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文档简介

1、金黄色葡萄球菌简介:金黄色葡萄球菌,也称“金葡菌”, HYPERLINK /view/42836.htm t /item/_blank 细胞壁含90%的 HYPERLINK /view/82094.htm t /item/_blank 肽聚糖和10%的 HYPERLINK /view/540298.htm t /item/_blank 磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密,染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色,相反,阴性菌的 HYPERLINK /view/42836.htm t /item/_blank 细胞壁肽聚糖层薄、交联度差,脂类含量高,所以紫色复合物被酒精冲掉然后附着了

2、沙黄的红色。金黄色葡萄球菌与 HYPERLINK /view/1680.htm t /item/_blank 青霉素的发现有很大的渊源。研究表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的 HYPERLINK /view/154864.htm t /item/_blank 革兰氏阳性菌作用明显。这也是由 HYPERLINK /view/82094.htm t /item/_blank 肽聚糖层的 HYPERLINK /view/1223827.htm t /item/_blank 厚度和结构造成的。新出现的耐甲氧西林 HYPERLINK /view/321509.htm t /item/_blank 金

3、黄色葡萄球菌,被称作 HYPERLINK /view/1024062.htm t /item/_blank 超级细菌,几乎能抵抗人类所有的药物,但是 HYPERLINK /view/30494.htm t /item/_blank 万古霉素可以对付它。典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8m左右, HYPERLINK /view/2921.htm t /item/_blank 显微镜下排列成葡萄串状。金黄色 HYPERLINK /view/5119.htm t /item/_blank 葡萄球菌无芽胞、 HYPERLINK /view/32140.htm t /item/_blank 鞭毛,大

4、多数无 HYPERLINK /view/32123.htm t /item/_blank 荚膜, HYPERLINK /view/743005.htm t /item/_blank 革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌 HYPERLINK /view/29868.htm t /item/_blank 营养要求不高,在普通 HYPERLINK /view/72787.htm t /item/_blank 培养基上生长良好,需氧或兼性 HYPERLINK /view/1920693.htm t /item/_blank 厌氧,最适生长温度37C,最适生长 HYPERLINK /view/307864.h

5、tm t /item/_blank pH7.4,干燥环境下可存活数周。平板上 HYPERLINK /view/7118.htm t /item/_blank 菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径0.51.0mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的 HYPERLINK /view/968922.htm t /item/_blank 耐盐性,可在1015%NaCl肉汤中生长。可分解 HYPERLINK /view/16023.htm t /item/_blank 葡萄糖、 HYPERLINK /view/36224.htm t /item/_blank 麦芽糖、 HYPERLINK

6、/view/19595.htm t /item/_blank 乳糖、 HYPERLINK /view/84040.htm t /item/_blank 蔗糖,产酸不产气。 HYPERLINK /view/1032613.htm t /item/_blank 甲基红反应阳性,VP反应弱 HYPERLINK /view/1342149.htm t /item/_blank 阳性。许多 HYPERLINK /view/845922.htm t /item/_blank 菌株可分解 HYPERLINK /view/29882.htm t /item/_blank 精氨酸,水解 HYPERLINK /v

7、iew/42264.htm t /item/_blank 尿素,还原 HYPERLINK /view/84021.htm t /item/_blank 硝酸盐,液化 HYPERLINK /view/232149.htm t /item/_blank 明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对 HYPERLINK /view/29486.htm t /item/_blank 磺胺类药物、 HYPERLINK /view/1680.htm t /item/_blank 青霉素、 HYPERLINK /view/42402.htm t /item/_blank 红霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感,但易

8、产生耐药性,原因是由于这些菌株产生青霉素酶等。对碱性染料敏感,十万分之一的 HYPERLINK /view/87748.htm t /item/_blank 龙胆紫液即可抑制生长。流行病学金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在, HYPERLINK /view/10696.htm t /item/_blank 空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因此,食品受到污染的机会很多。 HYPERLINK /view/698664.htm t /item/_blank 美国疾病控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位,仅次于 HYPERLINK /view/29729.htm t /item/

