新药分析方法的建立与验证课件

分析方法的建立与验证上海浦融生物科技有限公司ChamQuest1分析方法的建立与验证上海浦融生物科技有限公司1分析方法的建立与验证0.引言1.分析方法在药品开发中的应用2.分析方法开发的基本问题3.分析方法的验证与转移2分析方法的建立与验证0.引言20.引言上海浦融生物科技有限公司ChamQuest30.引言上海浦融生物科技有限公司3药物质量体系InvestigationalProductsPharmaceuticalDevelopmentTechnologyTransferCommercialManufacturingProductDiscontinuationGMPManagementResponsibilityKnowledgeManagementQualityRiskManagementProcessPerformance&ProductQualityMonitoringSystemCorrectiveAction/PreventativeAction(CAPA)SystemChangeManagementSystemManagementReviewPQSelementsEnablers4药物质量体系InvestigationalProducts强生技术转移模式PhaseIPhaseIIAClinicalTrialsPhaseIIIClinicalTrialsFilingandLaunchEarlyDevelopmentStartingPoint-(SourcingDecision)RegistrationBatches(PhaseIIIClinicalTrials)Pre-Validation(FinalScale-UpActivities)Validation*LaunchFilePAIFullDevelopmentEndPointFilingandLaunchProcessOutputsDevelopmentActivitiesDevelopmentReportsPDIRTTPPTTSPIRPhaseIIbTransferSignoffAcceptanceAMTR(In-Processtesting)AnalyticalPre-TransferAnalyticalMethodTransferAMTRMicroMethodTransferMDDSMMTRADDSPTRTimelineforActivityTTS–TechnologyTransferStrategyTTPP–TechnologyTransferProjectPlanPIR–ProductIntroductionReportPDIR–PharmaceuticalDevelopmentInterimReportReportNameAbbreviationsADDS-AnalyticalDevelopmentDocumentationSetAMTR–AnalyticalMethodTransferReportAMTR(In-ProcessTesting)–AnalyticalMethodTransferReportforin-processtestingtransferPTR–ProductTransferReportMMTR–MicrobiologicalMethodTransferReportMDDS–MicrobiologicalDevelopmentDocumentationSetOngoingActivity(asrequired)*Validationmayoccurpriortoregulatorysubmission5强生技术转移模式PhaseIPhaseIIAClini分析方法的生命周期(LifeCycle)方法的建立方法的验证方法的转移6分析方法的生命周期(LifeCycle)方法的建立方法的验1.分析方法在药品开发

过程中的应用上海浦融生物科技有限公司ChamQuest71.分析方法在药品开发

过程中的应用上海浦融生物科技有限公药品开发过程概要药物发现(drugdiscovery/leadoptimization)早期开发(earlydevelopment)毒理Toxicology药代动力学Pharmcokinetics临床试验申请IND临床研究(Clinical)I&II期临床试验ClinicalphaseI&IIIII期临床试验ClinicalphaseIII化学与生产控制(CMC)化学开发Chemicaldevelopment药品开发Pharmaceuticaldevelopment分析开发Analyticaldevelopment工艺放大Scale-up输送技术开发DeliveryDevelopment技术转移TechnologyTransfer申报与审批(Regulatoryfilings)生产及商业运作(Manufacturing&commercialization)8药品开发过程概要药物发现(drugdiscovery/le药品开发中分析测试的作用产品的安全性 Productsafety制剂的生物利用性Dosageform’sbioavailability原料,中间体及产品规格的确定SpecsettingforAPI,intermediates,andproduct产品的有效期的确定Shelf-lifeofproduct制剂配方的优化Determiningoptimumformulation杂质与降解物的定性,定量和“确认“ID,quantitationand“qualification”ofimpurities°radants药物原料的晶体结构Crystallineformdetermination清洁工艺支持Swabtesting&cleaningvalidation支持临床及临床前研究Pre-clinical&clinicalsupport(safety&efficacy)9药品开发中分析测试的作用产品的安全性9CMC中的主要分析方法及数据Methodvalidation(方法验证)PhysicalcharacterizationofAPI&drugproduct(物理表征)In-processcontrol(过程控制)Characterizationofreferencestandards(标准物表征)Specification(规格)Evaluationofcontainer/enclosure(包装材料评估)DrugproductandAPIstability(产品及原料的稳定性)Referencetocompendialtestingmethodsandinactive(非活性成份的药典方法)Bioequivalence(生物等同性)Pharmaceuticaldevelopmentreport(药物开发报告)10CMC中的主要分析方法及数据Methodvalidati分析方法及分析测试涉及多领域学科产品开发:剂型包装分析测试临床试验支持过程开发/表征/控制稳定性/产品释放毒理/药代动力学法规申报支持11分析方法及分析测试涉及多领域学科产品开发:分析测试临床试验支分析方法在药物发现阶段的作用帮助确认新化学物种的结构Confirmationofexpectedstructure初步的定量结果Tentativecontentassayassignment主要使用HPLC和LC/MSMostlyHPLCandLC/MS不要求GMPNocGMPrequirements12分析方法在药物发现阶段的作用帮助确认新化学物种的结构12分析方法在PRE-IND阶段的作用在PRE-IND阶段,研究和表征:毒理Toxocologyprofile综合药理Generalpharmacologyprofile临床前药理Preclinicalpharmacologyprofile化学和药剂学性质Somechemical&pharmaceuticalproperty上列数据将在IND/CTA申报中使用生产和表征PilotBatch(PB,100-300g)供PRE-IND使用杂质和降解物确定identificationforimpurity°radants稳定性StabilityofNMEforpre-formulation.溶剂中稳定性Solutionstability:pH,ions,light,oxidantsAPI稳定性APIstabilityat25/60forprovisionalshelflife方法HPLCformethod,andprofiling物理表征X-ray,physicaltestingforcharacterization

