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文档简介
关于生物化学第二章蛋白质化学第1页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第一节氨基酸氨基酸的通式第2页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五20种氨基酸的结构第3页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第4页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第5页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第6页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第7页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第8页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第9页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五两种C原子的标示方法(易混淆)第10页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五氨基酸的构型第11页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五蛋白质中的氨基酸都是L型第12页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五不常见氨基酸4-羟脯氨酸5-羟赖氨酸第13页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五
硒代半胱氨酸(有时被认为是第21种氨基酸)第14页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五氨基酸的性质氨基酸的两性性质第15页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五氨基酸的滴定曲线(甘氨酸为例)第16页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第17页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五等电点(概念)氨基酸所带净电荷为零时氨基酸溶液的pH值称为该氨基酸的等电点(pI)。第18页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五侧链基团带有可解离基团的氨基酸的等电点怎么计算?第19页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五pK1=2.19pKR=4.25pK2=9.67第20页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第21页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第22页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第23页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五必需氨基酸人体(或其它脊椎动物)必不可少,而机体内又不能合成的,必须从食物中补充的氨基酸,称必需氨基酸。对成人来说,这类氨基酸有8种,包括赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸和苯丙氨酸。对婴儿来说,组氨酸和精氨酸也是必需氨基酸。
第24页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五请记住上述必需氨基酸携(缬)一(异)两(亮)本(苯)单(蛋)色书(苏)来(赖)——携一两本单色书来笨蛋来宿舍晾凉鞋第25页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五茚三酮反应氨基酸与茚三酮水合物共热,可生成蓝紫色化合物,其最大吸收峰在570nm处。由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在正比关系,因此可作为氨基酸定量分析方法。氨基酸参与的化学反应第26页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五氨基酸与茚三酮反应但脯氨酸与茚三酮反应生成黄色第27页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五纸层析法第28页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五氨基酸与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应
(sanger反应)DNFB(dinitrofiuorobenzene)DNP-AA(黄色)++HF弱碱中氨基酸第29页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五氨基酸与苯异硫氰酯(PITC)的反应
(Edman反应)PITC(phenylisothiocyanate)+苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-AA)(phenylisothiohydantion-AA)弱碱中(400C)(硝基甲烷400C)H+第30页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第二节肽肽是氨基酸通过肽键连接在一起形成的化合物。通常把分子量小于10000的称为肽,而分子量更大的称为蛋白质。第31页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五肽键(peptidebond)第32页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五氨基末端羧基末端Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu氨基酸残基第33页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五几种生物活性肽1.谷胱甘肽(glutathione,GSH)GSH是体内重要的还原剂第34页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五GSH过氧化物酶H2O22GSH2H2OGSSG
GSH还原酶NADPH+H+NADP+
谷胱甘肽在体内参与氧化还原过程,作为某些氧化还原酶的辅因子,或保护巯基酶,或防止过氧化物积累。第35页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五
体内许多激素属寡肽或多肽2.多肽类激素及神经肽
由下丘脑分泌,其功能是促进腺垂体释放促甲状腺素(调节糖代谢)。第36页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五当我们搬进一个新寝室时,我们会如何向我们的外校的同学对其进行描述?第37页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五当你看到这张图片时,你怎么向别人描述?第38页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第三节蛋白质的结构蛋白质的分子结构包括
一级结构(primarystructure)二级结构(secondarystructure)三级结构(tertiarystructure)四级结构(quaternarystructure)第39页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第40页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五蛋白质结构的主要层次一级结构四级结构二级结构三级结构primarystructuresecondarystructureTertiarystructurequariernarystructure超二级结构结构域
supersecondarystructureStructuredoman第41页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五一级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能的基础。蛋白质一级结构第42页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五蛋白质一级结构测定流程:
确定多肽链的数目拆开并分离出每条肽链水解测定肽链的氨基酸组成测定肽链两末端氨基酸残基肽链水解为小片段并测序片段重叠得出整个肽链的序列确定二硫键的位置第43页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五肽链末端分析N-末端测定
(1)DNFB法(2)PTH法第44页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五DNP-氨基酸第45页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第46页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五C-末端测定(1)肼解法缺点:Asn,Gln,Cys被破坏,Arg转变为鸟氨酸。第47页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五(2)羧肽酶法羧肽酶能特异水解C末端氨基酸残基,其中羧肽酶A能释放除Pro,Arg,Lys以外所有的氨基酸残基,羧肽酶B只能水解以Arg和Lys为C末端残基的肽链。第48页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五二硫键的断裂第49页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五第50页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五肽链的断裂(1)酶裂解法第51页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五(2)化学裂解法溴化氰(CNBr)只断裂Met羧基参与形成的肽键。由于大多数蛋白质只含有很少的Met,因此CNBr断裂产生的肤段不多。第52页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五Sample第53页,共59页,2022年,5月20日,11点4分,星期五DNP-Glu第54页,共59页,2
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