林业生物技术复习资料全

欢迎下载内容仅供参考《林业生物技术》复习重点一、概念与名词1、植物离体快速繁殖——又称微快繁，简称微繁，应用植物细胞的“全能性”理论，在无菌条件下，把离体的植物器官（种子等、组织（如花药、胚珠、形成层、皮层、胚乳等，放在人工控制的环境中，使其分化、繁殖，在短时间产生大量遗传性一致的完整新植株的技术。是利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖方法，是常规营养繁殖方法的一种扩展与延伸。2、试管外生根技术瓶生根难的问题，同时也大大缩短了育苗周期和节省了育苗成本。3、林业生物技术生产和提供人们所需的生态环境、生物质产品和公益性服务的科学技术4、细胞全能性——是指植物细胞具有发育成一个完整植株的全部遗传信息，在适当条件下能够形成完整植株5、组织培养织进行离体培养的技术。6、胚珠培养连同胎座一起取下来培养。7、离体叶的培养组织分化出茎和根。其中叶片培养是一个典型的代表。8、植物细胞工程材料进行遗传操作的技术，即对植物体的任何一个部分（器官、组织、细胞、原生质体）导使其称为完整植株的技术。9、外植体——外植体指植物组织培养中用来进行无菌培养的离体材料，可以是器官、组织、细胞和原生质体等。10、细胞悬浮培养——细胞悬浮培养是将游离的植物细胞按一定的细胞密度，悬浮在液体培养基中进行培养增殖的技术。11、花粉培养使花粉粒脱分化，进而发育成完整植株的过程。12、原生质体——原生质体是指植物细胞中除去细胞壁具有细胞全能性的裸露部分。13、转基因林木——转基因林木是指利用基因工程技术改变基因组构成，用于林业生产或者林产品加工的森林植物。其产品的其它相关产品。14、植物生物反应器技术有商业价值的生物制品的方法。15、诱导抗病性系统抗性的现象。16、反义技术——反义技术是指根据碱基互补原理，人工合成或生物体合成特定互补的DNA或RNA片段，以抑制或封闭某些基因表达的技术。17、玻璃化这种现象通常称为玻璃化。18、基因工程——基因工程又称为重组DNA或合成不同生物的遗传物质DNA片段，在体外切割，拼接形成重组DNADNA与载体的遗传物质重新组合，再将其引入到没有该DNA的受体细胞中，进行复制和表达，生产出符合人类需要的产品或创造出生物的新性状，并使之稳定地遗传给下一代。19、驯化——驯化是指试管苗移植前可将培养瓶移到自然光照下锻炼自然温度的昼夜温差现象，使其壮实，然后再开瓶移植，经过较低温、湿度的处理，以适应自然温、湿度条件。20、脱毒苗木。二、是非与选择1然产特离体生产，林业蛋白质工程、酶工程、能源生物技术、环境生物技术、药材生物技术等其它林业生物技术。2、植物细胞全能性的实现需经过细胞脱分化和再分化过程。3、根据起因不同，植物细胞的死亡分为病理性死亡和生理性死亡。4、器官培养程序包括：无菌外植体的获得、初代培养物的建立、培养物形态发生、植株再生等环节。5、植物营养器官培养主要包括：根段培养、茎段培养、叶培养。6、植物繁殖器官培养主要包括：花器官培养、幼果培养、种子培养。7、原生质体培养的体细胞变异大于细胞培养的变异，而细胞培养的变异又大于组织器官培养的变异。8、优良变异的筛选方法有：直接筛选法、间接筛选法。9、细胞变异的类型包括：自发产生的变异、诱发产生的变异。10、分裂素/生长素的比例是控制芽和根形成的一个重要条件，比例高时产生芽，比例低时产生根。11、由完整的植物器官分离单细胞，叶片是分离单细胞的最好材料。12、成功的悬浮细胞培养体系必须满足三个条件：悬浮培养物分散性良好，均一性好，细胞生长迅速。13、植物细胞培养可分为：单细胞培养、单倍体培养、原生质体培养。14、常用的植物生长调节剂有两大类：生长素类，如2,4-D、IAA、NAA等；细胞激动素类，如6-BA、TDZ和ZT。15养基是MS、或它们的衍生培养基。16、花卉基因工程研究的容主要有：香味基因工程、花发育基因工程、花卉保鲜基因工程、花卉株型基因工程、花卉抗性基因工程等五大方面。17、自1986年第一株转基因树问世以来，不同树种的转基因工作相继开展。18、对于植物悬浮细胞培养的生物反应器应符合：合适的氧传递、良好的流动性、低的剪切力等要求。19属、有机化合物、无机化合物等。20、从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。