13分析方法在PRE-IND阶段的作用在PRE-IND阶段,研分析方法在PHASEI/II阶段的作用PHASEI选择相对稳定剂型,对健康志愿人员临床研究(SAD,MAD,etc.)安全性Safety,容忍度tolerability,动力学kinetics分析方法要求定量方法初步的稳定性试验IND方法认证支持过程放大,剂型开发,等14分析方法在PHASEI/II阶段的作用PHASEI14分析方法在PHASEI/II阶段的作用PHASEII稳定性研究和释放规范(releasespec):API&DP稳定性指示纯度指示确认主要的杂质和降解物如果没有标准物,可使用API面积%接近方法验证配方精化过程放大15分析方法在PHASEI/II阶段的作用PHASEII15分析方法在PHASEIII阶段的作用PHASEIII大规模多国多中心double-blind临床试验严格的方法开发和验证耐用性,可转移性最终确定:制剂配方方法规格(规范)杂质和降解产物检测:临床试验物品释放正式稳定性工艺过程放大及优化清洁验证

16分析方法在PHASEIII阶段的作用PHASEIII16分析方法在申报与审批(Regulatoryfilings)阶段的作用NDA/MAA申报Methodtransfer(方法转移)Processvalidation(过程工艺验证)Continuedstability(继续进行的稳定性实验)Continuedclinicalsupport(继续进行的临床试验支持)Pre-approvalinspection(PAI)(批准前检查)17分析方法在申报与审批(Regulatoryfilings分析方法对剂型开发的支持决定最终剂型的影响因素:药物的治疗作用Proposedindicationofthedrug药物利用度Bioavailabilityprofile用药剂量Drugpotency原料药的稳定性StabilityofAPI,shelf-life用药方便性与市场要求Patientconvenience&marketingexpectations生产过程与成本的考虑Manufacturing&costconsideration释放要求Releasecharacteristics(e.g.delayedrelease,etc)18分析方法对剂型开发的支持决定最终剂型的影响因素:18常见剂型Oral口服剂型(片剂,口服液,等)Parenteral(IV,subcutaneous,etc)注射剂Inhalation喷雾剂Transdermal透皮剂型Topical(creamsandointments)表皮局部剂型19常见剂型Oral19一些特殊剂型的分析方法会遇到很多技术挑战Implantdelivery(植入式药物输送)Drug/devicecombinationaldrugdelivery(药品/器械复合型药物输送)Liposomaldrugdelivery(脂质体药物输送)20一些特殊剂型的分析方法会遇到很多技术挑战Implantde分析方法是剂型开发的基础API表征Solubility(稳定性),crystalstructure(晶体结构),particlesize(颗粒尺寸)制剂组份的兼容性制剂的稳定性制剂药释功能溶解度,溶解速率,等制剂工艺Uniformity,residualsolventfromcasting,etc(均匀性,残留溶剂等)21分析方法是剂型开发的基础API表征21

