭形,其上有不同形状和数量的固着器官。
主要的固着器为吸盘型:4个吸盘,有的具顶突,其上有小钩。(2)颈节细、短、不分节,其内具有生发细胞,不断生长出体节。(3)体节亦称链体,由节片组成。节片一般呈四边形,长大于宽或宽大于长。
未成熟节片(或称幼节)依发育程度可分为成熟节片(成节)孕卵节片(孕节)成节孕节头颈节线虫外部形态
多呈长圆柱形或纺锤型,有的呈线状或毛发状,两端尖细,一般为乳白色或淡黄色,吸血者为红色,大小差异大,1mm-1m以上。
(1)雄虫:较小,尾端常弯曲,有交合伞;头端有口孔,肛门为横带状,肛门与雄性生殖孔合并为泄殖腔。雌虫雄虫交合伞(2)雌虫较大,头端有口孔,具阴门、肛门,阴门位于腹面正中线。
雌、雄虫均有一个排泄孔,位于虫体食道后段附近。棘头虫外部形态
圆柱形、纺锤形、卵圆形等;大小差异大;呈黄、红、白色;
猪肠道中的蛭形巨吻棘头虫常规寄生虫学诊断技术第一节粪便寄生虫学检查
主要用于检查寄生于消化道及其相通器官(肝、胰等)中的寄生虫感染以及某些呼吸道寄生虫,因为其虫卵或幼虫常随痰液咽下而随粪排出。采集新鲜粪便,及时检查。I常用的粪检实验室技术一、肉眼观察
1、寄生于动物消化道的绦虫会不断随宿主粪便排出呈断续面条状(白色)的孕卵节片。
2、其它一些消化道寄生虫有时也可随粪便排出体外。可直接挑出虫体,判明虫种或进一步鉴定。二、直接涂片法取50%甘油水溶液或普通水1-2滴放于载玻片上,镊取黄豆大小的被检粪块与之混匀,剔除粗粪渣,加上盖玻片镜检虫卵。此法最为简便、易行、快速,适用于虫卵量大的粪便检查,但检出率不高。回旋法:是直接涂片法的改良法。取2-3g粪样加清水2-3倍,充分混匀成悬液。后用玻璃棒搅拌,使之成回旋运动,在搅拌过程中迅速提起玻璃棒,将棒端附着的液体放于载玻片上涂开,加上盖玻片在镜下检查。三、虫卵漂浮法
原理:采用密度高于虫卵的漂浮液,使粪便中的虫卵或卵囊与粪便渣子分开而浮于液体表面,然后进行检查。
饱和盐水漂浮法(常用)饱和盐水的制备:水中加入足够的盐,煮沸后有结晶析出,即达饱和;冷却后备用。漂浮与检查:
取大约10g粪便放于一容器内,压碎,加入适量饱和盐水搅匀,过滤,静置0.5小时左右,用直径0.5-1.0cm的金属圈蘸取表面液膜,抖落于载玻片上,加盖片后镜检;或将滤液倒入干净试管,加满后,放上盖玻片,静置15min左右,将盖玻片放于载玻片上,在显微镜下检查。主要用于检查线虫卵、绦虫卵及球虫卵囊等比重较小的卵及卵囊。四、虫卵沉淀法
1、自然沉淀法取5-10g粪便捣碎后,放于一容器内,加5-10
倍量清水搅匀,经40-60孔铜筛过滤后,让滤液自然沉淀约20分钟,倒掉上清液;反复2-3次,至上清液清亮为止。最后倾倒掉大部分上清液,留约为沉淀物1/2的溶液量,用胶帽吸管吹吸均匀后,吸取少量于载玻片上,加盖玻片镜检。
缺点:费时。
沉淀集卵法
2、离心沉淀法:取5-10g粪便捣碎后,放于一容器内,加5-10倍量清水搅匀,经40-60孔铜筛过滤后在1000g下离心5min,反复数次。优点:省时。五、幼虫培养法