9、_blank 大肠杆菌。 金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点:季节分布,多见于春 HYPERLINK /view/135896.htm t /item/_blank 夏季;中毒 HYPERLINK /view/5350.htm t /item/_blank 食品种类多,如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外,剩饭、油煎蛋、 HYPERLINK /view/981048.htm t /item/_blank 糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有 HYPERLINK /view/408955.htm t /item/_blank 报道。 HYPERLINK /view/453052.htm t /item

10、/_blank 上呼吸道感染患者 HYPERLINK /view/559789.htm t /item/_blank 鼻腔带菌率83%,所以人畜 HYPERLINK /view/709801.htm t /item/_blank 化脓性感染部位,常成为污染源。金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的 HYPERLINK /view/562382.htm t /item/_blank 病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起 HYPERLINK /view/59758.htm t /item/_blank 肺炎、 HYPERLINK /view/579034.htm t /item/_blank 伪膜

11、性肠炎、 HYPERLINK /view/76102.htm t /item/_blank 心包炎等,甚至 HYPERLINK /view/33826.htm t /item/_blank 败血症、 HYPERLINK /view/1306121.htm t /item/_blank 脓毒症等 HYPERLINK /view/746984.htm t /item/_blank 全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的 HYPERLINK /view/341068.htm t /item/_blank 毒素和 HYPERLINK /view/1456765.htm t /item/

12、_blank 侵袭性酶:a. HYPERLINK /view/1019710.htm t /item/_blank 溶血毒素: HYPERLINK /view/36425.htm t /item/_blank 外毒素,分、四种,能损伤 HYPERLINK /view/520.htm t /item/_blank 血小板,破坏 HYPERLINK /view/32299.htm t /item/_blank 溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死b.杀死 HYPERLINK /view/9572.htm t /item/_blank 白细胞素:可破坏人的 HYPERLINK /view/9572.htm

13、 t /item/_blank 白细胞和 HYPERLINK /view/9600.htm t /item/_blank 巨噬细胞c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使 HYPERLINK /view/18631.htm t /item/_blank 血液或 HYPERLINK /view/43423.htm t /item/_blank 血浆中的 HYPERLINK /view/174945.htm t /item/_blank 纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍 HYPERLINK /view/114687.htm t /item/_blank 吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成

14、的感染易局部化与此酶有关d.脱氧核糖核酸酶:金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温,可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌e.肠毒素:金黄色葡萄球菌能产生数种引起 HYPERLINK /view/81077.htm t /item/_blank 急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素,分为A、B、C1、C2、C3、D、E及F八种 HYPERLINK /view/1074410.htm t /item/_blank 血清型。肠毒素可耐受100C煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。此外,金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、 HYPERLINK /view/11764437.htm t /ite

15、m/_blank 明胶酶、 HYPERLINK /view/265194.htm t /item/_blank 蛋白酶、 HYPERLINK /view/728267.htm t /item/_blank 脂肪酶、 HYPERLINK /view/807688.htm t /item/_blank 肽酶等。f .表皮剥脱毒素:引起烫伤样皮肤综合征,又称剥脱样皮炎。g. HYPERLINK /view/84361.htm t /item/_blank 毒性休克综合征毒素(tsst-1)引发病症金黄色葡萄球菌肠炎是金黄色葡萄球菌引起的,多因原发疾病长期用 HYPERLINK /view/1325.

16、htm t /item/_blank 抗生素引起 HYPERLINK /view/126953.htm t /item/_blank 肠道菌群失调所致,抗生素敏感菌株受到抑制,耐药的金黄色葡萄球菌株趁机繁殖。金黄色葡萄球菌为侵袭性细菌,能产生毒素,对肠道破坏性大,所以金黄色葡萄球菌肠炎起病急,中毒症状严重,主要表现为呕吐、发热、腹泻。呕吐常在发热前出现,发热很高。轻症大便次数稍多,为黄绿色糊状便;重症大便次数频繁,每日可达数十次,大便呈暗绿色水样便,外观像 HYPERLINK /view/108288.htm t /item/_blank 海水,所以叫海水样便。粘液多,有腥臭味,有时可排出片状