2.分析方法开发的基本问题

22

2.分析方法开发的基本问题

22分析方法的基本构成分析要求ID(鉴别试验)Assay(含量测定)Impurity(杂质检查)ReleaseRate/Dissolution……(功能检查)样品与样品制备API(原料药)Excipient/functionalingredient/RS(辅料/功能性辅料/残留料)制剂(FinishedProduct)Tablet(片剂)Capsule(胶囊)TransdermalPatch(透皮贴片)IVInhale…….分析仪器与操作参数(方法)HPLCGCUV……..数据分析23分析方法的基本构成分析要求23分析要求Speed(速度)Resolution(解析度)Cost(成本)Robustness(耐用)24分析要求Speed(速度)ResolutionCost(成优先考虑基本要求含量测定速度/解析能力1)与辅料分离2)耐用性杂质/降解物解析能力/灵敏度稳定性指示1)与辅料分离,杂质/降解物分离2)杂质定量(灵敏度>0.1%)3)耐用性溶出度速度单峰定量,耐用性25优先考虑基本要求含量测定速度/解析能力1)与辅料分离杂质/稳定性指示(Stability-Indicating)基于药品活性组分(AI)的结构特性，化学特性或生物特性的定量分析方法，该方法能将活性组分（AI）与降价组分（degradationproduct)区分开来，使活性组分能够被准确地确定。(FDAGuidelineforsubmittingdocumentationforthestabilityofhumandrugsandbiologics)AI(活性组份):API(原料药)NovelExcepients(全新辅料)FunctionalExcepients(功能辅料)ImpuritiesDegradationProduct(降阶产物)SyntheticImpurities(合成杂质)Residuals(残留物)26稳定性指示(Stability-Indicating)基于药方法案例:Fentanyl27方法案例:Fentanyl27方法案例:Fentanyl28方法案例:Fentanyl28方法案例:Fentanyl29方法案例:Fentanyl29方法案例:Fentanyl30方法案例:Fentanyl30方法案例:FentanylImpB具有潜在致癌毒性，FDA要求控制<0.001%IncomingMaterialControl(进料控制)<0.005%GenotoxicityWhitePaperforacuteapplication(基因毒理白皮文件):0.01%方法耐用性是一个挑战.方法在0.002%浓度上得到验证.31方法案例:FentanylImpB具有潜在致癌毒性，FD分析方法开发:强化降解APISolidStateDegradation(固相中降解)SolutionDegradation(液相中降解)FinishedProduct(产品)CommonDegradationPathways:(通常的降解途径)AcidHydrolysis(酸解)BaseHydrolysis(碱解)Temperature(温度)Photolysis(光解)Oxidation(氧化)32分析方法开发:强化降解API32强化降阶案例(化合物–3100)API固相:(希望20%降解)热:70C3周湿:70C/75%RH3周光照:SuntestXLS光照室用Xenonarc灯通过玻璃窗发射765W/m2at72F的模拟日光在5小时,24小时取样(3xICHguideline)氧化:用滤纸封盖样品压力容器在70C下加300psi氧气在3天和7天时取样Initiated氧化:32mgAPI加入7ginitiator(AIBN)在70C下加300psi氧气在1天和3天时取样33强化降阶案例(化合物–3100)API固相:(希望强化降阶案例(化合物-3100)API在溶液中强化降解)直到7天(Forupto7days):Water50CAcid0.1NHClinwater,50CpH2.0Citratebuffer,50CpH4.0Citratebuffer,50CpH6.0Citratebuffer,50CpH8.0Boratebuffer,50CpH10.0Boratebuffer,50CBase(0.1NNaOHinwater50C)Fluorescentlight(inwaterRT)Oxidation3.0%H2O2inwater,50CPolyethyleneGlycol4000.5%Methocelsolutioninwater20%HPBCDinH2O34强化降阶案例(化合物-3100)API在溶液中强化降解)溶液中强化降解样品谱图(ChromatogramsofSolutionStressedSamples)Watersolution,50oCfor7days

0.1NNaOHsolution,50oCfor7days

35溶液中强化降解样品谱图(ChromatogramsofS降解物Table3.SolutionForcedDegradationExperiments(area%)

36降解物Table3.SolutionForcedDe产品的降解实验(StressStudiesforDrugProduct)强化至15%降解(一般规格为90-110%)检查专属性(Specificity)和稳定性(stabilitytesting)应用正交方法或正交技术对每个强化降解样品,至少要用LC-PDA数据评估其“峰纯度(peakpurity)”.37产品的降解实验(StressStudiesforDru固体制剂强化方式SolidDosageFormStressingStrategy(JNJ)StressingCategoryExperimentalConditionMaximumStressingDurationAcid/BaseExcipientsand/orproductionstepsshouldbeevaluatedtodecideifacid/basestressingisnecessary.Ingeneral,acid/basestressingofsoliddosageformsisnotpreferred.OxidativeNotnecessaryforopendishexperiments.Forcaseswhereopendishexperimentsarenotpossible,stressingunderanenrichedoxygenatmosphereissuggested.Insuchcases,stresstheDPinaclosedcontainerhavingaheadspaceenrichedwithoxygenandatanelevatedtemperature(seethermalstressingexperimentalconditionsandduration).Photostability1and2ICH(Option1or2)NAThermal70or80C*2weeks60C8weeks50C8weeks40C8weeksThermal/Humidity70or80C*/>65%2weeks60C/>65%8weeks50C/>65%8weeks40C/>65%8weeks38固体制剂强化方式SolidDosageFormStre液体/胶体制剂强化方式Solutions/Suspensions/CreamsStressingStrategy(JNJ)StressingCategoryExperimentalConditionMaximumStressingDurationAcidOption1:Formulationsamplespreparedat2pHunitsbelowthemarketedpH@50C*1weekOption2:0.01N0.1NHCl@50C*

Addacidsolutiontosample,mixwellandplaceinoven.Addupto10%(v/v)forsolutionsand10%(w/w)forsuspensions/creams1weekBaseOption1:Formulationsamplespreparedat2pHunitsabovethemarketedpH@50C*1weekOption2:0.01N0.1NNaOH@50C*

