免疫增殖病及其检测课件

免疫增殖病及检测

上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科彭奕冰免疫增殖性疾病的免疫损伤机制免疫球蛋白异常升高的临床疾患免疫球蛋白异常升高的常用的免疫检测方法概述免疫增殖病(immunoproliferativedisease):是指淋巴系统异常增殖所引起的疾病。按细胞表面标志分类的免疫增殖性疾病免疫增殖性疾病的免疫损伤机制一、浆细胞异常增殖骨髓瘤患者的骨髓体外培养→瘤细胞自发性增殖，培养上清液瘤细胞所分泌的IL-6明显↑。抗IL-6抗体能消除瘤细胞的自发增殖，IL-6为骨髓瘤自分泌增殖因子。IL-6↑→IL-4↓二、正常体液免疫抑制三、异常免疫球蛋白增生所造成的病理损伤四、溶骨性病变免疫球蛋白异常升高的临床疾患：恶性单克隆丙种球蛋白病多发性骨髓瘤巨球蛋白血症重链病轻链病良性单克隆丙种球蛋白病非特异性免疫球蛋白增殖症常见免疫球蛋白增殖病一、多发性骨髓瘤免疫球蛋白:IgMIgGIgAIgEIgD重链μγαεδ轻链κ(kappa)λ(lamda)

“轻链失衡理论”的提出浆细胞产生Ig模式图轻链214aa10′重链450-570aa18′轻链的代谢肾脏10%排出90%肾小管降解、重吸收游离轻链等电点PH5.9与肾小管PH接近→肾小管损害临床表现骨骼表现肾脏表现血液学表现高粘滞度综合征易感染性淀粉样变其他多发性骨髓瘤临床分型IgG：多见，占50%～60%，又分IgG1、IgG2、IgG3、IgG4型。典型症状。IgA：占25%，又分IgA1、IgA2型。高黏综合征多见。IgD：很少见，仅占1.5%，瘤细胞分化较差，几乎100%生存期短。IgM(7S)：少见，易发生高粘滞血症或雷诺氏现象IgE：很罕见。非分泌型：溶骨病变较少，神经系统症状多见免疫浊度测定分类透射浊度法散射浊度法透射浊度法和散射浊度法的光路检测器A(透射浊度法)检测器B(散射浊度法)I0I浑浊样品光源321TimeScatter抗体加入后测定速率

速率散射法1.加入缓冲液2.加入样本3.加入抗体Rate抗原浓度测定范围抗体过剩抗原过剩Ag*Ab抗原抗体的平衡平衡点三、血清区带电泳HYDRASYS电泳\点样舱控制面板染脱色舱全自动电泳仪主要特点1.琼脂糖凝胶作为电泳介质2.采用国际专利的一次性加样梳3.电泳速度快4.自动进行点样、孵育、染色、脱色、干燥5.所有胶片可长期保存6.可做项目丰富，达16项phoresis一次性加样梳一次性加样梳是法国SEBIA公司独创的国际专利产品,具有加样量准确、均匀、样品使用量少，每次(10μl）。绝对没有样品间交叉污染。（一次性加样梳在试剂盒中配备）。电泳介质为琼脂糖凝胶。注意每次使用时胶片的正面永远面对自己操作中,不要碰触胶片的正面.肝硬化胃肠道蛋白缺失肾病综合症急性炎症期升高：各类急性炎症、感染、组织损伤、坏死、恶性肿瘤、口服避孕药时慢性炎症期升高：各类急性炎症、感染、组织损伤、坏死、恶性肿瘤、口服避孕药时多克隆抗体增生症四、免疫电泳五、免疫固定电泳六、冷球蛋白检测巨球蛋白血症(macroglobulinemia)不同于浆细胞瘤和其他浆细胞恶性增殖的临床疾病，与淋巴瘤疾病相似，表现为淋巴结、肝脾肿大。

本病骨髓侵润、骨质破坏、骨痛骨折表现少，主要表现为骨髓外侵润（淋巴结、肝脾肿大）。五聚体的IgM(19S)异常增高→血粘滞度过高综合征。起病隐匿，进展缓慢细胞异常增殖所致症状：最常见的症状-----疲劳、乏力、体重减轻M蛋白所致症状

