临床常见病原体检测培训课件

1、临床常见病原体检测临床常见病原体检测病原体检测的意义循证医学的要求抗感染药物的使用和更换要有相应的病原微生物实验诊断依据诊疗规范的要求感染性疾病都应该进行病原学检查 临床常见病原体检测2病原体检测的意义循证医学的要求临床常见病原体检测2第一节 临床标本采集好标本好的实验诊断结果根据病原体所致感染的病程确定标本采集的时间、部位和种类病原学实验诊断标本必须无菌采集和运送采集标本时，不能接触消毒剂和抗感染药物标本必须注明必要的临床资料采集的标本要及时送检注意生物安全临床常见病原体检测3第一节 临床标本采集好标本好的实验诊断结果临床常见病原体血培养标本的采集和运送采血时间：尽可能在患者寒战或开始发热时

2、采血; 抗生素治疗前采血;如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血。采血量：成人10-20ml，儿童1-5ml运送：血培养瓶注意：采血后的血培养瓶切勿冷藏临床常见病原体检测4血培养标本的采集和运送采血时间：尽可能在患者寒战或开始发热时采血次数一般24h内采集23次特殊的全身性和局部感染者采血培养的建议1 可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎，应在不同部位采集23份血标本。2 不明原因发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热，先采集23份血标本，2436h后估计体温升高之前（通常在下午）再采集2份以上。3 可疑细菌性心内膜炎，在12h内采集3份血标本，如果24h后

3、阴性，再采集3份以上的血标本。临床常见病原体检测5采血次数一般24h内采集23次临床常见病原体检测5血培养套数与阳性检出率（）Cockerill, CID 2004采血套数65809996临床常见病原体检测6血培养套数与阳性检出率（）Cockerill, CID 2表皮葡萄球菌的临床意义23套血培养，有助于污染的判断。Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333污染菌致病菌？ 采集1套无法判断是病原菌还是污染菌。临床常见病原体检测7表皮葡萄球菌的临床意义23套血培养，有助于污染的判断。To脑脊液与其它无菌体液正常人脑脊液和体液是无菌的中枢神经系统感染的病原体

4、有细菌、真菌、病毒等临床常见病原体检测8脑脊液与其它无菌体液正常人脑脊液和体液是无菌的临床常见病原体标本采集与运送穿刺方法：无菌方法采集脑脊液35ml，无菌试管或无菌小瓶送检采集的脑脊液采集保温送检或床边接种腹膜透析液标本至少采集50ml取沉淀物显微镜检查，快速查见病原体检验时要同时兼顾细菌、真菌或病毒的感染临床常见病原体检测9标本采集与运送穿刺方法：无菌方法采集脑脊液35ml，无菌试临床意义细菌性脑膜炎最常见，病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等结核性脑膜炎呈回升趋势，为防治重点真菌性脑膜炎主要病原菌为新型隐球菌，好发于免疫功能低下和恶性疾病患者流行性乙型脑炎是乙脑病毒感染的

5、病毒性脑炎，属自然疫源性疾病，通过蚊虫叮咬，在人兽间传播肠道病毒对中枢神经系统的感染：脊髓灰质炎病毒和新型肠道病毒临床常见病原体检测10临床意义细菌性脑膜炎最常见，病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、肺炎链创伤、组织和脓肿标本采集部位首先清除污物防止表面污染菌混入采集方法： 大面积创伤不同部位采集多份标本 开放性脓肿无菌棉试采取脓液及病灶深部分泌物 厌氧菌感染取脓后立即排尽注射器内空气注意：陈旧性脓液含活菌较少，脓血标本含活菌较多临床常见病原体检测11创伤、组织和脓肿标本采集部位首先清除污物防止表面污染菌混呼吸道标本种类：痰标本，鼻咽拭子，通过气管收集的标本。清洁口腔和牙齿、用药前深咳痰液直接吐入无菌容

6、器中，标本量应1ml 标本室温保存2h经气管无菌收集的标本最理想临床常见病原体检测12呼吸道标本种类：痰标本，鼻咽拭子，通过气管收集的标本。临床常痰合格标本的判定分类 WBC 鳞状上皮细胞 6 25 25 25 10-25 3 25 25 2 10-25 25 1 25分类中13类不做培养，要求重新留取标本；4、5类为合格标本；6类为气管穿刺液时，如未见白细胞，而鳞状上皮细胞10/低倍，亦应重新留取标本临床常见病原体检测13痰合格标本的判定分类 WBC 临床意义引起呼吸系统感染的病原微生物种类繁多原发性肺炎的常见致病菌是肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、衣原体等医院获得性肺

