肝功能试验课件

肝功能试验授课教员：李鹏学时数：5学时第一节肝脏的结构与功能一、肝细胞的结构：

肝细胞是由胞质、胞核与胞膜组成。胞质内含有丰富的细胞器。1、线粒体：人类每个肝细胞内平均含有400个线粒体。其主要功能是将糖、氨基酸、脂肪酸等通过三羧酸循环和氧化磷酸化，产生能量。对缺氧特别敏感，易于损害。2、内质网：分为粗面与滑面两种，前者是合成各种蛋白质与酶类的场所；后者是糖原合成、贮存与分解的场所，胆红素、激素、染料、药物、毒物等的结合、灭活和解毒也在此进行。3、溶酶体：内含十种以上的水解酶类，是肝细胞的“清洁工”。4、高尔基体：与分泌和排泄代谢产物以及合成胞质膜的糖蛋白有关。5、饮液泡：肝细胞的近肝窦面较多，与物质的吸收与输送相关。8、核仁：胞核含1－2个核仁，主要含核糖核酸与蛋白质。7、染色体：遗传信息。6、细胞质中的基质：含糖酵解、磷酸戊糖通路、氨基酸激活、脂肪酸与胆固醇合成的多种酶类。9、核膜：双层，部分地方二层融合出现小孔，核内外物质通过它可以交换。二、肝脏的功能：1、在糖代谢中的作用：是合成与贮存糖原的主要器官。只有肝脏含有可将6磷酸葡萄糖转化为葡萄糖的葡萄糖－6－磷酸酶。2、在蛋白质代谢中的作用：除成年人的γ-球蛋白与血红蛋白外，大多数血浆蛋白质是在肝脏中合成。3、在脂类代谢中的作用：是体内脂肪酸、甘油三酯、甘油磷酸与胆固醇合成与转化的主要场所。4、肝脏的生物转化和解毒作用：第二节肝脏功能的检测一、肝功能试验的临床价值1、协助诊断各种肝病，有助于了解肝脏损害的程度、转归和预后等。2、辅助鉴别诊断黄疸，确定黄疸的性质和病因，决定其治疗方针。3、测知全身性疾病等对肝脏的侵犯或影响。4、了解各种工业毒物、药物、物理因子对肝脏的损害。5、肝胆系病人术前测定肝功能。三、肝功能试验的分类（一）、根据代谢功能分类：1、胆色素代谢：血清总胆红素、1分钟胆红素，黄疸指数，尿内胆红素和尿胆原，粪内尿胆原测定。2、蛋白质代谢：血清白／球蛋白，蛋白电泳，各种絮状浊度试验，血氨，血和尿内氨基酸测定。3、糖代谢：血糖、葡萄糖耐量试验，半乳糖耐量试验等。4、脂肪代谢：血清胆固醇和胆固醇酯，甘油三酯，脂蛋白电泳等。5、酶代谢：血清转氨酶，碱性磷酸酶，乳酸脱氢酶等。6、染料排泄试验：磺溴酞钠和吲哚氰绿排泄试验。7、解毒功能试验：马尿酸试验，白浪多息试验8、其他代谢功能：各种凝血因子，血清维生素B12，维生素A，血清铜和铁，血清胆汁酸测定等。9、免疫功能试验：（1）、体液免疫：IgG、IgA、IgM测定，各种自身抗体测定。（2）、细胞免疫：淋巴细胞转化试验，白细胞移动抑制试验、花环形成试验等。（3）、吞噬机能：吞噬细胞功能测定。（4）、肝炎抗原和抗体：10、肝脏血流动力学测定：二、根据结构和功能的相关性分类：1、反映肝实质细胞损害，肝细胞变性、坏死：转氨酶，乳酸脱氢酶同工酶，磺溴酞钠试验，吲哚氰绿试验，血清胆红素和尿胆原等。2、反映肝脏间质炎症试验：γ球蛋白，絮浊试验。3、反映肝内或肝外胆汁淤积：血清胆红素，总胆固醇，碱性磷酸酶及其同功酶，γ-谷氨酰转肽酶等。4、反映肝脏纤维化程度：单胺氧化酶5、反映有效肝细胞总数：血清白蛋白，凝血酶原时间，磺溴酞钠试验。6、反映肝内占位性或浸润性病变：碱性磷酸酶及同功酶，乳酸脱氢酶同工酶，5-核苷酸酶等。7、反映原发性肝癌或肝细胞异常增生：甲胎蛋白2、生成：①衰老的红细胞在单核吞噬细胞系统被破坏，首先除去珠蛋白而分离出血红素；②血红素在单核吞噬细胞内微粒体的血红素加氧酶的作用下，将血红素卟啉环氧化断裂，释放出CO和铁，并形成胆绿素；③胆绿素在胆绿素还原酶催化下生成胆红素Ⅸa。二、胆红素的运输：在单核吞噬细胞中生成的胆红素可进入血液循环，在血浆内主要以胆红素-白蛋白复合体的形式存在和运输。与白蛋白较紧密地结合成复合体，一方面改变了胆红素的脂溶性，另一方面又限制了它自由通过各种生物膜的能力，不致有大量游离胆红素进入组织细胞而产生毒性作用。

