XXXX年版药典化学药品检测技术概述

1化学药品检测技术概述

2010.08饶春意主要内容一、化学药品常用检测技术介绍；二、2010年版二部新增检测技术介绍（总有机碳测定法）；三、化学药品现代检测技术介绍；四、化学药品质量控制展望

化学药品常用检测技术介绍化学分析技术仪器分析技术生物检定技术化学分析技术的应用药品的物理常数测定物理常数系鉴定药品质量的重要指标，根据药品的特性或鉴定工作的需要，测定相关的物理常数。通常包括：相对密度、馏程（沸点）、熔点、凝点、黏度等。物理常数的测定，不仅对药品具有鉴别意义，也反映该药品的纯杂程度。重量分析本法测得结果的精密度好、准确度高，但操作较繁，耗时较长，仅在不能应用容量分析法进行化学原料药的含量测定时，方可考虑选用。容量分析容量（滴定）分析是化学分析中的一类重要的分析方法。此类分析方法是将一种已知浓度的液体即滴定溶液用滴定管（手动或自动）加到被测物质的溶液中，直到所加滴定液和被测组分按化学计量反应完全为止。容量分析优点：精密度和准确度高，操作简便，至今仍是组分单一原料药含量测定的首选方法；快速经济、仪器简单。缺点：专属性不足，对组分较多的制剂，需较繁琐的前处理，可损失一定的精密度和准确度。滴定分析应符合以下条件：a、反应应朝一个方向完全进行（›99.9%）；b、反应迅速，必要时通过加热或加催化剂等方法加速反应；c、共存物不得干扰测定，或能用适当方法消除；d、确定等当点的方法简单灵敏；e、标化滴定液所用基准物质易得，且符合纯度高、组分恒定且与化学式符合、性质稳定（标化时无副反应）等。滴定分析分类根据化学反应不同，分酸碱滴定、沉淀滴定、络合滴定、氧化还原滴定；按滴定方式分直接滴定和剩余滴定（也称回滴定、间接滴定）。仪器分析技术的应用光谱分析吸收光谱分析：紫外可见、红外、原子吸收、核磁共振；发射光谱分析：荧光、火焰、折光、旋光；应用：含量、杂质限量、物理常数测定。紫外可见分光光度法

物质对紫外辐射的吸收是由于分子中原子的外层电子跃迁所产生，因此，紫外吸收主要取决于分子的电子结构，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子结构中如含有共轭体系、芳香环等发色基团，均可在紫外区（200~400nm）或可见光区（400~850nm）产生吸收。紫外-可见分光光度法是通过被测物质在紫外光区的特定波长处或一定波长范围内的吸光度，对该物质进行定性和定量分析的方法。可用于鉴别、杂质检查和含量测定。鉴别：对对已知物物质定性性可用吸吸收峰谷谷波长或或吸光度度比值作作为鉴别别方法；；但因波波长范围围较窄，，吸收光光谱较为为简单、、平坦，，曲线变变化不大大，用作作鉴别的的专属性性远不如如红外光光吸收光光谱。杂质检查查：被测测物质本本身在紫紫外光区区无吸收收，而其其杂质在在紫外光光区有相相当强度度的吸收收，或杂杂质的吸吸收峰处处被测物物质无吸吸收，用用于检查查杂质。。应用物理常数数（吸收收系数））的测定定物质对光光的选择择性吸收收波长，，及其在在最大吸吸收波长长处的吸吸收系数数，是该该物质的的物理常常数之一一。用表表示，即即在指定定波长时时，光路路长度为为1cm，试样浓浓度换算算成1%（g/ml）时的吸吸光度，，将其列列入性状状项下的的物理常常数之中中，不仅仅可用于于考查原原料药的的质量，，还可作作为制剂剂含量测测定中选选用值的的依据。。