Addbasesolutiontosample,mixwellandplaceinoven.Addupto10%(v/v)forsolutionsand10%(w/w)forsuspensions/creams1weekOxidativeEnrichedOxygenAtmosphere**/70or80C***2weeksEnrichedOxygenAtmosphere**/60C8weeksEnrichedOxygenAtmosphere**/50C8weeksEnrichedOxygenAtmosphere**/40C8weeksPhotostability1and2ICHOption1or2NAThermal70or80C***2weeks60C8weeks50C8weeks40C8weeksThermal/HumidityNotNecessary39液体/胶体制剂强化方式Solutions/Suspensio分析方法的正交性(Orthogonality)相互正交的分析方法/技术是基于不同的分析/分离机理。混合物中具有不同性质的组分在相互正交的方法中的表现特征截然不同，因此互补性地避免了在单一分析方法/技术中得不到有效分析/分离的误区。正交分析技术 LC-UVLC-MSCEGC正交分析方法ReversePhase,NormalPhase,IC,etcReversePhase:C18,Phenyl-,NH2-,PDA(不同波长)40分析方法的正交性(Orthogonality)相互正交的分析正交方法/技术的应用应用：API纯度(APIPurity)方法开发(MethodDevelopment)杂质剖析(ImpurityProfiling)专属性验证(SpecificityValidation)稳定性实验(StabilityStudies)要求耐用性不重要(Robustnessisnotaconcern)效率和速度不重要(Efficiency&Speedisnotaconcern)不是一个日常方法(Notaroutinemethod)41正交方法/技术的应用应用：41一个快速分析新方法

FastAnalysisforSkinFluxand

ReleaseRateDetermination

inTransdermalDrugDeliverySystems

UsingNPSBasedHPLCColumnJasonZhang,RichardRobertsonandSteveFieldsALZACorporation42一个快速分析新方法

FastAnalysisforSTransdermalSystems-HighVolumeSampleTypes

(溶出度)MultipleStabilityConditions(多稳定性实验条件)ReplicateSamples(重复样品)MultipleTimepoints(多时间点)50-200Injections(50-200进样)ReleaseRate(Development&QC)TTSSystem43TransdermalSystems-HighVolTransdermalSystems-HighVolumeSampleTypes

(透皮实验)MultipleFormulations(多配方)ReplicateSamples(重复样品)MultipleTimepoints(多时间点)100-1000Injections(100-1000进样)TTSsystemDrugSkinSkinFlux(Research)44TransdermalSystems-HighVolWhatisNPS?(Non-PorousSilica)1.5umdiameter45WhatisNPS?(Non-PorousSilicNPSoffers高添充密度提高重复性平稳的vanDeemter曲线46NPSoffers高添充密度46代表性实验参数

--方法:ALZA-33D-TRANSTM47代表性实验参数

--方法:ALZA-33D-TRANSTALZA-33(含anti-irritant)ConventionalNPSALZA-33anti-irritantmin.48ALZA-33(含anti-irritant)Conve透皮样品ALZA-33matrixanti-irritantconventionalNPSSkinFluxSample6-849透皮样品ALZA-33matrixanti-irritant一个溶出度测定方法byNPS0.37min.minuteALZA-31150一个溶出度测定方法byNPS0.37min.minutNPS相对于传统柱的优势(以一个典型的透皮实验为例(600样品))100hrs10hrs6.0L0.3L3.0L0.09L51NPS相对于传统柱的优势(以一个典型的透皮实验为例(方法验证线性0.9998系统适用性:保留时间 RSD 0.08%峰面积 RSD 0.19%拖尾因子 1.752方法验证线性0.999852样品制备(HPLC)基本要求:全部或准确定量部分API溶入溶剂中可注射入HPLCAPI通常剂型:片剂胶囊注射剂透皮53样品制备(HPLC)基本要求:53透皮给药系统的结构释药层背衬层药物储库与粘附层(如.Testoderm®,DuragesicCII®)54透皮给药系统的结构释药层背衬层药物储库与粘附层(如.TTrandermal分析方法的几个问题标签含量vs.目标含量样品的制备回收率的验证与溶解动力学实验IVIVC分辩功能(DiscriminatoryPower)基因毒性Genotoxicity55Trandermal分析方法的几个问题标签含量vs.目分析样品的制备目标提取药物,杂质,辅料药物提取或溶出的策略有选择性地完全多相56分析样品的制备目标提取药物,杂质,辅料56选择性提取有机溶剂+水乙腈或甲醇聚合物骨架部分分解要求进行充分的动力学研究4–48小时搅拌–搅动,震摇,超声57选择性提取有机溶剂+水57完全提取强的有机溶剂–THF使聚合物完全溶解非常快速稀释可能会有问题相分离与HPLC的兼容性可能会用到凝胶渗透-液相（GPC-LC）连用柱58完全提取强的有机溶剂–THF58多相提取液-液提取正己烷:ACN/H2O体积测定的准确度和精密度是一个挑战相关的问题:药物,降解产物的分配系数操作效率问题固相提取低压,低分辨率液相色谱柱准确度,精密度,可重复性有挑战操作效率问题59多相提取液-液提取59