有一部分胆红素与白蛋白共价结合，可能是白蛋白分子中赖氨酸残基的ε-氨基与胆红素一个丙酸基的羧基形成酰胺键，在血中停滞时间长，称为δ-胆红素。可作为对急性黄疸性肝炎恢复期观察的可靠指征及判断严重肝病预后的指征。四、黄疸的发生机制

黄疸是指高胆红素血症引起皮肤、巩膜和粘膜等组织黄染的现象。正常人血清胆红素小于1mg/dl（10mg/L），其中未结合胆红素占80％。当胆红素超过正常范围，但又在2mg/dl以内，肉眼难于察觉，称为隐性黄疸。如胆红素超过2mg/dl（可高达7-8mg/dl）即为显性黄疸。分类机理举例胆红素形成过多红细胞破坏过多无效血红素产生过多溶血性黄疸旁路性高胆红素血症肝细胞损害肝细胞对血液内胆红素摄取障碍结合胆红素形成障碍肝细胞分泌胆红素障碍摄取结合和分泌的混合型障碍先天性非溶血性黄疸新生儿生理性黄疸甲基睾丸素类药物引起的黄疸病毒性肝炎肝硬变肝细胞性肝癌胆道阻塞肝内胆道阻塞肝外胆道阻塞原发性胆汁性肝硬变胆道结石和炎症五、黄疸的鉴别诊断：（一）、高结合胆红素性黄疸与高未结合胆红素性黄疸的鉴别依靠结合胆红素与未结合胆红素的分别定量。

（二）、梗阻与非梗阻性（肝细胞性）高结合胆红素性黄疸的鉴别可联合应用反映胆道梗阻（ALP、LAP、γ-GT、血清总胆固醇、总胆汁酸）及肝细胞损伤（ALT、AST、LDH活性、血清总蛋白及白蛋白定量等）的检验指标来加以鉴别。（三）、肝内淤滞与肝外梗阻性黄疸的鉴别可应用病史、肝功能试验、泼尼松治疗试验、苯巴比妥治疗试验等进行鉴别。

（四）、溶血性黄疸、肝细胞性黄疸及梗阻性黄疸的鉴别

溶血性黄疸肝细胞性黄疸梗阻性黄疸胆血浆总胆红素浓度多在5mg/dl以内1-70mg/dl不全梗阻10-15mg/dl红

完全梗阻20-30mg/dl素未结合胆红素高度增加增加增加代结合胆红素正常增加高度增加谢尿胆红素定性阴性阳性强阳性试尿中胆素原增多不定，或升高减少或消失验粪中胆素原增多减少减少或消失（五）、黄疸鉴别诊断步骤：肝细胞损害阻塞性黄疸黄疸未结合胆＞总胆75%结合胆＞25%未结合性胆红素增高性黄疸结合性胆红素增高性黄疸尿胆原（＋）（－）溶血性黄疸非溶血性黄疸（1）RBC诡性（2）RBC形态（1）增加（2）异常（1）正常或低（2）正常先天性溶血获得性溶血抗人球蛋白（＋）（－）免疫性溶血非免疫溶血（1）尿胆原（2）肝功能（3）胆固醇（4）AKP（1）（－）—（＋）（2）（－）（3）（－）（4）（－）（1）（－）（2）(－)（3）↑（4）↑（1）(＋)（2）(－)－（＋）（3）↓（4）可↑肝细胞内排泄障碍性黄疸(1)BSP(2)胆囊造影(1)双峰(2)不显著(1)排延迟(2)显著特发性黄疸Rotor综合征(1)脂蛋白X(3)线粒体抗体(2)B超、ERCP(4)激素治疗(1)↑(3)(+)(2)正常(4)有效肝内胆淤(1)↑↑(3)(-)(2)异常(4)无效（一）、黄疸指数的测定:

正常血清为黄色，此黄色是由于血清中胆红素以及其他黄色物质所致，胆红素约占3/4，血清黄色的深浅在某种程度上可说明胆红素含量的多少。（正常3～8）1、目视比色法临床检验中规定0.01%重铬酸钾溶液的色度作为黄疸指数1，将血清用生理盐水稀释，肉眼观察起黄色深度与0.01%重铬酸钾溶液相当时，血清的稀释倍数即为该血清的黄疸指数。2、分光光度法应用重铬酸钾标准液与以5％枸橼酸钠溶液稀释10倍的血清样本在460nm进行比色（只适用于测定游离胆红素的升高）测定管浓度标准管浓度×10＝黄疸指数六、黄疸的实验室检测（二）、血清胆红素的测定:

（实验课）（三）、尿液胆红素测定:

分定性或半定量试验，定性试验大致有1）、观察尿液颜色；2）美兰试验；3）氧化法，如碘环试验、浓硝酸试验、三氯化铁试验等；4）重氮反应法三氯化铁试验用氯化钡吸附尿液中的胆红素，然后滴加酸性三氯化铁试剂，使胆红素被氧化为胆绿素，呈绿色反应。（四）、尿液尿胆原测定：1、光电比色法：新鲜尿液中加入抗坏血酸作为还原剂，保持尿胆原的还原状态，尿胆原与苯甲醛试剂作用，生成尿胆原－醛红色化合物。（半定量）第四节蛋白质、糖与脂类代谢一、蛋白质代谢（一）、血浆蛋白测定：临床上常用的有化学法和电泳法二大类，前者可测出总蛋白、白蛋白和球蛋白的量，后者可将球蛋白区分为α、β和γ几种。另外，还有免疫化学的方法可更精确的测出血浆内各种蛋白质的含量。（二）、血清絮状浊度试验：反映血清白蛋白与球蛋白改变的定性试验。正常的白蛋白和α1球蛋白具有抑制絮状反应出现阳性的作用，γ球蛋白则反之。（三）、凝血酶原时间测定：在肝脏合成的凝血因子有纤维蛋白原、凝血酶原、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ因子等。肝实质受损时，这些凝血因子可有不同程度的减少。通过在血浆中加入足够的凝血活酶和钙离子后，从凝血时间的长短推测血浆中凝血酶原的含量，可以衡量肝脏的合成功能。二、糖代谢半乳糖耐量试验三、脂类代谢（一）、血清总胆固醇测定（二）、血清甘油三酯测定（三）、脂蛋白测定4、实质性肝病；若无胆汁梗阻情况常正常或轻度升高。三、5’-核苷酸酶一种碱性单磷酸酯酶，专一水解核苷酸，测定的临床意义与碱性磷酸酶相同，由于其不受骨病及妊娠的影响特异性更高。四、γ-谷氨酰转肽酶用于筛选有无肝胆系疾病；黄疸的鉴别诊断；帮助诊断肝癌；急性肝炎治愈的判断；慢性肝炎和肝硬变活动期的判断五、亮氨酸氨肽酶临床意义与γ－谷氨酰转肽酶大致相同六、乳酸脱氢酶及其同工酶七、胆碱酯酶八、单胺氧化酶1、反映肝细胞损害为主的酶类（1）、肝细胞损害时酶活力增高：丙氨酸转移酶,天门冬氨酸转移酶异柠檬酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、山梨醇脱氢酶、谷氨酸脱氢酶鸟氨酸氨基甲酰转换酶、精氨酸琥珀酸裂解酶、精氨酸醛缩酶、1-磷酸果糖醛缩酶鸟嘌呤酶、奎宁氧化酶、葡萄糖醛酸苷酶（2）、肝细胞损害时酶活力降低：胆碱酯酶、卵磷脂胆固醇转酰基酶2、反映胆汁淤积为主的酶类：胆汁淤积（或肝内占位病变）时酶活力增高：碱性磷酸酶、5’-核苷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、亮氨酸氨肽酶3、反映肝内纤维组织增生的酶：单胺氧化酶肝胆疾病时血清内酶类改变举例第六节染料排泄试验肝脏使人体的重要排泄器官之一，许多内源性物质如药物、毒物、染料等，在肝内进行适当代谢后，可以由肝细胞排泄至胆汁。在肝细胞损害时，上述物质的排泄功能减退，据此，外源性地给予人工色素（染料），来测定肝脏排泄能力的改变，可作为有价值的肝功能试验之一。一、磺溴酞钠试验磺溴酞钠（BSP）是一种溴化的肽类染料，静脉注射后，很快被肝脏清除，以后较慢的排入胆汁。血液BSPBSP＋谷胱甘肽BSP－谷胱甘肽BSP－半胱酰甘氨酸BSP－半胱氨酸摄取肝细胞胆汁排泄游离状态结合状态试剂：1、生理盐水

2、10％氢氧化钠溶液

3、0.01M盐酸

4、磺溴酞钠标准液操作：1、按体重计算注射用量，每公斤体重注射5mg，常用5％溶液。

2、准确记录时间，45分钟正，从另一侧静脉采血3ml左右，小心分离血清。

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