7、炎常见的病原菌是革兰阴性杆菌通过空气和飞沫传播的病原菌，都可以引起呼吸系统感染临床常见病原体检测14临床意义引起呼吸系统感染的病原微生物种类繁多临床常见病原体检粪便标本的采集送检指征粪便涂片镜检白细胞5/HP重症腹泻体温大于38.5血便便中有脓液未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者来自疫区的患者临床常见病原体检测15粪便标本的采集送检指征临床常见病原体检测15粪便标本采集和运送自然排便，要选取含脓、血、粘液部分送检排便困难者和婴儿可用直肠拭子取代及时送检（2h内），防止标本干燥选择恰当的选择培养基外送标本要使用运送培养基临床常见病原体检测16粪便标本采集和运送自然排便，要选取含脓、血、粘液部分送检

8、临床尿液标本的采集清洗外阴或尿道口，前段尿排去，将中段尿约1020ml直接排入专用的无菌容器中尽量采集晨尿标本，保证尿液在膀胱内停留4h以上必要时采用导尿或膀胱穿刺法取尿临床常见病原体检测17尿液标本的采集清洗外阴或尿道口，前段尿排去，将中段尿约10泌尿生殖道标本的采集拭子的选择藻酸盐拭子或涤纶拭子根据不同疾病采集不同标本，如性传播疾病常取尿道口分泌物、外阴糜烂面病灶边缘分泌物阴道宫颈口分泌物和前列腺液等。除淋病奈瑟菌保温送检外，所有标本4保存。 临床常见病原体检测18泌尿生殖道标本的采集拭子的选择藻酸盐拭子或涤纶拭子临床常血清标本用于检测患者特异性抗体及效价临床常见病原体检测19血清标本用于

9、检测患者特异性抗体及效价临床常见病原体检测19二 检查方法显微镜镜检病原体抗原检测病原体核酸检测病原体的分离培养和鉴定血清学实验临床常见病原体检测20二 检查方法显微镜镜检临床常见病原体检测20抗菌药物敏感性试验细菌耐药机制和耐药性监测第二节 病原菌耐药性检测临床常见病原体检测21抗菌药物敏感性试验第二节 病原菌耐药性检测临床常见病原体检临床常见病原体检测22临床常见病原体检测22World Health Oganization临床常见病原体检测23World Health Oganization临床常见病原湖北多重耐药阳性球菌检出率（%）MRSAMRSCN临床常见病原体检测24湖北多重耐药阳

10、性球菌检出率（%）MRSAMRSCN临床常见病临床常见病原体检测25临床常见病原体检测25临床常见病原体检测26临床常见病原体检测26一、抗菌药物敏感性试验抗菌药物敏感性试验药敏试验体外检测抗菌药物抑制或杀灭细菌的能力。药敏试验的意义预测药物抗感染治疗效果更换抗菌药物时，预测拟选药物的疗效指导临床医生选择使用抗感染药物监测耐药性，分析耐药菌的变迁，为临床制定经验用药方案提供选择药物的依据评价抗菌药物的抗菌谱和抗菌效果临床常见病原体检测27一、抗菌药物敏感性试验抗菌药物敏感性试验药敏试验临床常见抗感染药物的选择标准结合NCCLS抗微生物药物的分组和本地的用药实际作出最佳选择避免选用固有耐药的抗菌

11、药物优选高效低毒的抗菌药物选用价格便宜、供应充足的抗菌药物针对不同的病原微生物，应有不同的选药方案同一群类似的药物只选择一种代表临床常见病原体检测28抗感染药物的选择标准结合NCCLS抗微生物药物的分组和本地的常用的药敏试验方法纸片扩散法(disk diffusion method,K-B法)稀释法,检测最小抑菌浓度（MIC）E试验法（E test）药物的联合药敏试验折点敏感试验（抗真菌药物的敏感性试验)耐药筛选试验临床常见病原体检测29常用的药敏试验方法纸片扩散法(disk diffusion 临床常见病原体检测30临床常见病原体检测30临床常见病原体检测31临床常见病原体检测31药敏试验结