17、伪膜,将伪膜放入生理水,脱落的肠粘膜即漂在水面上,对诊断帮助很大。 HYPERLINK /view/267154.htm t /item/_blank 体液损失多,患儿脱水、 HYPERLINK /view/154.htm t /item/_blank 电解质紊乱和酸中毒严重,可发生休克。挑选大便粘液部分涂片,在显微镜下检查可见大量 HYPERLINK /view/1292136.htm t /item/_blank 脓细胞,如经革兰氏染色,显微镜检查可见成堆的大量革兰氏阳性球菌。大便培养金黄色葡萄球菌生长,即可明确诊断。球菌检验出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。第二,金黄色葡萄

18、球菌肠毒素检测金黄色葡萄球菌肠毒素的检测主要有动物试验、 HYPERLINK /view/4804626.htm t /item/_blank 血清学试验、 HYPERLINK /view/3848552.htm t /item/_blank 免疫荧光试验及酶联免疫吸附等方法,在此就不一一赘述。预防感染第一,金黄色葡萄球菌的检验样品处理:无菌取25g或25mL食品样品,放入225mL灭菌 HYPERLINK /view/77884.htm t /item/_blank 生理盐水中均质,制成10-1稀释液。增菌培养:将10-1稀释液接入7.5%NaCl肉汤或 HYPERLINK /view/22

19、77866.htm t /item/_blank 胰蛋白胨肉汤中,37C培养24小时。分离培养:将上述稀释液或培养液分别划线血平板和Baird-Parker平板,置37C培养2448小时。金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄或白色菌落,大而凸起,表面光滑,周围有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落为圆形,直径23mm,颜色灰或黑色,周围有一浑浊带。染色观察:从平板上挑取可疑性菌落进行 HYPERLINK /view/743005.htm t /item/_blank 革兰氏染色,金黄色葡萄球菌为 HYPERLINK /view/14899472.htm t /item/_blank 革兰氏阳

20、性,显微镜下呈葡萄状排列无 HYPERLINK /view/426085.htm t /item/_blank 芽胞、荚膜,直径0.51m。 HYPERLINK /view/868319.htm t /item/_blank 血浆凝固酶试验:吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌试液浸液肉汤24小时培养物充分混匀,置361C培养,每隔半小时观察一次,连续观察6小时,出现凝固,即将小试管倾斜或倒置时,内容物不流动,判为阳性。同时做阴阳性对照。耐热核酸酶试验:将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min,用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板,361C培养24小时,在刺种线周围第一,防止金黄色

21、葡萄球菌污染食品防止带菌人群对各种食物的污染:定期对生产加工人员进行健康检查,患局部化脓性感染(如 HYPERLINK /view/26428.htm t /item/_blank 疥疮、手指 HYPERLINK /view/1114149.htm t /item/_blank 化脓等)、上呼吸道感染(如 HYPERLINK /view/28411.htm t /item/_blank 鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等)的人员要暂时停止其工作或调换岗位。对肉制品加工厂,患局部化脓感染的禽、畜尸体应除去病变部位,经高温或其他适当方式处理后进行加工生 产。第二,防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成应在低温

22、和通风良好的条件下贮藏食物,以防肠毒素形成;在气温高的春夏季,食物置冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时,并且食用前要彻底加热。第三,杀死金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌对热和干燥的抵抗力较一般无芽胞细菌强,加热8030分钟才被杀死。 物体表面覆盖一层0.1mg/cm3浓度的超细tio2在光照条件下可快速有效杀灭。在干燥的脓汁、痰液中可存活23月。5%石炭酸中1015分钟死亡。对碱性染料敏感,十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。感染处理由于 HYPERLINK /view/17263.htm t /item/_blank MRSA( HYPERLINK /view/1217684.htm t /it

23、em/_blank 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌) 的存在,一般不使用 HYPERLINK /view/1680.htm t /item/_blank 青霉素。所以有金黄色 HYPERLINK /view/2716.htm t /item/_blank 葡萄球菌感染者,可选用: HYPERLINK /view/42402.htm t /item/_blank 红霉素、新型青霉素、 HYPERLINK /view/60122.htm t /item/_blank 庆大霉素、 HYPERLINK /view/30494.htm t /item/_blank 万古霉素或 HYPERLINK /view/

