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文档简介
1、第二十章病毒感染的诊断与防治一、标本的采集与送检 1. 不同病毒感染,不同病程,采取不同部位的标本 2.采集病人急性期标本,并注意无菌操作。 第一节 病毒感染的诊断 3.标本置于含有抗生素的50%甘油盐水 4.冷藏速送二、病毒的分离培养与鉴定病毒的分离培养动物接种鸡胚培养组织细胞培养原代细胞二倍体细胞传代细胞动物接种 鸡胚培养鸡胚接种细胞培养病毒的鉴定细胞形态学改变1.致细胞病变效应 (CPE) 2.多核巨细胞3.包涵体 致细胞病变效应致细胞病变效应 正常细胞细胞死亡细胞变圆细胞融合多核巨细胞与包涵体狂犬病毒包涵体红细胞吸附 、干扰现象、细胞培养液pH值的改变 病毒的定量测定50%致死量(LD
2、50)或50%感染量(ID50)测定 空斑形成单位(PFU)测定 空斑形成 三病毒感染的血清学诊断标本采集 早期和恢复期双份血清 急性期单份血清IgM的测定 双份血清的IgG 的测定血清学诊断常用方法 中和试验 补体结合试验、 血凝抑制试验 凝胶免疫扩散试验补体结合试验抗原-抗体 补体 绵羊红细胞-溶血素不溶血溶血血凝试验和血凝抑制试验 血凝试验 血凝素鸡红细胞红细胞凝集 血凝抑制试验 血凝素抗体鸡红细胞红细胞不凝集四、病毒感染的快速诊断 形态学检查 普通光学显微镜 用于检查病变组织或脱落细胞中特征性病毒包涵体 电镜 常用技术有负染技术、免疫电镜技术、超薄切片电镜技术等。 免疫荧光技术 (im
3、munofluorescence,IF) 酶免疫技术 (enzyme immunoassay,EIA) 可检测多种病毒及其抗体,主要是酶免疫组化法和酶联免疫吸附试验法(ELISA)。检测病毒抗原 核酸杂交技术 斑点杂交、细胞内原位杂交 、DNA印迹杂交、RNA印迹杂交等。 聚合酶链反应(PCR ) 应用较多的是荧光基因探针杂交定量PCR技术,又称定量实时荧光PCR。 生物芯片技术(DNA芯片、生物芯片) 检测病毒核酸第二节 病毒感染的防治一、病毒感染的预防人工主动免疫 减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗等疫苗名称 疫苗种类 培养细胞种类脊髓灰质炎疫苗 减毒活疫苗 人二倍体,Vero细胞麻疹疫苗 减毒活疫苗 鸡胚细胞流行性腮腺炎疫苗 减毒活疫苗 鸡胚细胞风疹疫苗 减毒活疫苗 人二倍体细胞甲型肝炎疫苗 减毒活疫苗 人二倍体细胞人用狂犬病疫苗 灭活疫苗 地鼠肾细胞乙型脑炎疫苗 灭活疫苗 地鼠肾细胞森林脑炎疫苗 灭活疫苗 地鼠肾细胞乙型肝炎疫苗 基因工程疫苗 酵母菌表达表20-1 我国常用的病毒疫苗人工被动免疫 血清丙种球蛋
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