21便于低温保藏，一般母液配成比所需浓度高10-10022升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。23、植物离体培养常用的主要糖类是蔗糖。24、无菌操作接种时，在操作前和操作期间要经常用于擦拭双手和台面的酒精浓度是70。25（√）26（╳）27（均会影响培养细胞的全能性（√）28、愈伤组织是尚未分化的原始细胞团，其生理年龄几乎为零（√）29、每种激素必须单独配成母液，浓度一般配成1mg／ml（√）30、一般来讲，继代时间越长、继代次数越多，细胞变异的几率就越大（√）31、茎尖培养与脱毒中，能否培养成功关键在于培养基（×）32、平板培养是花粉培养的一种方式（√）3325-30（√）34、环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发，一般要求80％-90％的相对湿度。（×）35、无病毒植株实际应用中最大的问题并非重复感染（×）36、机械法分离原生质体的主要缺点是原生质体的产量很低、方法繁琐费力（√）37（×）38、植物组织培养的培养基PH5.8－6.0（×）39、花粉培养是将花粉从花药中游离出来，成为分散或游离态进行培养（√）40、单细胞培养中选择优良细胞株常用平板培养法（√）三、简答与问答1答：1、外植体）（））4）外植体的生理状态，）（））、芽的增殖途径、培养基1）（））（））培养基中其它因子、培养条件 （1）光照（）培养温度）容器气体成分）湿度2、植物离体快速繁殖的常见问题有哪些？答：1、污染， 、外植体褐变 、试管苗的玻璃、试管苗移栽的成活率 、遗传稳定性3、植物离体快速繁殖中外植体褐变的影响因素有哪些？如何克服？答：影响外植体褐变的因素有：（）植物种类和品种（基因型，含有单宁、酚类化合物、多酚氧化酶活性大、色素含量多的植物较易发生如苹果取样时间不当，培养时间过长，长时间不继代（4）培养基，无机盐浓度过高，细胞分裂素过高温度，过高（7）外植体受损程度，受伤严重，消毒剂毒害。克服措施有：（1）外植体选择的时间、季节、部位，遮光处理。（2）适宜的培养基。（3）合适的培养条件。加入抗氧化剂，使用VC，PVP（5）（6）用消毒剂。4、林业生物技术的基本特征是什么？（P8-9）（）林业生物技术是以森林群落（森林植物、动物和微生物）为生物反应器进行产品生产。林业生物技术为人类提供生态产品、生物质产品和公益服务。5、花器官培养的意思有哪些？答：花器官培养的意义有：通过离体花芽培养可了解整体植物和源激素在花芽性别决定中所起的作用；可以了解花器官各部分对果实和种子发育的作用；、外源激素在果实种子发育过程中的调控作用；6、简述种子培养的技术答：种子培养技术包括：0.1％升汞消毒10-20min。幼嫩的或发育不全的种子，宜用饱和漂白粉消毒15-30min。若种子上有绒毛或蜡质，应先用95％酒精或吐温80处理，提高消毒效果。对壳厚难萌发的种子，可去壳培养。培养基：促种子萌发用MS6-BA2,4-D。无胚乳种子（棉花、大豆、花生、向日葵、番薯、马铃薯、苹果、烟草、薄荷）应适当加生长素。1-3。打破休眠可加GA，或在接种前浸种处理。接种：把种子按每瓶 3-5粒放人培养瓶中，均匀排列。培养温度 20-28℃，培养光强1000-20001x，每天光照时间10-12h。7、简述组培中细菌污染的症状与致因为白色，与培养基表面界限清楚，接种后1~2引起细菌污染的可能原因：外植体、培养基灭菌不彻底、操作不当、接种工具、呼吸、不干净的手、室不干净等。8、简述组培中真菌污染症状与致因3~109、简述细胞悬浮培养的优点适宜大规模培养，成为细胞工程中独特的产业。10、简述植物组织培养所需营养与环境条件答：营养条件包括：无机营养（大量元素、微量元素，有机营养（维生素类、肌醇、氨基酸、天然复合物长调节物质，琼脂，碳源，抗生物质，抗氧化物，活性炭等。环境条件包括：温度，光照，湿度，渗透压，pH值，气体。11、简述 一个标准的组织培养实验室必须具备的条件答：一个标准的组织培养实验室必须具备的以下条件第一、清洗和储存玻璃器皿、塑料器皿和其他实验器皿；第二、培养基的配制、灭菌和储存；第三、植物材料的无菌操作；第四、可控温度、光照、湿度的条件，以便对材料进行体外培养；第五、培养物生长发育过程的显微观察。12、简述MS培养基的主要特点1962年由MurashigeSkoog有些培养基是由它演变而来的。