应用溶出度、、含量均均匀度与与含量测测定由于仪器器或操作作等原因因，在不不同试验验室或不不同仪器器之间，，对同一一供试液液测得的的吸光度度往往有有较大偏偏差，其其相对偏偏差约为为0.5%~1.5%，因此，，对于原原料药的的含量测测定，本本法非首首选方法法，但紫紫外-可见操作作简便、、检测灵灵敏，如如辅料无无干扰适适用于制制剂的含含量测定定、含量量均匀度度和溶出出度。（1）对照品品比较法法按按各品种种项下的的方法，，分别配配制供试试品溶液液和对照照品溶液液，对照照品溶液液中所含含被测成成分的量量应为供供试品溶溶液中被被测成分分规定量量的100%±10%，所用溶溶剂也应应完全一一致，在在规定的的波长处处测定供供试品溶溶液和对对照品溶溶液的吸吸光度后后，计算算供试品品中被测测溶液的的浓度。。与对照品品同时测测定进行行比较，，可改善善由于仪仪器而引引入的误误差，但但所用对对照品应应具有纯纯度高、、杂质干干扰少、、制备方方便和稳稳定性好好等条件件。吸收系数数法按各品种种项下的的方法配配置供试试品溶液液，在规规定的波波长处测测定其吸吸光度，，再以该该品种在在规定条条件下的的吸收系系数计算算含量。。用本法法测定时时，吸收收系数宜宜在100以上，并并注意仪仪器的校校正和检检定。凡制剂剂的含含量测测定采采用吸吸收系系数计计算的的分光光光度度法，，应在在原料料药的的性状状项下下增订订”吸收系系数””。比色法法供供试试品本本身在在紫外外-可见区区没有有强吸吸收，，或在在紫外外区虽虽有吸吸收但但为了了避免免干扰扰或提提高灵灵敏度度，可可加入入适当当的显显色剂剂显色色后测测定，，这种种方法法称之之比色色法。。该法的的显色色时影影响显显色深深浅的的因素素较多多，应应取供供试品品与对对照品品或标标准品品同时时测定定，并并同时时作空空白试试验校校正。。比色法法所用用的空空白，，系指指用同同体积积的溶溶剂代代替对对照品品或供供试品品溶液液，然然后依依次加加入等等量的的相应应试剂剂，并并用同同样方方法处处理。。红外分分光光光度法法（IR法）红外光光谱是是分子子的振振动-转动光光谱，，特振振性强强，用用于鉴鉴别组组分单单一、、结构构明确确的原原料药药，是是一种种较为为合适适的方方法，，尤其其适用用于其其他方方法不不易区区分的的同类类药物物，如如磺胺胺类、、甾体体激素素类和和半合合成抗抗生素素类药药品等等。样品的的制备备：气气体、、液体体和固固体样样品均均可利利用红红外分分光光光度法法进行行分析析，测测定时时应根根据样样品情情况选选择相相应的的制备备方法法。一般有有压片片法、、糊法法、膜膜法、、溶液液法、、气体体吸收收池法法；衰衰减全全反射射法（（ATR）一般采采用与与对照照图谱谱进行行比较较（《药品红红外光光谱集集》收载的的品种种），，少数数采用用与对对照品品图谱谱进行行比较较。对对于具具有同同质异异晶现现象的的药品品，应应选用用有效效晶型型的图图谱。。采用用固体体样品品制备备法，，如遇遇多晶晶型现现象而而使实实测光光谱与与标准准光谱谱有差差异时时，一一般可可按《药品红红外光光谱集集》中所载载重结结晶处处理法法或与与对照照品平平行处处理后后测定定。但但如对对药用用晶型型有规规定时时，则则不能能自行行重结结晶。。原子吸吸收分分光光光度法法（缩缩写为为AA或AAS）原子吸吸收法法与紫紫外可可见分分光光光度法法在基基本原原理上上是相相同的的——都是基基于物物质对对紫外外可见见光的的吸收收而建建立的的方法法。但但是，，它们们的吸吸光物物质的的状态态不同同；原原子吸吸收法法是基基于基基态原原子对对光的的吸收收现象象，而而紫外外可见见分光光光度度法则则是基基于溶溶液中中的分分子或或离子子对光光的吸吸收，，这是是这两两种分分析方方法的的根本本区别别。