3.分析方法的验证

60

3.分析方法的验证

60方法验证FDA对工业界的分析规程和方法验证指南草案:化学,生产,和控制文件.2000年8月药品评价与研究中心(CDER)指南:递交方法验证的样品和分析数据的原则.1987年2月ICHQ2A:分析规程验证内容:定义和术语,国际协调协会.ICHQ2B:分析规程的验证:方法学,国际协调协会.ICHQ3A(R):新原料药中的杂质,国际协调协会.ICHQ3B(R):新的药品中的杂质,国际协调协会.ICHQ7A:药物活性成分的GMP指南.ICHQ10:PharmaceuticalQualitySystemGlobalAnalyticalNetwork,TechnicalGuidanceDocument,ValidationofAnalyticalProceduresGlobalChemPharmDevelopment,GlobalSOPs.61方法验证FDA对工业界的分析规程和方法验证指南草案:化学PharmaceuticalQualitySystemInvestigationalProductsPharmaceuticalDevelopmentTechnologyTransferCommercialManufacturingProductDiscontinuationGMPManagementResponsibilityKnowledgeManagementQualityRiskManagementProcessPerformance&ProductQualityMonitoringSystemCorrectiveAction/PreventativeAction(CAPA)SystemChangeManagementSystemManagementReviewPQSelementsEnablers62PharmaceuticalQualitySystemI不同阶段的方法验证全球制药行业的当前实践IND阶段

这些方法是用于临床试验用品的放行和稳定性测试,通常在原料药和药物制剂最终的测定方法之前使用.NDA阶段这个阶段的测试方法是根据最终的合成路线和制剂制备方法开发的，用于支持NDA/MAA的申报和商业原料药和药品的质量控制.方法转移(MethodTransfer)生产测试和连续改进(CommercialTesting&ContinuedImprovement)63不同阶段的方法验证全球制药行业的当前实践63不同方法种类的方法验证常用方法的验证色谱方法的验证溶出度,释药速率&功能性测试物理测试&湿化学测试微生物检测64不同方法种类的方法验证常用方法的验证64不同测试类型的方法验证A.

鉴别试验–为了确保样品中被分析物的一致性B.

DS和DP样品中活性成分的检测-为了准确定量的测定样品中含有的被分析物.这些方法包括含量分析(Assay)和含量均一性分析(ContentUniformity).C.

杂质的定量检测-为了准确定量地测定样品中的杂质水平.D.

杂质的限度检测-作为一个限度检测目的是准确地反映样品的纯度特性.限度检测还可以用于测定安慰剂中是否含有活性药物成分.65不同测试类型的方法验证A.

鉴别试验–为了确保样品根据不同的测试类型目前所使用的分析测试实例鉴别测试杂质和降解物的测定含量检测

定量限度

- 外观- IR- DSC- 旋光性- 熔点/熔解曲线- HPLC,GC,CE-NMR-MS- AAS- 干燥失重- Coulometric

式和Karl-Fisher式水分测定-HPLC,GC,CE

- 透射- 硫酸灰分- 重金属- 不溶物- 色泽和澄明度-HPLC,GC,CE

- 滴定-HPLC,GC,CE

66根据不同的测试类型目前所使用的分析测试实例鉴别测试杂质和降解方法验证特性专属性(特异性)（Specificity)专属性是对抗可能存在的组分(如杂质,降解物等)干扰,准确可靠地测定被分析物的能力。专属性的含义：鉴别，纯度检查，含量准确测定准确度(Accuracy)分析方法的准确度表示的是测定值与真实值或者参考值的接近程度.67方法验证特性专属性(特异性)（Specificity)67方法验证特性精密度(Precision)分析方法的精密度表示的是指在指定的条件下同一类样品中不同的几份样品所得到的测定值之间的接近程度(分散程度).精密度可以分三种:可重复性(Repeatability)中间精密度(IntermediatePrecision)再现性(Reproducibility)68方法验证特性精密度(Precision)68方法验证特性可重复性可重复性表示的是在相同的操作条件下每隔一小段时间的精密度.可重复性也叫批内精密度.系统可重复性系统的可重复性表示的是在相同的操作条件下每隔一小段时间时分析仪器的精密度,如.单份样品或参考制剂的多次分析时的精密度.分析方法可重复性分析方法的可重复性表示的是在相同的条件下，每隔一小段时间后由相同的分析人员测定的分析方法的精密度,如.多种样品制备方法的测试结果间的精密度.69方法验证特性可重复性69方法验证特性中间精密度中间精密度表示的是实验室内的变异性:不同日期,不同的分析人员,不同的设备等.再现性再现性表示的是实验室之间的精密度(合作研究,通常用于方法的标准化).70方法验证特性中间精密度70方法验证特性检测限度(DL)一个独立的分析方法的检测限指的是样品中被分析物的最低含量,这个只需要可以检测出来而不需要准确定量.定量限度(QL)一个独立的分析方法的定量限指的是在适当的精密度和准确度下可以定量测定的样品中的待测物的最低含量.定量限是样品混合物中低含量组分的定量参数,尤其适用于杂质和降解产物的定量.71方法验证特性检测限度(DL)71方法验证特性线性线性是指分析方法得到测试结果的能力（在一定范围内）,测试结果应该与样品中被测定成分的浓度（含量）直接称正比.范围分析方法的使用范围是样品中被分析物浓度（含量）的最大值和最小之间的间隔，该范围内的准确度、精密度和线性的适用性水平应该已经过论证.72方法验证特性线性72方法验证特性稳健性（耐用性）稳健性是指分析方法不受一些小但是应该考虑的方法参数的变异性因素影响的能力，可以为正常的使用过程提供一些指示.溶液的稳定性溶液的稳定性是测定目标分析物在所描述的条件下可以保持稳定的时间长度.过滤研究过滤研究考察的是过滤过程(如.结合目标分析物和过滤装置，以及污染物的提取等).这部分研究可以作为是准确性研究和专属性研究的一部分.73方法验证特性稳健性（耐用性）73方法验证特性系统适用性测试（SystemSuitability)已经提供了建议的系统适用性测试特征和限度,如果是可以适用的，应该作为分析方法的组成部分.这可以在样品测试之前确保方法和仪器都可以按预期运行.方法比较/跨越性研究(MethodComparison/CrossOverStudy)进行方法比较研究是为了证明不同分析方法之间是等价的.74方法验证特性系统适用性测试（SystemSuitabiliIND/CTA方法验证Table2:MethodValidationCharacteristics–IND/CTAMethods分析性能特征鉴别测试杂质和降解产物测试分析测试

