组胺对老龄大鼠肠道细菌易位的影响

1、组胺对老龄大鼠肠道细菌易位的影响组胺对老龄大鼠肠道细菌易位的影响【关键词】组胺;老龄大鼠;肠黏膜屏障;肠道细菌易位【摘要】目的观察组胺对老龄大鼠肠道细菌易位的影响。方法将老龄大鼠随机分为对照组、肠道感染组和肠道感染+组胺组。除对照组外，其他大鼠均从肠道灌注31011/l标准大肠杆菌75菌液0.4l。菌液灌注后，肠道感染+组胺组立即给予小肠内100ng/l浓度的组胺，对照组和肠道感染组大鼠用同样方法向小肠内灌注等量生理盐水，4h后在无菌条件下取出肝、肾、肠系膜淋巴结进展细菌培养。结果对照组大鼠肝、肾、肠系膜淋巴结平均细菌含量分别为1.02105、0.62105、0.38105fu/g;肠道感染组

2、分别为8.35105、7.16105、5.68105fu/g，肠道感染+组胺组分别为5.25105、4.06105、3.58105fu/g。肠道感染+组胺组大鼠肝、肾、肠系膜淋巴结中的细菌含量明显低于肠道感染组(p0.05)。结论小剂量组胺小肠内灌注有保护老龄大鼠肠黏膜屏障、阻止肠道细菌易位的作用。【关键词】组胺;老龄大鼠;肠黏膜屏障;肠道细菌易位【keyrds】histaine;agedrats;intestinalusabarrier;baterialtranslatin生理情况下，肠道通过诸多屏障机制有效地防止肠道细菌及其毒素越过肠黏膜屏障，侵入肝、肾和肠系膜淋巴结等器官1。但在肠道感染

3、时，肠黏膜屏障可受到损伤，引起肠道细菌易位2。alser等3报道，组胺受体阻断剂可降低肠黏膜屏障的保护作用，增加肠道细菌易位的发生。本实验旨在通过小剂量、低浓度组胺肠道内灌注，对肠道感染大鼠肠道细菌易位的影响来探究组胺对肠黏膜屏障是否有保护作用。1材料与方法1.1材料1.2方法实验前24h取大肠杆菌75单菌落放入20l肉汤培养液中培养，24h后离心15in(5000r/in)去上清，加生理盐水10l，再离心去上清，重复3次后，再加生理盐水10l，取其中1l菌液在分光光度计(波长600n)监测下，加生理盐水稀释至吸光度为0.4止，此时菌液的大肠杆菌浓度为31011/l。组胺配制成100ng/l浓

4、度，遮光低温保存备用;戊巴比妥钠用蒸馏水配置成1%浓度备用。30只大鼠称重、编号后，随机分为对照组、肠道感染组和肠道感染+组胺组，每组10只。所有大鼠实验前12h禁食，采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(40g/kg)，上腹部正中切口，在空肠上端插管接微泵。除对照组外，其他大鼠均从空肠上端灌注浓度31011/l大肠杆菌液0.4l。菌液灌注后肠道感染+组胺组大鼠立即用微泵向小肠内灌注100ng/l组胺，灌注速度第1小时2l，以后1.5l/h，灌注4h，对照组和肠道感染组用同样方法向小肠内灌注等量的生理盐水，4h后处死全部大鼠。以上操作均在无菌条件下进展。在无菌条件下分别取出肝、肾和肠系膜淋巴结，称重后添

5、加10倍量生理盐水研磨成匀浆，各取0.2l匀浆均匀涂于普通营养琼脂培养基上放入37温箱内培养，24h后计算菌落数，并换算成每克组织含菌量(105fu/g)。每份标本均做两份培养。1.3统计学处理所有数据用xs表示，数据分析均采用两样本均数比较的t检验，方差不齐者采用t检验，采用spss16.0软件进展统计分析。2结果对照组10只大鼠中，有3只大鼠肝匀浆培养基有细菌生长、2只大鼠肾匀浆培养基有细菌生长，1只大鼠肠系膜淋巴结匀浆培养基有细菌生长;肠道感染组全部大鼠肝、肾和肠系膜淋巴结匀浆培养基均有细菌生长;对照组与肠道感染组各组织间含菌量两两比较，均呈显著性差异(p0.01)，说明肠道感染大鼠模型

6、可靠。肠道感染+组胺组10只大鼠中，有10只大鼠肝匀浆培养基有细菌生长、7只大鼠肾匀浆培养基有细菌生长，5只大鼠肠系膜淋巴结匀浆培养基有细菌生长;与对照组和肠道感染组比较差异有统计学意义(p0.01，p0.05)。见表1。表1各组大鼠各组织细菌培养平均含菌量3讨论组胺是一种作用广泛的单胺类物质，是肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒的标志物，在胃肠道的含量尤为丰富。它可通过其h1r、h2r、h3r、h4r4种受体参与多种生理功能调节，如胃肠分泌与蠕动、神经内分泌调节、免疫反响调节等。小剂量的组胺进入肠道后，可激活肠道中的肥大细胞使其脱颗粒释放组胺，释放的组胺又可激活邻近的肥大细胞脱颗粒，形成自身放大机

7、制进展调节9。老龄大鼠各种组织和器官都会出现不同程度的萎缩、功能下降，特别是免疫系统的功能下降明显。席丰等10研究证明，小剂量组胺肠道灌注后可增加老龄大鼠肠黏膜对siga的分泌，增强肠黏膜免疫屏障的保护作用。大肠杆菌75进入小肠后，可在肠黏膜外表大量生长繁殖，导致肠黏膜上皮细胞变性、坏死，肠黏膜屏障受损，肠道内的细菌即可打破肠黏膜屏障进入门静脉、肠淋巴系统引起肠道细菌易位。本实验肠道感染组大鼠肝、肾、肠系膜淋巴结匀浆培养均有大量细菌生长，而肠道感染加组胺治疗组肝、肾、肠系膜淋巴结匀浆培养细菌明显减少，可能是因为组胺通过以下机制对肠黏膜屏障进展保护：组胺具有扩张细小动脉改善肠道血液循环;促进液体的渗出和白细胞的趋化作用，渗出液中的免疫球蛋白、补体、杀菌肽、溶菌酶、纤维素等，可中和毒素、杀灭细菌及增加白细胞的吞噬功能11;促进肠蠕动、减少致病菌在肠道中停留的时间;促进胃酸、胆汁和各种消化酶的分泌，抑制致病菌的生长;促进黏液分泌维持肠道内正常微生态;激活抗原提呈细胞，增强其提呈抗原、合成促炎细胞因子12参与细胞免疫和