原子分分光光光度法法有如如下优优点：：一是灵灵敏度度高，，火焰焰法的的绝对对检出出限可可达10-10g数量级，石石墨炉可达达10-14g数量级，适适合痕量元元素的分析析；二是选选择性好，，简便快速速，有些样样品不经分分离即可在在同一溶液液或固体中中直接测定定多种元素素。测定一一个元素一一般只需几几分钟。常用于含量量测定和杂杂质检查、、溶出度、、释放度等等。一般不不做鉴别。。与其他仪器器分析方法法相比较原子吸收法法在中草药药和中成药药的无机微微量元素的的含量分析析上有广泛泛的应用。。几乎所有有的中草药药及中成药药都需经过过消化预处处理，破坏坏消化掉有有机组分，，将含有的的微量元素素转化为无无机化合物物，然后制制得适用于于进行原子子吸收测定定的溶液。。这在中药药毒害微量量元素的控控制方面有有长足优势势。荧光分析法法根据某些物物质受紫外外或可见光光照射被激激发后能发发出较激发发波长为长长的荧光，，而当照射射光源停止止照射时，，这种荧光光也随之消消失。荧光光谱包包括激发光光谱和发射射光谱，激激发光谱是是指不同激激发波长的的光引起物物质发射某某一波长荧荧光的相对对效率，即即测定每一一波长激发发产生的荧荧光，以激激发光的波波长为横坐坐标，荧光光强度为纵纵坐标作图图，既得物物质的激发发光谱，实实际为该物物质的电子子吸收光谱谱。发射光光谱是指某某一激发波波长的光引引起物质发发射不同波波长荧光的的相对效率率，既保持持激发光波波长和强度度不变，让让荧光物质质发生的荧荧光通过单单色器，测测量荧光的的发射波长长。物质的激发发光谱和荧荧光发射光光谱，可用用作定性分分析。但激激发波长、、强度、所所用溶剂等等条件固定定时，物质质在较稀的的一定浓度度范围内，，其发射光光强度与溶溶液中该物物质的浓度度成正比关关系，可用用作定量分分析（含量量测定、溶溶出度、含含量均匀度度等）。根据化合物物的结构特特点，荧光光分析法用用于定量测测定一般可可分为：直直接测定法法、间接测测定法，前前者是用于于自身能产产生荧光的的物质；后后者用于本本身不发荧荧光或者因因荧光效率率低只有极极微弱的荧荧光，无法法进行直接接测定的化化合物，此此类化合物物有些可通通过某类化化学反应将将无荧光物物质转变为为适合于测测定的荧光光物质，然然后进行间间接测定。。间接荧光光测定法常常用的化学学反应有（（1）氧化还原原反应、（（2）硫酸“感感应”荧光光反应（3）水解反应应（4）配位反应应（5）缩合反应应（6）荧光衍生生物测定。。荧光衍生物物测定较常常用，即一一些无荧光光或弱荧光光的物质，，利用与某某些荧光试试剂反应，，生成荧光光衍生物进进行测定。。常用的荧光光试剂有：：荧光胺、、丹酰氯、、1,2-萘醌-4-磺酸钠和邻邻苯二甲醛醛。荧光测定时时，要注意意在低浓度度溶液下进进行。通常常荧光测定定的样品溶溶液浓度相相当于吸收收分光光度度法的1%~10%。浓度太大大的溶液会会有“自熄熄灭”现象象，这是由由于被激发发分子在发发生荧光之之前和未激激发分子的的碰撞，或或由于荧光光物质的分分子间缔合合而形成二二聚体及多多聚体的关关系，这也也是液态纯纯物质的荧荧光一般都都不强的原原因。旋光测定旋光度：平平面偏振光光通过含有有某些光学学活性化合合物的液体体或溶液，，能引起旋旋光现象，，使偏振光光的平面向向左或右发发生旋转，，偏转的度度数称为旋旋光度。这这种特性是是由于物质质分子中含含有不对称称元素（通通常为不对对称碳元素素）所致。。