定量限度

特异性++++准确度--1)-+精密度

-系统可重复性-+-+ -分析可重复性-+-+

-中间精密度----

-再现性----检测限(DL)-++-定量限(QL)-+--线性-+-+范围-+-+稳健性----溶解稳定性-+-+过滤研究-+-+系统适用性测试-+-+方法比较--1)-+1)75IND/CTA方法验证Table2:MethodValNDA/MAA方法验证Table3:MethodValidationCharacteristics–NDA/MAAMethods分析性能特征鉴别测试杂质和降解产物测试检测测试*

定量限度

特异性++++准确度-+-+精密度

-系统可重复性-3)+-3)+ -分析可重复性-3)+-3)+ -中间精密度-+1)-+1) -再现性-+-+检测限(DL)-++-定量限(QL)-+--线性-+-+范围-+-+稳健性-+2)+2)+2)溶解稳定性-+-+过滤研究-+-+系统适用性测试-+-+方法比较-+3)-+3)1)如果有再现性数据的话中间精密度不是必须的

2)

稳健性可以作为方法开发的一部分进行3)3是指在某些案例中需要进行的76NDA/MAA方法验证Table3:MethodVal验证方案–含量测定特异性(专属性）1)注射辅料混合物(n=1)(对于药物成品)2)注射已知杂质或降解产物的方法浓度水平的待测物，(n=1).(通常使用系统适用性溶液)3)对于稳定性表征方法:

在下列应力条件下进行强制降解研究(不限于): 40度，75%相对湿度，4周(开口) 60度或80度，4周在1.2M勒克斯荧光和200watts/m2的紫外光下照射(见ICH中的光稳定性指南)4)用正交的方法或检测系统来核实77验证方案–含量测定特异性(专属性）77验证方案–含量测定特异性的接受标准1) 保留时间在待测物保留时间5%之内的所有检测峰的总面积(强制降解物除外)应测定方法浓度水平待测物的0.1%(峰面积%).

2)分辨率:1.578验证方案–含量测定特异性的接受标准78验证方案–含量测定线性最少准备5份以上的标准溶液，以在范围确定时包括全部浓度范围.如果测定方法中用到SLC，则需要进行单水平校准评估.验收标准1)r2

0.9952)计算所得的所有标准品浓度应该在标准品理论浓度的2%范围之内.79验证方案–含量测定线性79验证方案–含量测定准确度1)在样品基质中加入下述每一水平的待测物(n=3)及在空白基质中加入下述每一水平的待测物(n=1)作为控制样品(ControlSample):(e.g.Assay70-100-130;Imp:RT-SL-2SL)• 含量范围的下限• 含量范围的中间• 含量范围的上限2)对于控制样品记录下列内容:• 将使用哪种类型的样品及原因.• 如何制备控制样品验收标准1)单个加样回收率:96-104%2)每个水平的平均回收率:97-103%3)单个控制样品的回收率:理论值的98-102%4)对于精密度,整体的RSD(n=9):<5%80验证方案–含量测定准确度80浓度 验收标准1-2RT 50-150%2-10RT 70-130%11-20RT 80-120%》20RT 90-110%70-130%DS 98-102%70-130%DP 97-103%81浓度 验收标准81验证方案–含量测定中间精密度在各独立系列中制备并分析至少10个的样品（经过完整样品制备过程）或者至少6个的具有代表性批次样品的混合样品（经过完整样品制备过程）或叠加样品(spiked)在下述条件下:1)不同的3天2)不同的2位分析人员3)不同的2套仪器(如果可能的话最好是不同的供应商)4)不同的2根柱子(至少是不同的批次，最好是不同的供应商)5)不同的2个制剂批次