24、524928.htm t /item/_blank 先锋霉素治疗。治疗事项1、毛囊炎治疗要注意饮食,不要吃辛辣刺激性食物,不能喝酒。2、不可用手搔抓患处,以防继发感染。3、待症状完全消失以后,巩固1个疗程。限量存在卫生部于2011年11月24日公布食品安全国家标准 HYPERLINK /view/6953822.htm t /item/_blank 速冻面米制品(GB192952011)。在几大速冻品牌食品因检出金黄色葡萄球菌而下架的背景下,因有条件允许金葡菌限量存在,新国标引来议论纷纷。卫生部专家称,新国标更加科学合理,并没有降低要求。这个新国标是根据 HYPERLINK /view/211

25、9421.htm t /item/_blank 食品安全法及其实施条例规定,由 HYPERLINK /view/126359.htm t /item/_blank 卫生部在原速冻预包装面米食品卫生标准(GB192952003)实施基础上组织制定的,将于2011年12月21日起正式施行。传播途径一般来说,金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品:食品加工人员、炊事员或销售人员带菌,造成食品污染;食品在加工前本身带菌,或在加工过程中受到了污染,产生了肠毒素,引起食物中毒;熟食制品包装不严,运输过程受到污染;奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时,对肉体其他部位的污染。培养方式 HYPERLINK /vie

26、w/6644096.htm t /item/_blank 甘露醇高盐琼脂可用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;D甘露醇为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;酚红为pH指示剂。检测方法材料与方法1、 HYPERLINK /view/115747.htm t /item/_blank 材料培养基:7.5%NaCl肉汤培养基,血琼脂平板培养基(按常规方法制作)试剂:7.5%NaCl肉汤培养基,革兰氏染色,血琼脂平板,Baird-Parker琼脂平板,生理盐水,兔血浆(1:4)器材:温箱,显微镜,天平,均质器,载玻片,L型涂片棒,三角瓶,刻

27、度吸管,平皿, HYPERLINK /view/162920.htm t /item/_blank 试管及试管架,研磨,1ml注射器,实验动物:健康的小白鼠2、方法待检样品25g+225ml 灭菌生理盐水直接计数法 增菌培养方法Baird-Parker琼脂平板 7.5%NaCl肉汤培养基血平板 血平板涂片染色镜 溶血观察动物接种试验 血浆凝固试验报告实验步骤1、样品的采集称取25g火腿肠,切碎搅匀(用灭菌研钵研磨),置于250ml 锥形瓶中,加入225ml 灭菌生理盐水,制成1:10样品混悬液,混匀后作用20分钟,随机取10ml 离心。2、增菌及分离培养增菌培养方法:吸取5ml上清液,接种于7

28、.5%NaCl肉汤培养基内,置于(371)恒温箱中培养24h,划线接种入血平板,(371)恒温箱中培养24h。直接计数方法:吸取上述悬液,进行10倍递增稀释,根据样品污染情况,选择不同浓度的稀释液各1ml,分别加入3个Baird-Parker琼脂平板,每个平板的接种量分别为0.3ml、0.3ml、0.4ml。用灭菌L型涂布棒涂布整个平板,置于(371)恒温箱中培养24h。之后分别对3个平板上生长的周围有浑浊带的黑色菌落进行计数。转接入血平板,(371)恒温箱中培养24h。3、涂片、染色与镜检将纯培养的未知菌涂片,革兰氏染色,显微镜观察。4、生化实验触酶试验在载玻片上滴1滴3%的过氧化氢,调取纯化的细菌放在过氧化氢中观察变化。30s内产生大量气泡者为阳性,不产生气泡者为阴性。血浆凝固酶试验吸取1:4新鲜兔血浆0.5ml,放入小试管中,再加入培养24h的2中的肉汤培养液0.5ml,摇荡均匀,放入(371)恒温箱中培养,每0.5h观察一次,观察6h,检查是否出现凝固。将试管倾斜或倒置时,呈现凝块状,可判定为阳性,同时以已知阳性葡糖球菌和阴性肉汤作为对照。5、动物感染实验用无菌生理盐水将2中血琼脂板上纯化的菌落洗下后,以0.5ml/只腹腔注射入小白鼠体内,同时用灭菌生理盐水注

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