使偏振光向向右旋转者者（顺时针针方向，朝朝光源观测测）称为右右旋物质，，常以“+”号表示；使使偏振光向向左旋转者者称为左旋旋物质，常常以“—”号表示。旋光度的影影响因素：：化合物特特性、测定定波长、偏偏振光通过过的供试液液浓度、液液层的厚度度以及测定定时的温度度。比旋度当偏振振光通通过长长1dm且每1ml中含有有旋光光物质质1g的溶液液，在在一定定波长长与温温度下下测得得的旋旋光度度称为为比旋旋度。。以[α]tλ表示，，t为测定定时的的温度度，λ为测定定波长长。除另有有规定定，测测定温温度为为20℃℃，采用用钠光光谱的的D线（589.3nm）。比旋度度为光光学物物质的的物理理常数数，是是反映映手性性化合合物特特性及及其纯纯度的的主要要指标标。应用：：鉴别别（左左炔诺诺孕酮酮片、、左炔炔诺孕孕酮炔炔雌醚醚片等等）、、检查查纯杂杂度（（一般般置于于性状状项下下，如如左旋旋多巴巴、左左炔诺诺孕酮酮等））、含含量测测定（（葡萄萄糖））色谱法法纸色谱谱、薄薄层色色谱、、气相相色谱谱、液液相色色谱、、毛细细管电电泳、、离子子色谱谱等。。薄层色色谱薄薄层色色谱法法按薄薄层色色谱使使用固固定相相的性性质及及其分分离机机制可可分为为吸附附色谱谱法、、分配配色谱谱法、、离子子交换换色谱谱法和和分子子排阻阻色谱谱法四四种，，其中中吸附附TLC法最常常用，，分配配TLC法次之之。在化学学药品品分析析中，，常用用于鉴鉴别和和杂质质检查查。在有机机杂质质检查查中，，尤其其是有有关物物质的的检查查，薄薄层色色谱法法是常常用的的方法法之一一。用用于已已知杂杂质的的检查查时，，宜采采用与与限度度量的的已知知杂质质对照照品，，同时时展开开，检检测比比较；；对于于未知知杂质质，可可见供供试品品溶液液稀释释后作作为自自身对对照溶溶液，，选用用自身身对照照检测测时，，要注注意杂杂质斑斑点与与自身身对照照的显显色可可比性性。也也可用用荧光光板，，利用用荧光光淬灭灭法检检测。。为了能能反映映杂质质已达达到良良好的的分离离，可可规定定系统统适用用性试试验的的要求求。系统适适用性性试验验包括括检测测斑点点的检检测灵灵敏度度、比比移值值（Rf）和分分离效效能。。分离效效能鉴鉴别时时，对对照品品与结结构相相似物物制成成的混混合溶溶液按按规定定方法法展开开后，，应显显示两两个清清晰的的斑点点。杂杂质检检查时时，杂杂质对对照品品主成成分制制成的的混合合溶液液按规规定方方法展展开后后，应应显示示两个个清晰晰的斑斑点，，或待待测成成分与与相邻邻的斑斑点应应清晰晰分离离。注意：：（1）薄层层板的的活化化与保保存在在吸附附TLC法中中，，无无论论自自制制还还是是市市售售的的硅硅胶胶板板，，使使用用时时均均应应活活化化（（110℃℃30分钟钟））。。活活化化后后应应立立即即置置于于有有干干燥燥剂剂的的干干燥燥器器中中保保存存，，保保存存时时间间不不宜宜过过长长，，最最好好随随用用随随活活化化。。放放入入干干燥燥箱箱中中只只是是一一种种适适用用前前的的过过渡渡。。吸附附TLC法中中，，薄薄层层板板需需活活化化，，这这是是因因为为其其吸吸附附剂剂硅硅胶胶中中的的硅硅醇醇基基吸吸附附水水分分后后活活性性降降低低，，但但使使用用硅硅胶胶G类的的板板层层时时注注意意，，由由于于其其粘粘合合剂剂煅煅石石膏膏在在110℃℃烤2小时时即即失失去去活活性性，，因因此此在在板板层层活活化化和和显显色色时时注注意意；；而而分分配配TLC法则则不不需需干干燥燥，，残残留留的的水水作作固固定定相相。。