12、果的解释标准根据所测得的抑菌环直径，参照CLSI标准报告药敏试验结果敏感该菌株能被测定药物常规剂量给药后在体内达到的血药浓度所抑制或杀灭耐药常规剂量用药时，在体内感染部位所能达到的药物浓度不能抑制测试菌的生长中介药物的MIC接近体液或组织中通常可达到的血药水平，在药物生理浓集的部位或提高药物剂量预期有效；此外，中介可作为一个缓冲区临床常见病原体检测32药敏试验结果的解释标准根据所测得的抑菌环直径，参照CLSI标二、细菌耐药性检测细菌耐药机制产生灭活酶，改变抗生素的结构，使之灭活抗生素作用的靶位改变，使细菌对抗生素不再敏感细菌膜的通透性降低及主动外排系统的过度表达，使抗生素在菌体内的浓度减少细菌

13、的代谢途径的改变细菌水平和垂直传播耐药基因的整合子系统细菌生物膜的形成临床常见病原体检测33二、细菌耐药性检测细菌耐药机制临床常见病原体检测33细菌耐药的主要机制灭活酶产生孔蛋白改变，细胞壁/膜 通透性改变抗生素靶位点改变临床常见病原体检测34细菌耐药的主要机制灭活酶产生孔蛋白改变，细胞壁/膜 （一）产生灭活酶，灭活抗生素-内酰胺类抗生素 -内酰胺酶氨基糖苷类抗生素 钝化酶 乙酰转移酶 腺苷转移酶 核苷转移酶 磷酸转移酶大环内酯类 酯酶I、酯酶II氯霉素 氯霉素乙酰转移酶 临床常见病原体检测35（一）产生灭活酶，灭活抗生素-内酰胺类抗生素 （二）改变靶位蛋白，产生耐药改变靶位蛋白与抗生素的亲和

14、力，使抗生素不能与其结合增加靶位蛋白数量，使未结合的靶位蛋白仍能维持细胞的正常形态与功能产生新的靶位蛋白，对抗生素无作用临床常见病原体检测36（二）改变靶位蛋白，产生耐药改变靶位蛋白与抗生素的亲和力，使-内酰胺类药物作用的靶位蛋白青霉素结合蛋白PBPsPBPs：penicillin-binding proteinsPBPs存在于细菌细胞内膜，不同种类的细菌PBPs数目不等。PBP-1被结合，影响延长 原生质球 溶菌死亡PBP-2被结合，影响形态 细菌圆化 影响功能PBP-3被结合，细菌分裂障碍 丝状 溶菌死亡各种-内酰胺类药物与PBPs结合的强弱和多少不等，因而出现不同程度的敏感性。临床常见病

15、原体检测37-内酰胺类药物作用的靶位蛋白青霉素结合蛋白PBPsP(三)细菌膜外排泵出系统 细菌依靠主动外排泵出机制来减少细菌内药物浓度Pae：MexAB-oprM、 MexCD-oprJ、 MexEF-oprN临床常见病原体检测38(三)细菌膜外排泵出系统 细菌依靠主动外排泵出机制来减少细菌（四）代谢途径改变基因突变，导致代谢途径改变，产生耐药性微生物正常代谢途径改变代谢途径抑菌敏感不抑菌耐药抗微生物药物阻断无作用临床常见病原体检测39（四）代谢途径改变基因突变，导致代谢途径改变，产生耐药性微生-内酰胺酶的检测原理：-内酰胺酶能裂解青霉素和头孢菌素的-内酰胺环，从而使其丧失抗菌活性。大部分金黄

16、色葡萄球菌，流感嗜血杆菌、淋病奈瑟菌、革兰阴性厌氧菌和少数肺炎链球菌能产生-内酰胺酶从而对青霉素G和氨苄青霉素等耐药。方法：头孢硝噻吩试验和碘试验 。 临床常见病原体检测40-内酰胺酶的检测原理：-内酰胺酶能裂解青霉素和头孢菌素的超广谱-内酰胺酶(ESBLs)的检测三代头孢菌素初筛法(1)M-H琼脂平板,35；空气，1618h,头孢泊肟的抑菌环22mm 头孢他啶的抑菌环22mm 氨曲南的抑菌环27mm 头孢噻肟的抑菌环27mm 头孢曲松的抑菌环25mm 意味着可疑有ESBLs的产生临床常见病原体检测41超广谱-内酰胺酶(ESBLs)的检测三代头孢菌素初筛法(1ESBLs双纸片协同试验检测法(2