10%～30%患者出现本周蛋白，但发生肾损害者较少仅20%。免疫学检查血清免疫电泳示单克隆IgM增高，一般>10g/L，是该病的特点。其他可能存在冷球蛋白，类风湿因子或冷凝集素。发病年龄大、血清中单克隆IgM>10g/L和骨髓中淋巴细胞样浆细胞浸润是该病诊断的必要依据。

轻链病是突变的单克隆浆细胞产生的大量轻链，血浆及尿中轻链含量异常增加。部分过多的轻链蛋白沉积于肾脏和其他内脏组织引起淀粉样变性。本病发病年龄较轻，常以发热、贫血、严重的肾功能损害为主要症状。免疫学检测：血清中Ig水平可明显降低或处于正常低限，但有异常的轻链水平升高，κ/λ型比值明显异常，血清及尿中往往可同时检测出相同类型的Ig轻链片段。重链病根据重链的类别分类，目前已报道了、、、四种重链病，但型极为罕见。

3种重链病的特征特点γHCDαHCDμHCD好发年龄（岁）平均50岁10～30岁成年（中老年）临床特点淋巴结肿大、肝脾肿大、腭（悬雍）垂红肿、细菌感染贫血等吸收不良征候群、散腹部淋巴结肿大、呼吸道炎症等。内脏淋巴结肿大组织特征易变，多形态淋巴样细胞在淋巴结和骨髓中浸润小肠和肠系膜淋巴结有淋巴样细胞浸润骨髓浆细胞有空泡，常以淋巴样细胞出现乙酸纤维膜电泳不均一的小M峰M带可有，多数不明显正常或低丙种球蛋白血症血清免疫电泳自由γ链80%有自由α链自由μ链本周蛋白无无多数有，属κ链骨质破坏罕见无约1/3有预后不良，死于细菌感染良好慢性淋巴细胞型较好疗效评价及预后监测IgG重链病预后较差，患者死于细菌感染，通常在几个月至5年之内病情进行性恶化。IgA重链病预后较好。IgM重链病至今仅发现19例。IgD重链病仅见1例。

四种浆细胞疾病的比较疾病多发性骨髓瘤巨球蛋白血症重链病轻链病性别男60%男80%男100%男50%视力障碍+++-+淋巴结肿大少见多见多见多见肝脾肿大少见多见多见少见溶骨性改变多见少见不见少见肾功能损害+++-++M蛋白种类IgG，IgA，IgD或EIgM重链（γ，α或μ）轻链（κ，λ）诊断后平均生存期2年4年＜1年Κ型：＞2年Λ型：＜1年良性单克隆丙球蛋白病--------又名原因不明的单克隆丙球蛋白病，血中出现单克隆丙球蛋白，但不伴有浆细胞恶性增殖。此病发病率明显与年龄有关：Kochwa报道21岁以上献血员发病率0.1～0.3%70岁以上发病率3%90岁以上发病率14%241例BMG20～35年跟踪结果：①稳定者46例（19%）；②死亡者113例（47%）；③M蛋白增高（＞30g/L），但未发生其他疾病者23例（9.5%）；④发展为恶性疾病者59例（24.5%）：多发性骨髓瘤39例、巨球蛋白血症7例、恶性淋巴增殖性疾病5例、系统性淀粉样变8例此病无恶变时无需特殊治疗恶性与良性单克隆丙种球蛋白病的鉴别诊断恶性单克隆丙种球蛋白病良性单克隆丙种球蛋白病症状骨髓瘤或淋巴瘤的症状无症状贫血几乎都出现一般无骨损害溶骨性损害很普遍不常见骨髓象浆细胞＞10%，形态正常或异常浆细胞＜10%，形态一般正常M蛋白常高于20g/dl低于20g/dl正常Ig降低增高或正常游离轻链常出现阴性病人

IgGIgAIgMKAPLAMK/L（g/l)姓名8～150.85～3.00.5～2.51.72～3.830.81～1.921.47～2.95顾佩佩46.2↑0.23↓0.17↓0.26↓16.80↑0.02↓陈国良7.36↓0.31↓26.90↑5.11↑1.025.01↑

余明