（2）点点样样环环境境实实验验环环境境的的温温湿湿度度对对薄薄层层分分离离效效果果有有较较大大影影响响，，宜宜保保持持试试验验环环境境相相对对恒恒定定，，对对温温湿湿度度敏敏感感的的品品种种必必须须按按规规定定严严格格控控制制环环境境的的温温湿湿度度。。液相相色色谱谱（（略略））气相相色色谱谱（（略略））毛细细管管电电泳泳法法（（略略））离子子色色谱谱法法（（略略））生物物检检定定技技术术的的应应用用微生生物物限限度度检检查查法法无菌菌检检查查法法细菌菌内内毒毒素素检检查查发发热原原检检查查法法抗生生素素微微生生物物检检定定法法升压压物物质质检检查查法法降压压物物质质检检查查法法过敏敏反反应应检检查查法法溶血血与与凝凝聚聚检检查查法法2010年版版二二部部总总有有机机碳碳检检测测技技术术介介绍绍（1）总总有有机机碳碳测测定定法法介介绍绍原理理：：通通过过氧氧化化待待测测样样品品中中的的有有机机物物，，使使之之释释放放出出co2并产产生生电电导导响响应应，，通通过过薄薄膜膜电电导导率率测测定定可可得得到到水水中中有有机机碳碳总总量量TOC测定定的的基基本本原原理理氧化化第一一步步有机机物物第二二步步测定定CO2氧化化技技术术高温温氧氧化化加热热的的过过硫硫盐盐氧氧化化紫外外线线加加过过硫硫盐盐氧氧化化紫外外线线氧氧化化紫外外线线加加二二氧氧化化钛钛氧氧化化高温温燃燃烧烧氧氧化化高温温炉炉丝丝空空气气/O2+铂（（Pt)催化化剂剂，，在在680～950℃优点点缺缺点点氧化化效效率率高高催催化化剂剂易易中中毒毒，，必必须须替替换换能氧氧化化颗颗粒粒必必须须使使用用试试剂剂、、载载气气和和酸酸用在在清清洁洁验验证证较较为为合合适适空空白白污污染染检测测限限高高加热热的的过过硫硫盐盐氧氧化化S2O8+加热热（（90～130℃）→2SO4··SO4··+H2O→SO4+OH··优点点缺缺点点氧化化效效率率高高颗颗粒粒氧氧化化会会不不完完全全无催催化化剂剂和和灯灯管管会会失失去去挥挥发发性性化化合合物物适用用于于清清洁洁验验证证需需化化学学试试剂剂和制药用水水反反应器器内积累滞滞留物紫外氧化H2O+hv（185nm）→OH·+H·优点缺缺点点无试剂对较高浓度度的TOC氧化能力不不足无催化剂中中毒（（>5ppmTOC)保养简单对对颗粒粒物氧化会会不完全适用于半导导体工业和和需需更换灯管管USP制药用水紫外氧化有机物+hv（185nm）→CO2+H2OH2O+hv（185nm）→OH·+H·OH·+Organics→→CO2+H2O紫外线加二二氧化钛氧氧化H2O+hv（185nm）→OH·+H·H2O+hv（185nm，TiO2）→OH·+H·优点缺缺点点无试剂对较高浓度度的TOC氧化能力不不足保养简单（（>5ppmTOC)适用于半导导体工业和和对对颗粒粒物氧化会会不完全USP制药用水需需更换换灯管催化剂中毒毒紫外线加过过硫盐氧化化S2O8+加热（90～130℃）→2SO4··SO4·+H2O→SO4+OH·优点缺缺点点无论TOC在高浓度还还是对颗粒物氧氧化会不完完全低浓度氧化化效率高用用化学学试剂保养简单需需要更换换灯管适用于清洁洁验证和USP制药用水CO2检测技术非分散红外外探测直接电导率率探测薄膜电导率率探测非色散红外(NDIR)探测气室检测器CO2入气口CO2出气口直接电导率检测直接电导检测测的最大优点点：灵敏度极极高最大缺点：各各类离子的干拢H3PO3H++H2PO4-有机物CO2+H2OH2CO3H++HCO3-各类