17、)奥格门丁头孢噻肟头孢他定奥格门丁协同抑菌环要同时使用两种以上的指示药物与奥格门丁作协同抑菌试验临床常见病原体检测42ESBLs双纸片协同试验检测法(2)奥格门丁头孢噻肟头孢他定ESBLs双纸片确证试验检测法(3)头孢他定及抑菌环头孢噻肟及抑菌环头孢他定CA及抑菌环头孢噻肟CA及抑菌环抑菌环直径之差5mm即为ESBLs阳性临床常见病原体检测43ESBLs双纸片确证试验检测法(3)头孢他定及抑菌环头孢噻肟 ESBLs的临床意义 对于大肠埃希菌、克雷伯菌属，奇异变形杆菌如确认为产ESBLs菌株，不管体外药敏试验的结果如何，对所有的青霉素类、头孢菌素类,单环-内酰胺类和氨曲南类药物都应报告耐药。因为

18、其在体内表现为临床耐药。ESBLs临床常见病原体检测44 ESBLs的临床意义 ESBLs临床常见病原体检测44耐甲氧西林葡萄球菌的检测 含苯唑西林纸片的试验比甲氧西林或萘夫西林纸片更可能检测出MRS检测MRS的平板应于35孵育整24小时(而不是1618小时),含4%NaCl苯唑西林纸片抑菌圈直径10mm的金黄色葡萄球菌或抑菌圈直径19mm凝固酶阴性葡萄球菌都为MRS 临床常见病原体检测45耐甲氧西林葡萄球菌的检测 含苯唑西林纸片的试验比甲氧西林或萘临床意义对苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌及凝固酶阴性葡萄球菌(MRS)，所有青霉素、头孢菌素类、亚胺培南及其他-内酰胺类，例如阿莫西林/棒酸、氨苄西

19、林/舒巴坦、替卡西林/他唑巴坦及亚胺培南可表现体外抗菌活性，但临床无疗效。临床常见病原体检测46临床意义对苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌及凝固酶阴性葡萄球菌(耐青霉素肺炎链球菌用1g苯唑西林纸片来测定肺炎链球菌对青霉素的耐药性当苯唑西林抑菌圈直径20mm时，肺炎链球菌对青霉素敏感(MIC0.06ug/ml)。当苯唑西林抑菌圈直径19mm时，应检测其MIC（ MIC 2ug/ml）。仅靠苯唑西林抑菌圈直径19mm，不能报告该菌株对青霉素耐药或者中介。临床常见病原体检测47耐青霉素肺炎链球菌用1g苯唑西林纸片来测定肺炎链球菌对青霉氨基糖苷类高水平耐药肠球菌检测高浓度的庆大霉素和链霉素对待测的肠球菌的

20、抑菌圈直径为6 mm，判定为HLAR，直径10 mm为高浓度氨基糖苷类敏感肠球菌(High level aminoglycoside sensitive，HLAS)根据药敏纸片的不同，HLAR分为庆大霉素高度耐药肠球菌(High level gentamicin resistant，HLGR)和链霉素高度耐药肠球菌(High level streptomycin resistant，HLSR)HLAS分为高浓度庆大霉素敏感肠球菌(High level gentamicin sensitive，HLGS)和高浓度链霉素敏感肠球菌(High level streptomycin sensitive

21、，HLSS)临床常见病原体检测48氨基糖苷类高水平耐药肠球菌检测高浓度的庆大霉素和链霉素对待测三 耐药基因检测常见的耐药基因及其检测方法PCR：必须知道目标DNA核酸序列PCR-RFLP分析：限制性核酸片段长度多态性分析PCR-SSCP：单链构象多态性分析PCR-线性探针分析生物芯片技术DNA序列分析临床常见病原体检测49三 耐药基因检测常见的耐药基因及其检测方法临床常见病原体检经验用药几种可能关系及处理经验用药有效，药敏结果相符经验用药有效，药敏结果不相符-不换药经验用药无效，药敏结果不相符-换药临床常见病原体检测50经验用药几种可能关系及处理经验用药有效，药敏结果相符临床常 抗生素预防用药

22、实例内科系统1 有风湿热病史或患有风湿性心脏病小儿和青少年为防止反复 发作， 溶血链球菌咽炎引起风湿热复发和风湿性心脏病 加重，预防用药：氨苄青霉素120万单位（万U），肌内注 射每月1 次,持续到成年甚至更长2 糖尿病患者或心脏瓣膜病患者 （1）拔牙或扁桃体手术前，青霉素160万U240万U，静脉 滴 注1次或氨苄西林2g 静脉滴注1 次，术后静脉滴注每日 2 - 3次，给 药 1-2天 （2）其他手术，术前头孢唑啉1g静滴1次，术后每日静滴2次， 给药1-2天。或用头孢呋辛术前1.5g静滴1次，术后每日 静脉2次，给药1-2天临床常见病原体检测51 抗生素预防用药实例内科系统3 流行性脑膜

