菌落总数的测定方法验证报告

1、方 法 验 证 报 告公共场所集中空调通风系统卫生规范集中空调送风中细菌总数WS 394-2012附录D1.目的验证培养法测定集中空调系统送风中的细菌总数指标，来判断在本实验室此方法的适用性。2.方法内容2.1 细菌总数集中空调系统送风中采集的样晶，计数在营养琼脂培养基上经35 37 、48 h培养所生长发育的嗜中温性需氧和兼性厌氧菌落的总数。2.2 设备和器材2.2.1六级孔撞击式微生物采样器。2.2.2高压蒸汽灭菌器。2.2.3恒温培养箱。2.2.4平皿：90mm。2.3培养基2.3.1营养琼脂培养基成分：、蛋白胨 10g氯化钠 5g内膏 5g琼脂 20g蒸馏水 1000Ml2.3.2制法

2、：将蛋白胨、氯化钠、肉膏溶于蒸馏水中，校正pH为7.27.6，加入琼脂，121 C，20 min灭菌备用。2.4采样2.4.1采样点：每套空调系统选择3个5个送风口进行检测，每个风口设置1个检测点，一般设在送风口下方15 cm20 cm、水平方向向外50 cm100 cm处。2.4.2采样环境条件：采样时集中空调系统必须在正常运转条件下，并关闭门窗15 min30 min以上，尽量减少人员活动幅度与频率，记录室内人员数量、温湿度与天气状况等。2.4.3采样方法：以无菌操作，使用撞击式微生物采样器(D.3.1)以28.3 L/min流量采集5 min 15 min。2.5检验步骤将采集细菌后的营

3、养琼脂平皿置35 37培养48 h，菌落计敷。2.6结果报告2.6.1送风口细菌总数测定结果：菌落计数，记录结果并按稀释比与采气体积换算成CFU/m3 (空气中菌落形成单位每立方米)。2.6.2集中空调系统送风中细菌总数测定结果：一个系统送风中细菌总数的测定结果按该系统全部检测的送风口细菌总数测定值中的最大值给出。3.方法验证结果3.1空白实验对灭菌蒸馏水7次做细菌总数的测定，所得结果如下表：表1 空白试验结果序号样品分析编号平皿菌落数结果（CFU/m3）1灭菌蒸馏水-10未检出2灭菌蒸馏水-20未检出3灭菌蒸馏水-30未检出4灭菌蒸馏水-40未检出5灭菌蒸馏水-50未检出6灭菌蒸馏水-60未

4、检出7灭菌蒸馏水-70未检出3.2样品测试对样品分别做7次细菌总数的测定，所得结果如下表：表2 样品测试结果序号样品分析编号结果（CFU/m3平均结果（CFU/m3）120102803W010101-1010101-62121220102803W010201-1010201-628320102803W010301-1010301-614420102803W010401-1010401-628520102803W010501-1010501-614620102803W010601-1010601-614720102803W010701-1010701-628根据以上测试结果得知，蒸馏水灭菌后测得结果均为阴性，根据以上测试结果得知，空白测得结果均未检出，样品测的结果为21CFU/m3，因此本实验室的环境和仪器、试剂均符合标准的要求。4.结论经验证，本实验室已具备开展该方法测试所需的仪器设备并已达