有机物氧氧化分解而生生成各式离子子，都产生电电导响应HClH++Cl-HNO3H++NO3-H2SO42H++SO42-UVR-ClR-NR-SR-P期望值所测值%TOC(ppb)TOC(ppb)誤差二氯甲烷101801,700三氯甲烷104754,650溴二氯甲烷102232,130氯二溴甲烷102482,380三溴甲烷103022,9201,1,1,-三氯乙烷1003,4563,3561,2,3,-三氯丙烷1002,8762,776半胱氨酸1001,2781,178直接电导率在在线TOC方法的“假正”現象薄膜电导率检测-选择性膜技术术薄膜电导率检检测优点可测去离子水水和非去离子子水灵敏度高，选选择性和精确确度好多用性－在线线和非在线校准稳定适用于清洁验验证和USP制药用水被美国试验材材料学会（ASTM）认可缺点测非去离子水水需用试剂比直接电导率率检测器多一一些可移部件件用途：检查制制药用水中有有机碳总量，，用以间接控控制水中的有有机物含量。。也被用于制制水系统的流流程控制，如如监控净化和和输水等单元元操作的效能能。有机物的来源源：一般来自自水源、供水水系统（包括括净化、贮存存和输送系统统）以及水系系统中菌膜的的生长。2010年版总有机碳碳测定附录方方法介绍对仪器的一般般要求：（1）总有机碳测测定技术应能能区分无机碳碳（溶于水中中的二氧化碳碳和碳酸氢盐盐分解所产生生的二氧化碳碳）与有机碳碳（有机物被被氧化产生的的二氧化碳）），并能排除除无机碳对有有机碳测定的的干扰。（2）应满足系统统适用性试验验的要求。（3）应有足够的的检测灵敏度度（最低检出出限为每升含含碳等于或小小于0.05mg/l)总有机碳检查查用水应采用每升含含总有机碳低低于0.10mg，电导率低于于1.0uS/cm（25℃）的高纯水。所所用总有机碳检查查用水与制备备对照品溶液液及系统适用用性试验用水水应是同一容容器所盛之水水。系统适用性试试验取总有机碳检检查用水（w）、蔗糖对照照品溶液（s）和1，4-对苯醌对照品品溶液（ss）分别进样，，依次记录仪仪器总有机碳碳响应值。按按下式计算，，以百分数表表示的响应效效率应为85％～115％。化学药品现代代检测技术介介绍－现代色谱法法手性HPLC拆分法：由于D-型和L-型对映体的物物理性质完全全相同，难以以在普通固定定相上分离，，只能在手性性固定相上才才能获得拆分分；如果利用用对映体分子子中的反应基基团与某一光光学纯试剂反反应形成了非非对映光学异异构体混合物物，其物理性性质就有较大大的差异，因因而在普通固固定相上实现现分离.因此，手性HPLC拆分法通常分分为直接法和和间接法两大大类.对映体混合物物以手性试剂剂作柱前衍生生，形成非对对映体异构体体对，然后以以常规固定相相分离，称为为间接法，也也称手性衍生生试剂法；未未作上述处理理，使用手性性流动相或手手性固定相拆拆分者即是直直接法.其共同特点是是，均以现代代HPLC技术为基础，，并引入不对对称中心；不不同的是间接接法是将其引引入分子内，，而手性固定定相和手性流流动相则引入入分子间.引入手性环境境使对映异构构体间呈现物物理特征的差差异是手性HPLC进行光学异构构体拆分的基基础.毛细管电泳分分析法毛细管管电泳（capillaryelectrophoresis，CE）是以弹性石英英毛细管为分分离通道，以以高压直流电电场为驱动力力，依据样品品中，各组分分之间淌度和和分配行为上上的差异而实实现分离的电电泳分离分析析方法，是20世纪80年代初发展起起来的一种高高效、快速的的分离分析技技术.HPCE是经典电泳技技术和现代微微柱分离相结结合的产物.