23、炎：流行季节，流行区，与流脑病人密切接触人群， 磺胺嘧啶1-2g/日,分二次口服（小儿0.25-0.5g/日，分2次口服），同服等量碳酸氢纳4 其它细菌疫情应针对致病菌选用预防药物。如为炭疽杆菌，与该菌引起的呼吸道感染病人密切接触者，可用环丙沙星或左氧沙星片剂口服 每次0.25-0.3g，每日2次进行预防，如已发病，则用以下一种药物的静脉针剂滴注（青霉素，氨苄西林，环丙沙星，左氧沙星）。剂量用说明书中剂量范围的高限，青霉素类每日静滴3-4次，氟喹诺酮类每日静滴2次。 临床常见病原体检测52临床常见病原体检测52 抗生素预防用药实例外科系统1 非污染手术原则上不必预防使用抗生素，必要时术前，术中

24、,术后各1次; 静滴头孢唑啉各1g2 非污染高危手术（心血菅手术，脑外科手术，器官移植手术等）应预防使用抗生素 方法：头孢唑啉或头孢呋辛 术前： 1.5g静滴1次 术后： 1.5g静滴 每12小时一次，2-3天3 胃肠道污染手术应预防使用抗菌药物 方法：术前（1）口服新霉素加红霉素清洁肠道 （2）头孢唑啉1-2g静滴联合甲硝唑0.5g静滴 术中开始 用头孢唑啉1-2g静滴联合甲硝唑0.5静滴 每日2次 连续2-3天 如术后发生感染应根据临床与致病菌敏感试验结果调整给 药方案进行抗感染治疗临床常见病原体检测53 抗生素预防用药实例外科系统临床第三节 临床感染常见病原体检测感染性疾病：由病原微生物

25、和寄生虫感染机体后引起的疾病是发病率高和引起人类死亡的主要疾病包括传染病和非传染病临床常见病原体检测54第三节 临床感染常见病原体检测感染性疾病：由病原微生物和寄临床病原体检查目的临床病原体检查目的: 是确定感染的发生和性质，在疾病早期提供恰当的治疗方案，并采取有效的预防措施，防止感染传播造成的危害。临床常见病原体检测55临床病原体检查目的临床病原体检查目的:临床常见病原体检测55一、流行病学和临床症状疾病谱发生变迁，新传染病陆续被发现多重耐药菌的出现器官移植、抗肿瘤化疗和辅料的开展，减弱了机体的免疫防御功能临床常见病原体检测56一、流行病学和临床症状疾病谱发生变迁，新传染病陆续被发现临床细菌

26、感染检查检验特点通过对标本直接显微镜检，病原菌的分离培养鉴定，病原菌的抗原检测，核酸检测和细菌感染后机体免疫应答产物的测定及药物的测定及药物敏感性试验，对细菌感染性疾病可作出及时、准确的病原学诊断。临床常见病原体检测57细菌感染检查检验特点通过对标本直接显微镜检，病原菌的分离培养 检测程序临床常见病原体检测58 检测程序临床常见病原体检测58病毒感染检查检验特点标本处理：必须经滤过除菌，标本需迅速冷藏、运送。病毒分离培养后，根据细胞病变特征确定病毒的种，对已分离的病毒用已知参考血清作中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验。新的早期诊断技术：核酸杂交技术、PCR技术。临床常见病原体检测59病毒感染

27、检查检验特点标本处理：必须经滤过除菌，标本需迅速冷藏病实毒验感室染诊性断疾 病 的 临床常见病原体检测60病实临床常见病原体检测60病毒的血清学诊断补体结合试验中和试验血凝抑制试验间接免疫荧光检测酶免疫技术（ELISA)琼脂扩散对流电泳临床常见病原体检测61病毒的血清学诊断补体结合试验临床常见病原体检测61真菌感染检查真菌(Fungus)是一大类具有典型细胞核 不含叶绿素，不分根、茎叶的真核细胞型生物。 临床常见病原体检测62真菌感染检查真菌(Fungus)是一大类具有典型细胞核 临床真菌感染检查检验特点形态学检查为检测真菌的重要手段抗原检测适合血清和脑脊液中隐球菌、念珠菌、夹膜组织胞浆菌。血

