化学发光介绍课件

化学发光介绍

二零零九年元月化学发光免疫分析方法简介化学发光免疫分析（ChemiluminescenceImmunoassay，CLIA）是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、操作简便快速、标记物稳定性好、无污染、仪器简单经济等优点。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者，是免疫分析重要的发展方向。CLIA发展迅猛，已占各种免疫分析的首位，是目前放射免疫分析和酶联免疫分析最佳的取代者。

化学发光免疫测定是目前世界公认先进的标记免疫测定技术，化学发光免疫分析技术具有高度的准确性和特异性，成为检验方法中最为重要的技术之一。化学发光免疫分析技术作为疾病诊断的主要手段已被广泛用于机体免疫功能、传染性疾病、内分泌功能、肿瘤标志物、性激素、甲状腺功能等方面的体外诊断实验中。化学发光免疫分析的优势

灵敏度高灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性，其灵敏度可达10-22mol/L（RIA为10-12mol/L）。化学发光免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质，对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。宽的线性动力学范围

发光强度在4～6个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度（OD值）为2.0的范围相比，优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动力学范围，但放射性限制了其应用。光信号持续时间长辉光型的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。分析方法简便快速绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂（或复合试剂）的一步模式。结果稳定、误差小样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免除了各种可能因素（光源稳定性、光散射、光波选择器等）给分析带来的影响，使分析结果灵敏稳定可靠。安全性好及使用期长免除了使用放射性物质。到目前为止，还未发现其危害性；试剂稳定，保存期可达一年。目前化学发光开展的项目1、乙肝两对半（表面抗原、表面抗体、E抗原、E抗体、核心抗体）6、肝纤维化检测（HA,LN,PCIII,CIV,FN）2、肿瘤标志物（AFP,CEA,PSA,FPSA,FER,CA199,CA125,CA153,B-2MG…）7、不育不孕类（AOA,AEA,ASA,ATB.ACA.ZB,HCG）3、性激素系列（LH,FSH,TSH,E2,PRO,PRL,TES,HCG,B-HCG…）8、优生优育类（TOX,CMV,HSVI,HSVII,RUB）4、甲状腺功能（T3,T4,FT3,FT4,TSH,TM,TG,TPO…）9、其他类（ALB,一些药物测试等）5、糖尿病系列（C肽，INS,INS-AB,GAD,PINS,ICA…）10、不断发展中的其他临床检测项目。。。一、化学发光极大地提高了检测灵敏度

HBsAg是HBV感染的特异标志，HBsAg的出现就可作为乙肝的早期诊断，绝大多数HBV感染者外周血可出现HBsAg。化学发光免疫分析检测HBsAg灵敏度可达0.2ng/ml，而酶标（EIASA）检测的灵敏度为2ng/ml，放射免疫（RIA）灵敏度为1ng/ml，化学发光免疫分析极大地提高检测的灵敏度。因此，在急性乙肝早期化学发光免疫分析检测能及早检出HBsAg，缩短窗口期的时间，而酶标检测在乙肝早期往往HBsAg呈阴性；其次，可发现低浓度HBsAg携带者；在部分慢性乙肝患者中，由于机体缺乏对HBV包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，酶标检测可出现HBsAg和表面抗体（HBsAb）均阴性的情况，化学发光免疫分析检测的高灵敏度则可避免这些情况的发生，为正确判断病情提供依据。并且目前病毒性肝炎和其他病因所致的肝病甚多，而且临床症状、体征及肝功能无特殊改变差异，故只有依靠高灵敏度的病原学鉴别诊断。二、两对半定量可动态观察疗效和病情监测

疾病的发生、发展、疗效、预后是一个动态的变化过程，化学发光免疫分析定量检测乙肝“两对半”各项标志物的浓度变化可对乙肝的病程、治疗、预后起动态监测的作用，能够让医生对病情疗效作出合理的解释提供依据，指导治疗。1、定量检测HBsAg，对肝炎病人动态疗效观察很有价值。HBsAg和HBsAb浓度的变化，可以预见急性乙肝是否处于恢复期。如HBsAg浓度降低，HBsAb的浓度逐渐升高，可说明病情正往恢复期发展。反之，HBsAg浓度处于较高水平或上升趋势，而HBsAb一直处于较底水平，则容易发展为慢性乙肝或携带者。2、定量测定HBeAg和HBeAb浓度的变化，可以反映病情变化和治疗效果。明确测定HbeAg向抗-Hbe转换的时期，即表现为HbeAg浓度下降和抗-Hbe浓度升高的过程。高浓度的HbeAg还可间接提示病毒处于高复制状态，具有较高的传染性。高浓度的抗-Hbe一方面提示病情的好转，而在某些时候（如肝功能指标很差）可能与肝坏死、肝硬化、肝癌有关。3、HBcAb浓度的高低可以反映病毒感染的状态，高浓度的HBcAb提示乙肝急性感染；低浓度一般为恢复期或既往感染。有利于对慢性肝炎活动性和非活动性的判断。慢性乙肝呈抗-Hbc持续高浓度，故可以用于慢性乙肝的分类。4.有利于对慢性肝炎活动性和非活动性的判断。非活动性慢性乙肝各项指标相对稳定，活动性往往呈进行性变化。四、降低科室成本

大家都知道进口试剂因试剂价格昂贵,并且标准品等要单买，从而使乙肝“两对半”定量难以普及。乙肝“两对半”进口化学发光试剂价格较高，国产化学发光试剂价格比进口试剂的低的多。国家已实行了同一种方法学统一收费标准，不分国产或进口试剂，上海、浙江等城市已执行国产、进口化学发光试剂检测项目同一个收费标准。用质量、性能与进口乙肝“两对半”试剂相当的国产试剂，可以降低科室成本。化学发光与常用免疫分析方法对比方法优点缺点化学发光操作简单，成本较低，灵敏度较高，试剂较稳定进口试剂成本较高，国产试剂合理放射免疫试剂成本低，灵敏度较高操作复杂，放射性污染，有效期短酶联免疫试剂成本低，操作简单灵敏度低，适用于定性和半定量时间分辨灵敏度较高，试剂较稳定操作复杂，反应时间长，试剂成本较高电化学发光灵敏度较高，试剂较稳定试剂成本高，仪器维护费用较高，有本底干扰化学发光免疫分析法作为非放射性的免疫分析法，具有灵敏度高、所需时间短、无污染、检测范围宽等特点，随着各种自动发光分析仪器面市，以及不同类型的化学发光免疫分析试剂盒的不断推出，使得检测项目更多，检测速度提高，这些势必推动化学发光免疫分析的迅速发展，成为时间分辨、放射免疫和酶联免疫分析的取代者，已成为检验的主流,使实验室更好、更快地为临床服务。显著的经济效益对医院：增加了设备、患者多了一种选择，增加了盈利的渠道对科室：改进了方法，科室收益上升，科室地位得到提高对医生：摆脱了患者投诉的烦恼，增加了临床病情的判断能力。化学发光和酶法对比项目名称收费标准(元)每月标本量每年毛收入(万元)每年成本(万元)年净收入/万元(保守估计)乙肝两对半18015*22天71.28

23.76每人份60元

47.52化学发光免疫仅乙肝五项年净收入总计47.52万元

乙肝两对半25

15*22天