黄芪对早期糖尿病大鼠心肌组织一氧化氮含量和一氧化氮合成酶活性

1、黄芪对早期糖尿病大鼠心肌组织一氧化氮含量和一氧化氮合成酶活性【摘要】目的讨论黄芪对糖尿病大鼠心肌组织一氧化氮N含量和一氧化氮合成酶NS活性的影响。方法正常大鼠、糖尿病大鼠及高、低剂量黄芪(10，8gkg-1d-1)治疗8周的糖尿病大鼠各10只，分别测定各组大鼠血清乳酸脱氢酶LDH，肌酸激酶K含量及心肌组织一氧化氮N含量及一氧化氮合成酶NS【关键词】黄芪；糖尿病；心肌病；一氧化氮；一氧化氮合酶Keyrds：Astragalus;Diabetes;ardiypathy;Nitrixide;Nitrixidesynthase糖尿病(D)并发症是导致糖尿病死亡的主要原因。近年来研究说明，D及其并发症发

2、生开展过程中出现的多种脏器损害，常与一氧化氮N代谢异常有关1。糖尿病性心肌病diabetiardiypathy，D的发活力制目前仍不清楚。可能与心肌细胞糖代谢障碍、脂质过氧化反响增强、一氧化氮N代谢异常、胞膜完好性受损和a2+转运机制异常等有关2。马善峰等3发现D大鼠心肌N含量及NS活性降低；陈国荣等4发现D大鼠心肌N含量明显增高、心肌NS(iNS)表达明显较正常组增强。本研究讨论糖尿病早期大鼠心肌N含量和NS活性的变化及黄芪对上述指标的影响。1器材1.1动物istar大鼠，雄性，体重180200g，由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。1.2试剂与药品链脲佐菌素StreptztinSTZ

3、美国Siga公司消费；LDH，K试剂盒，上海科华公司消费；N测试盒、NS试剂盒、蛋白试剂盒(考马斯亮蓝法)均购自南京建成生物工程研究所。黄芪注射液，神威药业消费。1.3仪器日立7080型全自动生化分析仪；TU-1901型紫外分光光度计，北京普析通用仪器公司。2方法大鼠适应性饲养1周后，10只作为正常对照组，其余用于造模。2.1糖尿病动物模型的制作造模动物禁食12h后，以链脲佐菌素用前以0.1l/L柠檬酸盐缓冲液，冰浴新颖配制，pH4.555g/kg一次性腹腔注射。稳定3d后尾静脉采血测定血糖，以血糖大于16.6l/L者为糖尿病模型动物。2.2实验分组及处理正常(N)组n=10动物按“2.1项方

4、法操作，但以等容积缓冲液代替STZ进展注射。造模成功大鼠随机分为3组每组10只：糖尿病对照(D)组、黄芪低剂量组(AS1组)、黄芪高剂量组(AS2组)。每组各分两笼饲养，固定饲料，自由饮水。AS1，AS2组，于每天17：00分别按8，10gkg-1d-1灌胃给药；每周称重，调整给药量。持续给药8周。2.3标本搜集与检测于第8周末禁食12h后，称重，10%水合氯醛3l/kg腹腔注射，麻醉动物，翻开胸腔，左心室采血约5l，用于血清LDH及K活性的测定；迅速取出心脏，在冰生理盐水中取心肌组织，制备10%匀浆，取上清液作心肌N含量、NS活性和心肌组织匀浆蛋白含量测定。测定时按说明书要求操作。2.4统计

5、学处理数据以s表示，采用SPSS10.0软件包对数据进展方差分析，组间比较，方差齐者用LSD检验，方差不齐者用DunnettT3检验。3结果3.1各组大鼠血清乳酸脱氢酶LDH、肌酸激酶K的变化D组大鼠血清LDH，K明显高于N组(P0.01，经高、低剂量AS治疗后明显降低(P0.01，但仍明显高于N组(P0.010.05。组间比较在LDH程度上AS1、AS2组间有显著差异(P0.05)。AS2组优于AS1组，见表1。3.2各组大鼠心肌组织N含量及NS活性的变化实验结果说明，D组大鼠心肌组织N含量及NS活性比N组明显增高(P0.01)，经高、低剂量黄芪治疗后明显低于糖尿病组(P0.01，但仍高于N

6、组(P0.01或P0.05)。组间比较，在N含量上AS1，AS2组间有差异(P0.05，AS2组的作用优于AS1组。见表1。表1各组大鼠血清乳酸脱氢酶LDH、肌酸激酶K及心肌组织N含量、NS活性的变化略与N组比较，*P0.05，*P0.01；与D组比较，#P0.01；与AS1组比较，P0.054讨论本实验中，造模大鼠腹腔注射STZ(55g/kg)，3d后测血糖，血糖大于16.6l/L者为糖尿病模型动物。造模成功动物均出现了明显的多饮、多食、多尿，病程中抽检D组大鼠，血糖始终在建模时的高程度波动，未见转复，故本实验中，糖尿病模型的建立是成功的。第8周末实验终止时，发现D组大鼠血清的LDH，K异常

7、，提示已有心肌损伤。一氧化氮(N)是机体内的-精氨酸在复原型辅酶(NADPH)、四氢叶酸等辅助因子的存在下，经N合成酶(NS)的作用，与2发生反响而产生的。近年来，随着对糖尿病研究的深化，发现N参与糖尿病的整个病程并起着重要作用。但关于D大鼠N含量及NS活性改变的报道却不尽一样。本研究结果显示，D组大鼠心肌N含量及NS活性显著高于正常对照组，可能与STZ诱导的糖尿病动物模型中，被损伤的胰腺组织作为自身免疫的诱因活化杀伤性巨噬细胞，使其释放TNF-，IL-1等细胞因子，促使心肌组织NS活性升高。而过量生成的N作为重要的免疫介质发挥细胞毒作用，可损伤线粒体、含铁硫蛋白酶，亦可引起DNA损伤，导致心肌损伤。经黄芪治疗8周后，可见N含量及NS活性明显下降，提示黄芪可减轻糖尿病心肌所受N的损伤。黄芪是否抑制心肌内iNS基因表达、对糖尿病早期和后期的作用是否一致等尚需进一步研究。【参考文献】1金智生,汝亚琴,楚惠媛,等.红芪多糖对不同病程糖尿病大鼠血清N、NS及过氧化脂质的影响J.上海中医药杂志,2022,386:44.2邓常青,熊曼琪.糖尿病性心肌病的发活力制及中医药防治研究进展J.广州中医药大学学报,2001,182：181.3马善峰,贾强,关宿