28、清学诊断适用于深部真菌感染。临床常见病原体检测63真菌感染检查检验特点形态学检查为检测真菌的重要手段临床常见病菌丝、孢子临床常见病原体检测64菌丝、孢子临床常见病原体检测64寄生虫病寄生虫是单细胞或多细胞体，当其侵入宿主后，可在宿主体内寄生、发育而导致感染。临床常见病原体检测65寄生虫病寄生虫是单细胞或多细胞体，当其侵入宿主后，可在宿主体 生物学性状是一种新型的冠状病毒病毒是单链RNA病毒是一种人畜共患病原体目前已发现SARS病毒有6个变种实验室检测 免疫学检测 分子生物学技术其他病原体感染：SARS临床常见病原体检测66 生物学性状实验室检测其他病原体感染：SARS临床SARS免疫学诊断 免

29、疫荧光技术 ELISA技术 感染早期 抗体可无法检出，急性期到恢复期的阳转或者是抗体效价的4倍增长，提示有近期感染。临床常见病原体检测67SARS免疫学诊断 免疫荧光技术 ELISA技术 感染早期 第五节 性传播疾病病原体检测性传播疾病(sexually transmitted diseases, STD)是一组由性接触行为或类似性行为接触为主要传播途径，可引起泌尿生殖器官及附属淋巴系统病变的疾病，主要侵犯皮肤、性器官和全身脏器器官。 临床常见病原体检测68第五节 性传播疾病病原体检测性传播疾病(sexually 一 流行病的病原学病原体种类:细菌（淋病奈瑟菌、杜克雷嗜血杆菌等）、病毒（HIV

30、、HPV等）、支原体（解脲支原体、生殖支原体）、螺旋体（梅毒螺旋体）、衣原体（沙眼衣原体D-K型，L1型等）、真菌（白色念珠菌等）和原虫（阴道毛滴虫等）。临床常见病原体检测69一 流行病的病原学病原体种类:细菌（淋病奈瑟菌、杜克雷嗜流行病学的传播途径性行为传播：性交是主要传播方式。间接接触传染：通过污染的衣物、器具，如共用水杯毛巾等。血液与血制品传播：梅毒与获得性免疫缺陷症可以通过此途径传播。母婴垂直传播：对胎儿与新生儿的传播主要途径大体分为3种：子宫内传染；分娩过程中的传染；产后传染。职业性传播：梅毒可在接生过程中将病菌传染给未带橡皮手套的助产士，HIV可将病毒通过针头或手术刀传染给医务人员

31、。临床常见病原体检测70流行病学的传播途径性行为传播：性交是主要传播方式。临床常见病监测报告的8种性病监测报告的8种性病：艾滋病、淋病、梅毒、软下疳、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎（NGU)、尖锐湿疣、生殖器疱疹经典性病(4种)：梅毒(syphilis)、淋病(gonorea)、软下疳(chancroid)、性病淋巴肉芽肿(lymphogranloma venreum) 临床常见病原体检测71监测报告的8种性病监测报告的8种性病：艾滋病、淋病、梅毒、软二 常见临床类型获得性免疫缺陷症（AIDS） 是由人类免疫缺陷病毒（HIV）通过结合细胞表面的CD4蛋白受体进入易感细胞引起部分免疫系统被破坏，

32、进而导致严重的机会感染和继发性癌变。其临床表现主要是发生卡氏肺囊虫引起的肺炎，结核分枝杆菌或胞内分支杆菌引起的结核等，继发性癌变如kaposi肉瘤和非霍奇金淋巴瘤。HIV传播方式：性传播；血液传播；母婴传播。临床常见病原体检测72二 常见临床类型获得性免疫缺陷症（AIDS） 是由人类免疫 窗口期及潜伏期窗口期 通常感染HIV4周3个月后才能从血液中检测出抗HIV抗体。这段时间称窗口期艾滋病潜伏期 较长，可达212年，平均潜伏期在810年之间临床常见病原体检测73 窗口期及潜伏期窗口期 通常感染HIV4周3个月后 HIV属于逆转录病毒科慢病毒属中的人类慢病毒组，为直径约100120nm球形颗粒。