13、简述继代培养时材料玻璃化的解决办法答：继代培养时材料玻璃化的具体解决办法为：①增加培养基中的溶质水平，以降低培养基的水势；②减少培养基中含氮化合物的用量；③增加光照；④增加容器通风，最好进行C02施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的作用；⑤降低培养温度，进行变温培养，有助于减轻试管苗玻璃化的现象发生；⑥降低培养基中细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸。14、简述基因工程有突出的特征：答：基因工程有两个重要特征：第一是可把来自任何生物的基因转移到与其毫无关系的任何其他受体细胞中，因此可以实现按照人们的愿望，改造生物的遗传特性，创造出生物的新性状；第二是某一段DNA可在受体细胞进行复制，为准备大量纯化的DNA片段提供了可能，拓宽了分子生物学的研究领域。四、实践与案例1、试述提高试管苗驯化移栽成活率的措施答：试管苗驯化移栽成活率低的原因：根系发达及长势好者移栽成活率高。提高试管苗驯化移栽成活率的措施：努力提高试管苗的质量，要求：有针对性调整培养基配方及培养条件。及时出瓶驯化，避免苗老化。出苗时可以考虑使用生根粉。选用合适的基质，创造适宜的培养条件。素，一般一周一次，初期浓度低0.15-0.2％，后期可增加到0.3％。逐渐延长光照时间，增加光照强7-1010002、试述茎尖培养的方法及步骤答：茎尖培养的步骤有：取材——材料处理及消毒——接种——培养——驯化移栽取材（－2c（前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽。②从试管苗获取。材料处理及消毒将采集到的茎尖切成0.5-1.0cm（休眠芽预先剥除鳞片→→流水冲洗2-4h→→75％30s→→稀释205-8min(取自老枝条上的可适当延长时间）→→用无菌水冲洗数次，准备接种。接种接种前再剥掉一些叶片，使茎尖0.5cm→→接种。要求：随切随接，动作迅速。亦可将切下茎尖材料在1－5VC液中浸一下。培养1）培养①基本培养基 MSWhiteB5Heller培养基②蔗糖作碳源效果好，浓度2－3。③激素，NAA）和有机添加物有明显影响。但激素浓度以0.1mg/L茎尖生长状态：生长太慢：茎尖不增大→→变绿→→细胞逐渐老化→→休眠。原因:生长素浓度太低；温度过低或过高。生长太快：茎尖迅速增大→→愈伤组织→→丧失成苗能力。原因:生长素浓度过高；光照太弱或温度太高。生长正常：茎尖基部稍增大并形成少量愈伤组织，茎尖颜色逐渐变绿，并伸长，叶原基发育成可见的小叶，进而形成小苗。2）初代培养条件：每天光照16h/d，照度1500-2000Lx，温度25±2℃。1小段→→再转入新培养基→→建立和维持了茎尖无性系。（即微型扦插）继代培养可用MS诱导生根：采用I／2MS培养基 加入一定的生长素类调节物质，如NAAIBA等。新梢基部入50或100mg/l的IBA溶液处理4-8h，然后转移到无激素的生根培养基中。驯化移栽入土：在生根培养1理（温、光、湿、气。3、试述植物离体培养过程中无菌操作的注意事项答：无菌操作注意事项主要有：实验器具和材料的准备。75的酒精擦拭超净工作台，然后室及超净工作台用紫外灯杀菌20min-30min。5-10min进入缓冲间，以75洗手和手臂，更换无菌服、帽子和口罩进入接种室。用70－75在其火焰上灼烧，冷却待用。取流水冲洗（至少30min）过的外植体，用一定的消毒剂浸泡消毒，用无菌水冲洗3~4次，放入无菌培养皿中，置于酒精灯火焰下方，用无菌的接种器械进行分离、切割或其他处理。口，盖上瓶塞。收拾台面。4、红叶石楠试管苗驯化和移栽基质配制答：基质的基本要：疏松通气、适宜的保水性、清洁卫生。/V/V=6/3/1955、试述红叶石楠组培苗过渡移栽管理答：（1）组培苗出瓶移栽从异养过渡到自养过渡的一个炼苗过程。防病管理保持环境清洁、尽量减少污染是组培苗移栽成活的根本所在。幼苗浇灌时应尽可能选择清洁的水源，移栽当天喷施（0.33-0.50）MS营养液，并喷施800-1000倍甲基托布津或百菌清或500倍多菌灵药液，每隔一周左右喷施一次，连续喷施3-4次，前后两次交替使用不同杀菌剂效果更好。湿度管理有效的湿度管理也是保证组培苗移栽成功的关键因素之一，红叶石楠组培苗出瓶前是在100％相对湿度条件下生长的，出瓶初期保持高湿的小环境至关重要。红叶石楠移栽初期3-5d棚空气湿度需保持在95％以上，5d后仍需半封闭保持80％相对湿度2-3周