单纯疱疹病毒核酸检测产品概述

单纯疱疹病毒核酸检测产品概述发布时间：2022-09-16（原创2022-09-15CMDE中国器审）一、单纯疱疹病毒结构单纯疱疹病毒（Herpessimplexvirus，HSV）是最早发现的人类疱疹病毒，也是人类病毒性疾病中最常见的病毒。HSV感染导致的单纯疱疹是一种常见的传染性皮肤病。HSV属于人类疱疹病毒科α病毒亚科，为线性双链DNA病毒，有HSV-1和HSV-2两种亚型。HSV病毒颗粒呈球形，由包膜，间层，核衣壳和核心构成。包膜为类脂双层膜，表面上有许多突起，含8种病毒糖蛋白（gB,gC,gD,gE,gF,gG,gH,gI和gJ）；核衣壳为162个壳粒组成的对称的二十面体；核心为病毒DNA分子及DNA蛋白；在包膜及衣壳间为间层，包含病毒编码蛋白质和复制启动相关的酶，覆盖在衣壳周围。二、单纯疱疹病毒感染特征HSV主要通过接触感染，感染可表现为溶细胞裂解和潜伏感染，其在上皮细胞进行裂解复制，在感觉神经元中则进入潜伏期，受到外界刺激时，病毒重新激活引起临床症状，潜伏病毒还可以通过激活的方式重新进入复制周期(Lei,Wangetal.2020)，并回到外周组织导致感染复发。HSV-1主要引起面部及腰以上皮肤黏膜病变，主要潜伏在三叉神经节；HSV-2主要引起生殖器及腰以下皮肤粘膜病变，主要潜伏在骶神经节。这两种病毒引起的疾病并没有绝对的界限，比如HSV-1可引起的生殖器疱疹，HSV-2也可引发口腔及周围感染。三、单纯疱疹病毒核酸检测产品批准情况临床可根据典型的临床表现进行诊断，而非典型病例可以借助病毒分离培养，抗体检测，抗原检测和核酸检测等手段。其中病毒分离培养被广泛当作是金标准，但是由于细胞培养周期较长，程序较复杂，在临床检验工作中应用受到限制；抗体检测是临床上常用来检测HSV感染的手段，病原体特异性IgM抗体常提示早期感染，特异性IgG抗体在原发性感染和再次感染时都可检出，且存在时间较长；抗原检测操作简便，但是对于低滴度样本的敏感性差；而采用荧光探针聚合酶链式反应（Real-timePCR）或其他分子生物学方法核酸检测技术，检测待检标本中的HSVDNA，是目前检测速度最快且敏感性最高的方法，可以从少量的标本中检测有无HSVDNA存在。目前我国境内已批准多家单纯疱疹病毒1型和2型检测试剂盒，均采用荧光探针PCR方法，检测靶标为HSVDNA，检测样本类型主要为男性尿道拭子，女性宫颈拭子,疱疹液等。临床试验主要通过与已上市同类产品进行对比研究，验证申报产品的临床性能可以满足相关要求，可用于单纯疱疹病毒感染的辅助诊断。FDA已批准单纯疱疹病毒1型和2型检测试剂盒检测靶标为HSVDNA或mRNA，检测样本类型包括皮肤粘膜损伤，口腔部位损伤，生殖器损伤，脑脊液等。其中在2014年FDA批准SIMPLEXAHSV1&2DIRECT用于怀疑中枢神经系统HSV感染患者的脑脊液样本的检测。境外临床试验主要通过与金标准病毒培养鉴定比较，或与测序比较，评价产品临床性能，确认产品是否可用于具有相关症状的患者。四、对单纯疱疹病毒核酸检测产品的思考对于产品适用人群的考虑：单纯疱疹大多呈局部皮肤黏膜的疱疹糜烂性损害，全身症状一般较轻，但初发性疱疹往往全身症状较为明显，如发热，乏力，淋巴结触痛等，HSV在各年龄阶层人群普遍易感，女性患病率比男性高，儿童营养不良或各种原因引起的免疫力低下也容易受到感染。临床试验应纳入具有相关临床症状的人群，且入组人群应有一定的代表性。对于产品适用样本类型的考虑：单纯疱疹病毒感染可发生在多个部位，如口腔疱疹，皮肤疱疹，眼疱疹，生殖器疱疹，疱疹性脑炎，全身散播性疱疹感染，新生儿疱疹等。其起始感染部位是由患者感染病毒的途径决定，而不是病毒的固有属性，因此患者感染部位具有多样性和复杂性，样本之间具有差异性，申请人应在产品设计阶段需将产品检测的样本类型纳入考虑，设计科学合理的临床试验进行验证。对于产品对比方法的考虑：如有已上市同类产品，应考虑预期用途，检测靶标，样本类型，试剂性能等方面选择合适的已上市同类产品作为对比试剂验证产品的临床性能。对于不同样本类型，如无已上市同类产品，可考虑使用病毒培养鉴定方法和测序