33、 HIV外形临床常见病原体检测74 HIV属于逆转录病毒科慢病毒属中的人类慢病毒组，为直径 艾滋病全球流行动态 1981年美国发现首例艾滋病病人；2003年底估计已造成6900万人感染HIV，其中2300万人死于AIDS；全球几乎没有一个国家和地区幸免；撒哈拉沙漠以南非洲最严重；东欧和中亚地区是目前感染率在全世界增长最快的地区。 临床常见病原体检测75 艾滋病全球流行动态 1981年美国发现首例艾滋病病人；临我国艾滋病流行现状HIV/AIDS在1985年传入我国；到2003年底全国累积报告HIV感染者62195例，ADIS病例8742例，死亡2359例；HIV感染数量居亚洲第2位，全球第14位

34、；已波及到全国31个省(自治区、直辖市)，进入了广泛流行期；专家估计目前我国现存活的HIV感染者约85万，AIDS病人810万。临床常见病原体检测76我国艾滋病流行现状HIV/AIDS在1985年传入我国；临床湖北省艾滋病疫情概况截至2010年底，全省累计报告：HIV/AIDS： 7875 例AIDS病人： 4679 例死亡例数： 2424 例临床常见病原体检测77湖北省艾滋病疫情概况截至2010年底，全省累计报告：临床常见表1 艾滋病疫情居前10位的市（州）、县（区）统计艾滋病疫情居前10位的市（州）、县（区）统计 表1 艾滋病疫情居前10位的市（州）、县（区）统计排位序号按累计疫情报告数统

35、计按本年度疫情报告数统计以市州为单位县市区为单位以市州为单位县市区为单位市州名称疫情报告数县市区名称疫情报告数市州名称疫情报告数县市区名称疫情报告数1襄阳市1245随县589武汉市341武昌区662武汉市967浠水县547襄阳市131大冶市623黄冈市915南漳县480荆州市131洪山区464随州市729巴东县359黄石市101江汉区455恩施州672大冶市310黄冈市84桥口区346荆州市492襄城区207恩施州84江岸区317黄石市470武昌区151咸宁市72樊城区308十堰市360樊城区144孝感市71浠水县269宜昌市339蕲春县143宜昌市68石首市2510孝感市308江汉区122十

36、堰市44巴东县25合计649730521127390临床常见病原体检测78表1 艾滋病疫情居前10位的市（州）、县（区）统计艾滋艾滋病感染者及病人高危行为人群一般（普通）人群干预健康教育关怀艾滋病防治对策及主要措施临床常见病原体检测79艾滋病高危行为人群一般（普通）人群干预健康教育关怀艾滋病防治梅毒（syphilis）梅毒（syphilis） 是由苍白螺旋体 引起的一种慢性性传播疾病 。初期梅毒：螺旋体穿过黏膜进入淋巴系统，并留下了充满密螺旋体的伤口。二期梅毒：初期损伤一旦愈合，新的二期损伤开始出现在皮肤和细胞膜上，损伤表面布满了具有极强传染性的密螺旋体。三期梅毒：可在早期感染后的540年间出

37、现，密螺旋体可出现在受严重损伤的中枢神经系统和心血管系统中，主要传播途径是性接触和先天传染，微生物通过胎盘并感染胎儿。临床常见病原体检测80梅毒（syphilis）梅毒（syphilis） 是由苍白螺梅毒诊断方法暗视野显微镜检查： 适用早期梅毒的检查（一期或二期）血清学方法： 非特异性反应素试验 （USR、RPR）特异性的螺旋体抗体试验（TP-Ab）临床常见病原体检测81梅毒诊断方法临床常见病原体检测81淋病（gonorrhea）淋病（gonorrhea）是由淋病奈瑟菌（Neisseria gonorrhoeae）引起的泌尿生殖系统的急性或慢性化脓性感染，是发病率最高的性传播疾病。主要通过不洁

38、性交传播，患淋病的孕妇胎膜破裂，可感染羊膜腔及胎儿。新生儿通过感染的产道时也可感染导致新生儿眼炎。临床常见病原体检测82淋病（gonorrhea）淋病（gonorrhea）是由淋病淋球菌的分离、培养、鉴定A、在培养基上1/4的表面滚动棉拭接种B、装淋球菌培养皿的合适罐子临床常见病原体检测83淋球菌的分离、培养、鉴定A、在培养基上1/4的表面滚动棉拭接非淋菌尿道炎（non-gonococcal urethritis，NGU）是由淋菌以外的其他病原菌，主要是沙眼衣原体、解脲支原体等通过性接触所引起的尿道炎症。该病好发于青年人，25岁以下约占60%，潜伏期比淋病长，平均为13周，有前列腺炎、附睾炎等