与HPLC相比，均为液液相分离技术术，都有多种种分离模式，，且仪器操作作可自动化；；但分离机制制不同.在很大程度上上，HPCE和HPLC互为补充.毛细管电泳分分析法的主要要分离模式有有：毛细管区区带电泳（毛毛细管电泳中中最基本、应应用最广泛的的一种分离模模式）；胶束束电动毛细管管色谱、毛细细管凝胶电泳泳和毛细管等等电聚焦等.现代波谱法在药物的研制制及质量控制制过程中紫外外光谱法、红红外光谱法、、荧光光谱法法、质谱法、、近红外分光光光度法、核核磁共振光谱谱分析法、X射线粉末衍射射法等技术被被广泛应用.近红外分光光光度法（near-infraredspectrophotometry，NIRS）近红外分分光光度度法是一一种用于于鉴定有有机物质质十分有有用的技技术.近红外光光谱是中中红外光光谱（2500nm~25000nm）中C-H，N-H，O-H和S-H的共振吸吸收，具具有高信信息量.波长范围围为780nm~2500nm.NIRS不仅可用用于药物物及其制制剂的鉴鉴别，还还可用于于检查和和含量测测定.NIRS分析技术术主要有有投射测测定法、、漫投射射测定法法和反射射测定法法3种.投射测定定法一般般用于液液体样品品的溶液液中固体体的分析析，透射射光强度度与物质质量间的的关系符符合比尔尔定律；；漫投射测测定法用用于试样样中含有有光散射射物质的的分析，，光在穿穿透分析析样品时时，除了了吸收外外还有多多次的散散射，在在这个过过程中比比尔定律律不适用用；反射测定定法是近近红外光光照射到到样品表表面后，，根据样样品表面面状态和和结构的的不同，，光线可可以有规规则的反反射、漫漫射和透透反射，，这种方方法常用用于粗糙糙和粉末末状态样样品的测测定.其中漫反反射测定定法常用用于固体体样品的的分析，，透反射射测定法法一般用用于液体体和溶液液中固体体或混悬悬液中固固体样品品的分析析.NIRS分析法的的特点有样品无无需与处处理；所所需样品品少；分分析速度度快；灵灵敏度高高；运用用范围广广；便于于在线分分析和控控制等特特点.NIRS在药物的的鉴别、、纯度检检查和含含量测定定中被广广泛应用用.核磁共振振光谱分分析法核核磁共振振光谱（（nuclearmagneticresonancespectrometry，NMRS）是利用原原子核的的物理性性质，采采用当代代最先进进的电子子学和计计算机技技术，用用于各种种分子物物理和化化学结构构的研究究.随着NMR仪器灵敏敏度、分分辨率、、动态范范围等方方面技术术的提高高，NMRS分析法在在药学研研究中的的应用迅迅速扩大大.NMR可检测的的核素有有很多，，如1H、13C、15N、19F、23Na、31P等.但由于大大多数药药物都含含有质子子，因此此最常用用的是1H-NMR，其光谱谱中的化化学位移移、峰面面积、偶偶合常数数、弛豫豫时间均均是解析析化合物物结构的的重要参参数，而而峰面积积和峰高高更直接接与被测测组分的的含量呈呈正比.基于超导导强磁场场的多脉脉冲FT-NMR技术，尤尤其是二二维NMR（2D-NMR）技术的的开发应应用，不不但显著著提高了了检测灵灵敏度，，而且使使1H-NMR谱与13C-NMR谱互相构构联，建建立了不不依赖任任何经验验规则预预测的方方法，对对分子骨骨架、构构型及构构象等获获得直接接确凿的的分析方方法，已已在各类类有机化化合物的的分子结结构测定定中得到到了广泛泛地应用用.X射线粉粉末衍衍射法法X射线是是伦琴琴在1895年发现现的，，又曾曾称为为伦琴琴射线线.