高二生物【7】微生物的实验室培养

微生物的实验室培养高二年级生物学果酒泡菜酸奶腐乳法国科学家巴斯德研究和利用微生物的前提——防止杂菌污染、获得纯净培养物为培养的微生物提供合适的营养和环境条件确保无处不在的其他微生物无法入侵微生物的实验室培养无菌技术2培养基的制备1微生物的纯化培养3培养基的制备1盛有液体培养基的锥形瓶盛有固体培养基的锥形瓶和培养皿长有大肠杆菌菌落的固体培养基按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基（一般都含有水、碳源、氮源和无机盐）1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成培养基组分提供的主要营养牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸盐和维生素蛋白胨10g碳源、氮源和维生素NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL氢元素、氧元素乳酸杆菌霉菌大肠杆菌破伤风杆菌计算、称量溶化灭菌灭菌后的培养基倒平板无菌操作台1.灭菌后的培养基待温度降到50℃左右时,才能用来倒平板；2.锥形瓶口要通过火焰；3.平板冷凝后要倒置；4.若不慎将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则不用该平板来培养微生物。注意事项无菌技术2100℃煮沸5-6min煮沸消毒化学药剂巴氏消毒紫外线70-75℃煮30min或80℃煮15min酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等紫外线照射30min消毒防止杂菌污染，有效避免操作者自身被微生物感染灭菌湿热灭菌利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法。高压蒸汽灭菌效果最好。干热灭菌使用干热灭菌箱，在160-170℃中加热1-2h可达到灭菌目的。灼烧灭菌将微生物的接种工具直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可彻底灭菌。微生物的纯化培养3接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体培养物由单一个体繁殖所获得的微生物群体纯培养物获得纯培养物的过程纯化培养纯化大肠杆菌通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步稀释分散平板划线法将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面培养稀释涂布平板法平板划线法视频网址链接：/s?__biz=MzU5MzQwMjI2Ng==&mid=2247483882&idx=1&sn=80348c0841ce9a5016b44886da42ba9c&chksm=fe10411fc967c8099832b6871b7761f60bcf104f8a55cd07f67c3ba9bf17384b261a605c216f&token=1330435245&lang=zh_CN#rd平板划线操作的注意事项1每次划线前后都要灼烧接种环2灼烧接种环后，要等其冷却后再划线3在做第二次以及其后的划线操作时，必须从上一次划线的末端开始划线系列稀释操作注意：稀释时使用的移液管要提前灭菌处理。

操作时，试管口和移液管应在离火焰1-2cm处。涂布平板法视频网址链接：/s?__biz=MzU5MzQwMjI2Ng==&mid=2247483883&idx=1&sn=a9d505cde065d66a0041e86ae29d5e37&chksm=fe10411ec967c80821974f91c634c1c59902b2e3bf2330e2742a84987419c040a96e5a8d0a7a&token=1330435245&lang=zh_CN#rd涂布平板操作的注意事项1将涂布器末端浸在盛有70%酒精的烧杯中，取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。2操作中一定要注意防火！不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。恒温培养箱未接种的培养基（空白对照组）接种的培养基（实验组）教学反馈与评价4能够说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要生长因子自变量是葡萄糖的有无，