每次都重新测试系统适用性，使用新的标准品，使用新的流动相.验收标准:整体的%RSD:5%82验证方案–含量测定中间精密度82验证方案–含量测定再现性每个实验室都应该测定至少10个的抽样制剂或者至少6个的具有代表性批次样品的混合样品或叠加样品.验收标准1)2个平均值之间的差异应3%.2)两个实验室的整体%RSD都应5%83验证方案–含量测定再现性83验证方案–含量测定检测限在检测限（LOD）浓度水平根据待测辅料混合溶液的叠加分析核实LOD(n=1).必要时额外测定较高或较低浓度的样品LOD估计实例:

1)建立噪音水平

2)LOD的估计:3倍于噪音水平.定量限

在定量限（LOQ）浓度水平根据待测辅料混合溶液的叠加分析核实LOQ(n=6).必要时额外测定较高或较低浓度的样品.标准:1)6次注射进羊的RSD%均:10%2)单个回收率:85-115%;平均回收率:90-110%3)S/N比大约为10:1(如果上述标准达不到10：1可能会更高)84验证方案–含量测定检测限84验证方案–含量测定溶液的稳定性标准溶液:用原溶液中制备3份单独的的中等标准范围的稀释液.按照用新鲜配制的标准品得到的标准曲线分析至少1个月.(或者如果少于1个月的话，就分析的时间长度可以是预期使用的时间)样品溶液:使用3个中等含量的叠加样品(含量的100%).按照用新鲜配制标准品得到的曲线分析至少1周.

记录样品和标准品的储存条件.验收标准:样品和标准品浓度的平均回收率应在平均浓度（T0）2%范围之内.单个样品和标准品的回收率:T0的3%范围内

85验证方案–含量测定溶液的稳定性85验证方案–含量测定稳健性

可以采用色谱的稳健性时，注射6次系统适应性样品，改变流动参数，来确定方法的方法的稳健性，:• 流动相的组成:(+/-)5%相对于有机相• 流动相的pH:(+/-)0.2个单位

• 柱温:(+/-)5C

• 流速:(+/-)20%变异

• 缓冲液的浓度:(+/-)10%摩尔浓度柱的稳健性:•至少3根不同批次或者来自不同供应商的（如果可能的话）柱子86验证方案–含量测定稳健性86验证方案–含量测定系统适用性测试(perUSP<621>)注射6针中间含量的溶液(活性药物+杂质)验收标准1)峰响应值的RSD%:2%2)保留时间（RT）的RSD%:5%3)托尾因子:0.5T2.54)分离度:基线峰之间的分离度包括溶剂前沿,通常应1.5.5)容量因子:1.5灵敏度样品分离度样品87验证方案–含量测定系统适用性测试(perUSP<62测样顺序系统适用性测定洗脱空白溶液/辅料灵敏度样品测定分离度样品测定洗脱线性测定QC样品洗脱样品核对标准品88测样顺序系统适用性测定88MethodTransfer89MethodTransfer89ModelwithGeneralTimelineforTechnologyTransferPhaseIPhaseIIAClinicalTrialsPhaseIIIClinicalTrialsFilingandLaunchEarlyDevelopmentStartingPoint-(SourcingDecision)RegistrationBatches(PhaseIIIClinicalTrials)Pre-Validation(FinalScale-UpActivities)Validation*LaunchFilePAIFullDevelopmentEndPointFilingandLaunchProcessOutputsDevelopmentActivitiesDevelopmentReportsPDIRTTPPTTSPIRPhaseIIbTransferSignoffAcceptanceAMTR(In-Processtesting)AnalyticalPre-TransferAnalyticalMethodTransferAMTRMicroMethodTransferMDDSMMTRADDSPTRTimelineforActivityTTS–TechnologyTransferStrategyTTPP–TechnologyTransferProjectPlanPIR–ProductIntroductionReportPDIR–PharmaceuticalDevelopmentInterimReportReportNameAbbreviationsADDS-AnalyticalDevelopmentDocumentationSetAMTR–AnalyticalMethodTransferReportAMTR(In-ProcessTesting)–AnalyticalMethodTransferReportforin-processtestingtransferPTR–ProductTransferReportMMTR–MicrobiologicalMethodTransferReportMDDS–MicrobiologicalDevelopmentDocumentationSetOngoingActivity(asrequired)*Validationmayoccurpriortoregulatorysubmission90ModelwithGeneralTimelinefoScope分析技术转移的任务DifferenttaskspartoftheAnalyticalTechnologyTransferare:analyticalmethods(分析方法)Specifications(规格)Stability(稳定性)referencematerials(标准物)cleaningvalidation(清洁验证)releaseofregistrationandvalidationbatches(注册批量和验证批量的释放)Knowledge(知识)91Scope分析技术转移的任务Differenttasks方法转移过程(JNJ)GATTATTProjectPlanMethodDevelopmentATRingTestMethodValidationDevelopmentDocumentSetMethodTransferTransferofOwnershipATTStrategyTechnologyTransferStrategyPhaseDevelopmentPhaseSiteTransferPhase92方法转移过程(JNJ)GATTATTProjectPl方法转移过程(JNJSOP)PhaseIPreparationIddocumentation,personnelfromeachlabVerifyequipmentequivalencyDeterminetrainingrequirementDeterminetestingrequirementGenerateprotocolApprovalprotocolPhaseIIExecutionObtaintestsamplesandstandardsTrainreceivinglabanalystsCompletetrainingdocumentPerformequipmenteqtesting(ifapplicable)PerformtransfertestingReviewandapprovedata(eachlabindividually)Generatesummaryreport(receivinglab)93方法转移过程(JNJSOP)PhaseIPrepara方法转移过程PhaseIIIEvaluationandReportEvaluatetestresultsperacceptancecriteriaestablshedinTransferProtocol(Originatinglab)Writefinalreport(Originatinglab)Reviewandapprovefinalreport94方法转移过程PhaseIIIEvaluationand方法转移计划书范例:

AReleaseRateMethodProtocolIndex1.0 Scope

2.0 Attachments

3.0 Objective4.0 Facilities5.0

LocationofRawData6.0

Training7.0 EquipmentandMaterials8.0 TestingandAcceptanceCriteria9.0

DiscussionandConclusion

10.0

ReferenceDocuments95方法转移计划书范例:

AReleaseRateMeth方法转移计划书范例:AReleaseRateMethod7.1 Drugreleaserate(AAM1.810)TestingSampleswillbetestedinaccordancewithAAM1.810.Bothsendingandreceivinglaboratorieswillperformtestingasperthefollowingplan.Bothsendingandreceivinglabswilleachprepare12individualsamplepreparationsforbothstrengthsasperthemethod.Thesendinglaboratorywillusedatapreviouslygeneratedforthelotclearance.

Thereceivinglabwillsummarizetheirresultsandsendthemtothetransferringlabforevaluationagainsttheacceptancecriteria.Anydeviationsfromtheprotocolmustbereportedtothetransferringlabforevaluationanddocumentedinthetransferreport.Allindividualresultsmustbereportedinmg/cm2to3decimalplaces(e.g.0.152mg/cm2).Meansmustbecalculatedonun-roundedresultsandmustbereportedto3decimalplaces.96方法转移计划书范例:AReleaseRateMetho方法转移计划书范例:AReleaseRateMethodSystemsuitabilityrequirementsofthemethodmustbeachievedinbothlabs.Theabsolutedifferenceinmeancumulativeamountsreleased(mg/cm2)betweenbothlabsateachofthespecifiedtimeintervalsmustbe5.0%ofthelabelclaim.The%RSD(n=24)ofbothlabsresultsmustbe10%forthe0.083,0.25,0.5htimeintervalsand15%forthe1and2htimeintervals.97方法转移计划书范例:AReleaseRateMetho方法转移计划书范例:AReleaseRateMethodRationale: Thedrugreleaserateacceptancecriteriaofabsolutedifferenceinmeancumulativeamountsreleased(mg/cm2)betweenbothlabsisspecifiedinIQP(InternationalQualityProcedure)66titled“AnalyticalMethodTransfer”andforthemidandhighlevelsinSOP9-406titled“NDA-LevelMethodValidationProtocolsforChromatographicQuantitativeAnalyticalMethodsforSmallMolecules”.Thesamplesizeperlabhasbeenincreasedfrom6to12tobetterdeterminethemeanforlotsthathavehigherthannormaldrugcontentvariation.SeeTable1.The%RSDacceptancecriteriadiffersfromthemethodvalidationacceptancecriteriaforreproducibilityperSOP9-406.Thismodifiedacceptancecriteriaistoaccountforthespecifiedlotshavingahigherthannormaldrugcontentvariationwhichmanifestsitselfinhighervariationinthecumulativedrugreleaseduringthelatertimeintervalsandisnotindicativeofhigherinstrumentvariation.SeeTable1.98方法转移计划书范例:AReleaseRateMetho方法转移计划书范例:AReleaseRateMethod99方法转移计划书范例:AReleaseRateMetho分析方法的建立与验证上海浦融生物科技有限公司ChamQuest100分析方法的建立与验证上海浦融生物科技有限公司1分析方法的建立与验证0.引言1.分析方法在药品开发中的应用2.分析方法开发的基本问题3.分析方法的验证与转移101分析方法的建立与验证0.引言20.引言上海浦融生物科技有限公司ChamQuest1020.引言上海浦融生物科技有限公司3药物质量体系InvestigationalProductsPharmaceuticalDevelopmentTechnologyTransferCommercialManufacturingProductDiscontinuationGMPManagementResponsibilityKnowledgeManagementQualityRiskManagementProcessPerformance&ProductQualityMonitoringSystemCorrectiveAction/PreventativeAction(CAPA)SystemChangeManagementSystemManagementReviewPQSelementsEnablers103药物质量体系InvestigationalProducts强生技术转移模式PhaseIPhaseIIAClinicalTrialsPhaseIIIClinicalTrialsFilingandLaunchEarlyDevelopmentStartingPoint-(SourcingDecision)RegistrationBatches(PhaseIIIClinicalTrials)Pre-Validation(FinalScale-UpActivities)Validation*La