本质上上是波波长很很短的的电磁磁波，，一般般认为为波长长为0.01nm~1nm，较紫紫外线线还短短.作为波波，就就可以以产生生衍射射.所谓衍衍射，，就是是绕过过障碍碍物边边缘向向前传传播的的现象象.当X射线射射到晶晶格排排列整整齐的的晶体体上，，仅仅仅在某某些方方向有有光线线反射射，这这就是是X射线的的衍射射.衍射均均可由由X射线衍衍射仪仪进行行测定定.应用：：晶型型的测测定联用技技术液相色色谱-质谱联联用技技术（（简称称LC-MS）联用用技术术是20世纪90年代发发展成成熟的的分析析技术术，它它集HPLC的高分分离能能力与与MS的高灵灵敏度度、极极强的的结构构解析析能力力、高高度的的专属属性和和通用用性、、分析析速度度快于于一体体，已已成为为药品品质量量控制制、体体内药药物和和药物物代谢谢研究究中其其他方方法所所不能能取代代的有有效工工具.与GC-MS联用技技术相相比，，LC-MS联用技技术分分析前前样品品处理理简单单，一一般不不要求求水解解，或或者衍衍生化化，可可以直直接用用于药药物及及其代代谢物物的同同时分分离和和鉴定定.但是LC-MS仍存在在明显显不足足，主主要有有：①①由于于离子子化问问题，，对部部分化化学成成分的的响应应差，，不能能分析析所有有结构构类型型的化化合物物；②②对色色谱流流动相相的组组成有有限制制，不不宜使使用非非挥发发性缓缓冲盐盐，挥挥发性性缓冲冲盐的的浓度度也应应控制制在10mmol/L以下，，在一一定程程度上上降低低了LC-MS的应用用范围围；③③所提提供的的化学学结构构信息息尚不不足以以彻底底解决决化合合物的的鉴定定问题题，尤尤其对对阐明明化合合物的的基团团连接接位置置和立立体构构型等等缺乏乏证据据.液相相色色谱谱-核磁磁共共振振联联用用技技术术LC-MS已成成为为复复杂杂体体系系中中各各化化合合物物结结构构分分析析的的重重要要方方法法，，而而MS无法法完完全全解解决决位位置置异异构构、、立立体体异异构构等等化化学学结结构构问问题题.随着着LC与NMR联用用技技术术所所需需硬硬件件和和软软件件方方面面的的长长足足进进展展，，上上世世纪纪90年代代后后期期LC-NMR联用用分分析析技技术术已已进进入入了了实实用用阶阶段段，，正正在在成成为为药药物物杂杂质质鉴鉴定定、、药药物物体体内内外外代代谢谢产产物物的的结结构构鉴鉴定定、、天天然然产产物物化化学学筛筛选选等等研研究究领领域域最最具具价价值值的的分分析析技技术术之之一一.方法法特特点点：：NMR是迄迄今今为为止止功功能能强强大大的的结结构构研研究究手手段段，，可可以以彻彻底底解解决决多多数数有有机机物物的的化化学学结结构构问问题题，，而而且且NMR对所所有有含含检检测测核核的的化化合合物物均均有有响响应应，，具具有有极极大大的的通通用用性性.与LC联用用时时要要求求达达到到良良好好的的色色谱谱分分离离，，但但对对色色谱谱条条件件要要求求不不高高，，使使用用普普通通色色谱谱柱柱，，一一般般建建议议仍仍使使用用重重水水，，其其余余使使用用甲甲醇醇、、乙乙腈腈、、四四氢氢呋呋喃喃等等有有机机溶溶剂剂，，也也可可以以向向流流动动相相中中加加入入酸酸、、碱碱和和各各种种缓缓冲冲盐盐及及离离子子对对试试剂剂等等，，因因而而该该联联用用技技术术具具有有广广泛泛的的适适用用范范围围.该方法的不足足是：灵敏度度低；要求达达到良好的色色谱分离，使使复杂体系的的分析存在难难度；溶剂峰峰抑制技术会会损失附近的的样品信号，，影响