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文档简介

EZNAEndo-freePlasmidMiniKitⅠ中文操作说明自己翻译,福利哦10-20mL5mLLB/ampicillin(50ug/mL有目的质粒的大肠杆菌,37℃振荡培养12-16h1.5-5mL某g1min,集菌体沉淀250uLSolutionⅠ/RNaeA,吹打重悬菌体,这一步对提高质粒产量至关重要250uL的SolutionⅡ,4-6裂解液。在室温孵2min125uL的预冷BufferN3(提前置于冰上),出现白色絮状沉淀,≥12000某g室温离心10分钟(4℃更好)1.5mL0.1ETRSolution。颠倒混匀7-1010minETRSolution7.42℃5min,某g25℃3minETRSolution会在管底呈现蓝色分层1.5mL0.596%-100倒混匀6-7次,室温孵育1-2min8700uLHiBindTMDNAMini2mL管内(试剂盒提供),10000g1min108500uLBufferHB留的蛋白质,并得到高质量的质粒700uLDNAWahBuffer注:浓缩的12700uLDNAWahBuffer弃滤液,将空柱子套回离心管,以最大转速(≥13000g)2min,干燥柱子。注:这一步是为了除去残留的乙醇1.5mL30-50uLEndotoFreeElutionBuf

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