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专题基因工程的基本操作程序文档ppt方法基因文库的构建PCR技术扩增人工合成基因组文库部分基因文库(如cDNA文库)过程方法基因文库的构建PCR技术扩增人工合成基因组文库部分基因文库(如cDNA文库)优点操作简单专一性强可在短时间内大量扩增目的基因专一性强,可产生自然界中不存在的新基因缺点工作量大、盲目性大、专一性差操作过程较麻烦,技术要求过高需要严格控制温度,技术要求高适用范围小可在短时间内大量扩增目的基因操作过程较麻烦,技术要求过高可在短时间内大量扩增目的基因工作量大、盲目性大、专一性差专一性强,可产生自然界中不存在的新基因将目的基因插入Ti质粒的T­DNA上专题基因工程的基本操作程序文档ppt可在短时间内大量扩增目的基因部分基因文库(如cDNA文库)需要严格控制温度,技术要求高将目的基因插入Ti质粒的T­DNA上部分基因文库(如cDNA文库)专一性强,可产生自然界中不存在的新基因需要严格控制温度,技术要求高提纯含目的基因的表达载体整合到受体细胞的DNA上受体细胞植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技术感受态细胞法受体细胞体细胞受精卵原核细胞受体细胞植物细胞动物细胞微生物细胞转化过程以农杆菌转化法为例:将目的基因插入Ti质粒的T­DNA上↓转入农杆菌中↓导入植物细胞↓整合到受体细胞的DNA上提纯含目的基因的表达载体↓显微注射↓受精卵发育↓具有新性状的个体Ca2+处理细胞↓感受态细胞↓基因表达载体与感受态细胞混合↓感受态细胞吸收DNA分子操作过程较麻烦,技术要求过高需要严格控制温度,技术要求高可在短时间内大量扩增目的基因可在短时间内大量扩增目的基因部分基因文库(如cDNA文库)专题基因工程的基本操作程序文档ppt可在短时间内大量扩增目的基因可在短时间内大量扩增目的基因可在短时间内大量扩增目的基因操作过程较麻烦,技术要求过高工作量大、盲目性大、专一性差将目的基因插入Ti质粒的T­DNA上专题基因工程的基本操

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