医院PCR实验室室内质控标准操作程序

医院PCR实验室室内质控标准操作程序目的随时认识并控制实验室检测的精巧度变化。合用范围核酸扩增荧光定量检测实验室，此中包含使用RocheLightCycler定量PCR仪的实验室。操作人XXX操作步骤4.1自制血清质量控制品a）自制的质量控制血清来自临床采集的已知HBV阳性血清，每采集到一份冻存于－20℃。b）预约室内质控品靶值为1×106copies/ml,总量20ml，计算各份血清的混淆量。c）室温下复融质控血清，按比率混淆血清，充分混匀。d）用0.5ml离心管盛装质控血清，每管100μl，分装100管，节余血清依据荒弃物办理及生物防备操作程序办理。e）每10管质控品装一小袋，可分红10小袋。1小袋置于－20℃冰箱，其余9小袋置于－80℃超低温冰箱，用完1小袋，就从－80℃转移1小袋质控品到－20℃冰箱备用。4.2测定及计算

RCV取准备用于下一阶段室内常例室内质量控制的血清，

每日随病人标本测定一管，

20天后计算各项目的测定结果的

X、s和

CV。此处的

CV即

RCV。RCV的计算公式以下：此中X为RCV测定中所得20份结果的均值。∑表示总和。n表示结果的份数（或天数）。此中各符号所代表的含义与X计算公式同样。n-1为自由度。计算也能够使用下边的公式此中∑X2为各检测结果平方值之总和。(∑X)2为各检测结果之和的平方。4.3绘制RCV图a）计算X+2s、X－2s、X+3s、X－3s并在纵坐标上标出的X、X+2s、X－2s、X+3s、X－3s的地点，并将其详尽数值标在左边标尺上。b）用红笔划出X±2s线，用蓝笔划出X±3s线，即成为一张“空图”。此中每一小格代表实质检测数值的1/10。还应填齐图纸上方的各项，如：试验项目，质控血清根源及批号，起止日期，主要仪器等。还应填上RCV中测定中所得的X、s、CV。测定过程中的特别状况，应在备注栏内记录。c）在图纸下方“日期”、“测定值”、和“操作者”栏内按原始记录填入相应内容，边填写边查对。注意数据次序应严格按实质操作状况，不得颠倒。日期一栏内，应填写实质日期。未做测定的节假日，礼拜天在图上留出空格似更加合理，因为这样能够真切反应状况，便于分析偏差原由。d）画出每个检测值所对应的图点。每个图点在图上的横坐标为其日期（或序号），而纵坐标（即与相距的小格数量）可按下式计算。每个点的纵坐标＝该点对应的检测值－靶值(X)图中每个小格所代表的检测数值e）计算结果为正数，则点在X轴上方，反之，则在X轴下方。各点画在图上后，用直线将各点次序连结，以便于观察。4.4室内质控图的使用方法描点a）图中X线为靶线，X±2s为警示线，X±3s为失控线。关于同一批号的质控血清无论使用几个月，其空图均不变化。只需将图纸上方“起止日期”项填入每个月的实质起止日期即可。b）每日将该批号质控血清按相关规定程序复融伴同病人的标本同时检测。将日期、检测结果和操作者照实记录在图下方的相应地点，并按前面的方法画出图上的对应点，用直线将该点与前一天的点连结。c）月尾计算当月所有质控血清检测结果的X、s和CV，并进行图形分析和小结，将质量控制图存入质控资料档案。图形分析a）假如在X±3s线之外，则为失控，应立刻报告相关负责人，快速查找原由。必需时复测标本，此后方可发出报告，并将失控状况、查找过程及办理结果等详尽记录。b）假如在X±2s线之外，或出现连续6点以上在一侧等规律变化，均应实时向相关负责人反应，并踊跃查找原由。但当日的查验结果一般能够发出。经过察看图形的规律性变化进行偏差分析，除去误差根源a）曲线漂移：提示有系统偏差，正确度发生了一致性的向上或向下改变。这类变化常常是因为一个新的状况惹起的。如改换不同样批号试剂，启用新批号的质控血清、操作人员的变换等。在找原由时，应要点注意“漂移”前后发生了那些改动的要素。b）趋向性变化：向下或向上的趋向性变化表示检测的准确度发生了逐渐地变化。这类变化常常是因为一个逐渐改变的要素造成的。如质控血清的降解，试剂效价的降低等。c）连续多点散布在靶值一侧：当前，一般以为质控血清的检测结果连续6天以上出此刻靶值同一侧，则应快速查找原由，争取赶快使之答复环绕在靶值随机散布的状态。因为依据统计学原理，由纯随机偏差造成的这类状况的可能性很小。连续

6天以上出此刻靶值同一侧可能性小于

1.5％。所以凡出现连续

6天以上出此刻靶值同一侧者均有可能存在非随机偏差要素。如结果与靶值偏离其实不太大，不会给临床使用带来太大影响时，一般化验报告能够照旧填发。d）其余规律变化：（周期性等）经过图形的资料比较进行偏差分析，除去偏差根源a）每个月的月尾将该月的所有质控血清检测结果的X和s与该批测定的X和s进行比较。假如X发生了变化，说明正确度发生了变化提示有非随机偏差存在。假如当月s不同样侧表示检测的精巧度发生了变化。b）将使用同一批号质控血清的CT值的X和s按月份列出。假如X逐在月上涨，应试虑保留不妥造成的试剂效价降低或质控血清自己出现降解。假如各月份X基本一致而s逐月加大，则主要提示常例工作的精巧度降落，应要点从操作、管理上找原由。c）在数年中，把每个月的CV和失控规律列成表，可用作检测质量的历史性回首及趋向分析。5．本S