39、。临床常见病原体检测84非淋菌尿道炎（non-gonococcal urethrit性病淋巴肉芽肿由衣原体引起的人类接触性感染的性病。 初期一般无明显症状，随着病情的发展，会逐渐出现外生殖器溃疡，继而出现腹股沟淋巴结化脓、穿孔和晚期外生殖器橡皮肿，以及直肠狭窄的症状。在发病的过程中出现全身症状，发热、头痛、发冷。临床常见病原体检测85性病淋巴肉芽肿由衣原体引起的人类接触性感染的性病。 临床常见生殖器疱疹和尖锐湿疣生殖器疱疹主要是由单纯疱疹病毒（HSV-1）所引起的尖锐湿疣是由人乳头瘤状病毒（HPV）感染引起的一种性传播疾病。主要类型为HPV1、2、6、11、16、18、31、33及35型等 临

40、床常见病原体检测86生殖器疱疹和尖锐湿疣生殖器疱疹主要是由单纯疱疹病毒（HSV-软下疳软下疳是由杜克雷嗜血杆菌引起的疼痛性溃疡性的性病，目前在我国的发病率不高。 临床常见病原体检测87软下疳软下疳是由杜克雷嗜血杆菌引起的疼痛性溃疡性的性病，目前二 检查项目和临床应用检测项目分离、培养、鉴定标本接种：选择合适的培养基、观察菌落性状作生化鉴定病毒、立克次体、衣原体、接种细胞或易感动物和血清学方法鉴定。抗原检测核酸检测临床常见病原体检测88二 检查项目和临床应用检测项目分离、培养、鉴定临床常见第六节 医院感染常见病原体检测医院感染概念：医院感染（nosocomial infection， hospi

41、tal infection ）是指在医院内获得并发生的一切感染，即病人在人院时不存在，也不处于感染的潜伏期而是在人院后所引起的感染，包括在医院内感染而在出院后才发病的病人包括两种情况在医院内（住院期间）获得并发病在医院内获得，但出院后发病（输血后获得丙型肝炎）不包括 在入院前获得，入院后发病临床常见病原体检测89第六节 医院感染常见病原体检测医院感染概念：临床常见病原体医院感染的流行病学特点感染源：病人医院工作人员探视及陪同人员动物媒介未经彻底消毒灭菌的医疗器械、血液制品等病原微生物种类细菌真菌病毒衣原体、支原体等临床常见病原体检测90医院感染的流行病学特点感染源：临床常见病原体检测90医院感

42、染的流行病学特点感染途径：直接接触传播：病人间或病人与医护人员间通过直接接触而发生的感染，不需要传播媒介间接接触传播：接触了带菌污染物而发生的感染，医护人员的手在病原体传播中起重要作用空气传播：以空气为媒介生物媒介传播：鼠和昆虫媒介易感宿主：住院患者临床常见病原体检测91医院感染的流行病学特点感染途径：临床常见病原体检测91临床常见病原体检测培训课件医院感染常见病原体的特点正常菌群的致病明显增多耐药菌株增多：MRS, ESBLs, 多重耐药的铜绿假单胞菌、肠球菌新的病原体不断出现（如超级细菌)临床常见病原体检测93医院感染常见病原体的特点正常菌群的致病明显增多临床常见病原体 病原学的特点细菌是

43、最常见的病原菌，细菌谱发生很大变化， 其趋势是革兰阴性杆菌比例在增加，革兰阳性球菌比例在减少。条件致病菌占很大比重，如阴沟肠杆菌、聚团肠杆菌、洋葱假单胞杆菌、黏质沙雷菌等。嗜肺军团菌也是一种新出现的医院感染病原体，它是在医院装备了空调机之后才出现的。 病毒、真菌、弓形体肺孢子虫等病原体逐年增加。 如肝炎病毒、流感病毒、疱疹病毒、风疹病毒、水痘病毒、轮状病毒、巨细胞病毒、麻疹病毒、柯萨奇病毒等。临床常见病原体检测94 病原学的特点细菌是最常见的病原菌，细菌谱发生很大变化， 其常见临床类型1.下呼吸道感染：为我国最常见的医院感染类型，吸入咽部 的定植菌是主要的发病机制，发生率约占23.3%42%。 2.尿路感染：由于保留导尿系统的交叉污染造成导管外上行感染，发生率占20.8%一3I.7%。 3.手术切口感染：大部分为外源性感染，接触传播起了十分重要的作用，发生率约占25%。4.胃肠道感染：主要见于使用抗生素所致肠炎。5.血液感染 主要为菌血症，可由静脉内输液、血液透析等引起