在培养皿底部加滤纸一张,将欲培养的粪便加水调成硬糊状,塑成半球形,放于皿内的纸上,并使半球形粪球的顶部略高出平皿边沿,使加盖时与皿盖相接触。将此皿置25~30℃温箱(夏季可放置室内)中培养,注意保持皿内湿度(应使底部的垫纸保持潮湿状态)。7~15天后,检查皿盖上水滴中的幼虫。将幼虫吸出置载玻片上,放显微镜下检查。多用于线虫鉴定。六、幼虫分离法
1、贝尔曼氏法(Baermann’stechnique)用一小段乳胶管两端分别连接漏斗和小试管,然后置漏斗架上,通过漏斗加40℃温水至漏斗中部,漏斗内放置上有被检材料(粪便或组织)的粪筛或纱布。静置1-3小时后,大部分幼虫游走沉于试管底部。此时拿下小试管,吸弃上清液,取管底沉淀物镜检。也可将分离装置放入温箱内过夜后检查。
2、简单平皿法:即取粪球若干个置于放有少量温水(不超过40℃)的表玻璃或平皿内,经10~15分钟后,取出粪球,吸取皿内液体,在显微镜下检查幼虫。主要用于组织中和粪便中线虫幼虫的检查。七、毛蚴孵化法
取被检粪便30~100g(牛100g)经沉淀集卵法处理后,将沉淀倒入500ml三角烧瓶内,加温清水(自来水需脱氯处理)至瓶口,置22~26℃孵化,到第1、3、5h时,用肉眼或放大镜观察并记录一次。如见水面下有白色点状物做直线来往运动,即是毛蚴,但需与水中一些原虫、轮虫等相区别。必要时吸出在显微镜下观察。I、
血液寄生虫检查一、
血液的涂片与染色
一般在病畜高温时取耳静脉血涂片。用姬姆萨液或瑞氏液法染色后观察。多用于血液原虫和丝虫幼虫的检查。第二节血液及组织脏器寄生虫学检查二、
鲜血压滴的观察
将一滴生理盐水置于载片上,滴上被检的血液一滴后充分混合,盖上盖玻片,静置片刻,放显微镜下用低倍镜检查,发现有运动可疑虫体时,可再换高倍镜检查。由于虫体未染色,检查时应使视野中光线弱些。主要是检查血液中虫体的运动性。多用于锥虫、微丝蚴的检查。三、虫体浓集法
采病畜抗凝血6-7毫升,以500r/min,离心5分钟,使其中大部分红细胞沉降;而后将含有少量红细胞,白细胞和虫体的上层血浆移入另一离心管中,补加一些生理盐水,以2500r/min离心10分钟。取沉淀物制成抹片,按上述染色法染色检查。此法适用于伊氏锥虫病和梨形虫病的检查。
对于血液中的微丝蚴,也可用虫体浓集法。方法是采血于离心管中。加入5%醋酸溶液以溶血。待溶血完成后,离心并吸取沉淀检查。一、检查方法:
用棉拭取鼻腔和气管分泌排泄物,将采得的粘液涂于载片上镜检。为了得到较多的检查物,可用手小心轻压气管或喉头上部以引起动物咳嗽。二、适应范围
确证肺线虫的虫卵或幼虫。II、鼻腔和气管分泌物寄生虫检查
有些原虫可以在动物身体的不同组织内寄生。一般在死后剖检时,取一小块组织,以其切面在载玻片上做成抹片、触片,或将小块组织固定后制成组织切片,染色检查。抹片或触片可用瑞氏染色或姬氏染液染色后观察。III、其它组织寄生虫检查法
一、淋巴结泰勒焦虫检查
寻找体表肿大淋巴结,将病畜保定,用右手将肿大的淋巴结稍向上方推移,并用左手固定淋巴结;局部剪毛,消毒,以10毫升注射器和较粗的针头刺入淋巴结,抽取淋巴组织;拔出针头,将针头内容物推挤到载玻片上,涂成抹片,固定,染色,镜检,可以找到柯赫氏蓝体。二、腹水中检查弓形虫速殖子
将猪侧卧保定,穿刺部在
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