白花丹参叶制剂对乳腺癌BCaP-37细胞株增殖抑制的体外研究

1、黑花丹参叶制剂对乳腺癌BCaP-37细胞株删殖抑制的体中研讨焦鹏，常起，王欣农，李年夜伟，夏做理【摘要】目的没有俗观察黑花丹参叶制剂对于人乳腺髓样癌细胞株BaP-37死少的抑制做用。要收以体中培养的人乳腺癌细胞株BaP-37为靶细胞,利用四氮唑盐法(TT法)没有俗观察黑花丹参叶制剂做用12h后对于人乳腺癌细胞株死少的影响。以流式细胞仪阐收其对细胞周期战凋亡率的影响。结果TT法结果表示，黑花丹参叶制剂做用12h可抑制BaP-37的死少,并呈剂量依托性。流式细胞仪测定结果表示，随黑花丹参叶制剂浓度的删减，凋亡峰越去越较着，分析确花丹参叶制剂可正在一定程度上引诱细胞凋亡,并且凋亡率与浓度呈正相关；但

2、对细胞周期无隐着影响。结论黑花丹参叶制剂可抑制体中培养的人乳腺癌细胞株BaP-37删殖并促使癌细胞凋亡且呈一定的量效关连。【关键词】黑花丹参叶制剂人乳腺髓样癌细胞株细胞删殖凋亡黑花丹参为唇形科动物丹参的变型。常睹丹参花为紫色，而黑花丹参果其药用价格弘年夜于紫花丹参且濒于灭绝而尤其珍贵。做为我国传统中草药，它安好无毒副做用，疗效切当1，2。古世医教研讨结果说明，丹参对医治血汗管徐病，改进微轮回，降脂、降压、抗菌消炎、抗肿瘤等有一定做用。丹参古古皆以根部进药。为综开开拓利用丹参药物质本,已有研讨创制其各部位均露有丰富的微量元素3，4。本文以人乳腺髓样癌细胞株BaP-37为靶细胞，没有俗观察黑花丹参

3、叶制剂正在体中对该细胞删殖的影响，并对其做用机制举止初步研讨。1工具1.1仪器与试剂FASalibur流式细胞仪好国BD公司，LG16-下速微量离心计心情北京医用离心计心情厂，del550酶标仪好国BI-RAD公司,-15A2培养箱日本三洋股份，RPI1640培养基Gib公司，重死牛血浑杭州四季青公司，两甲基亚砜(Siga公司)，噻唑蓝(Siga公司),碘化丙啶Siga公司。1.2黑花丹参叶制剂制备黑花丹参叶产自泰山由山东年夜教专士死导师夏做理教授断定，黑花丹参叶制剂由泰山医教院微轮回重面真止室制备。制备过程以下：称与50g自然枯燥的黑花丹参叶，毁坏，过30目的网眼筛后正在100火中浸泡5in

4、，过滤，搜集上浑液，改变蒸收仪蒸馏煮剂后举止热冻枯燥，枯燥48h后估计获得10g样品，置于枯燥器中躲光-20保存待用5，6。每次用时称获恰当样品，真止前用RPI1640培养液(没有露血浑)密释成所需浓度,0.22滤膜过滤后，用于体中真止。2要收2.1体中细胞删殖抑制真止(TT比色法)选用人乳腺髓样癌细胞株，与形状良好的对数死少暂细胞用于真止,以每孔5103个细胞100l接种于96孔培养板中，揭壁24h后分别接进没有同浓度的无菌的黑花丹参叶制剂溶液100l,使末极浓度分别为0.3,0.5,0.8g/L,各组设4个复孔,比力组减100l无血浑培养液,正在37,50l/L2前提下担当培养12h，真止

5、截至前参与新配制的5g/L的TT溶液20l,混匀,再担当培养4h，弃去上浑,每孔减DS200l,充分振荡30in,490n处测定每孔的吸光度A值7。策画相对存活率：相对存活率(%)=真止孔A值/比力孔A值100%8。2.2流式细胞仪检测细胞周期与凋亡率搜集没有同浓度黑花丹参叶制剂处理的BaP-37细胞为真止组,没有减药的BaP-37细胞为比力组,1000r/in离心5in搜集细胞,70%冰乙醇结真2h,离心后每样品管中减0.5l碘化丙啶(PI)染液,4躲光染色30in,流式细胞仪检测细胞周期与凋亡率,每样品猎与20000个细胞9。3结果3.1黑花丹参叶制剂对BaP-37细胞删殖的影响黑花丹参叶

6、制剂处理BaP-37细胞后，能使细胞存活率隐下降降，并呈剂量依托效应(睹表1)。表1没有同浓度黑花丹参叶制剂对细胞存活率的影响略3.2黑花丹参叶制剂对BaP-37细胞周期战细胞凋亡的影响由流式细胞仪阐收结果可睹,黑花丹参叶制剂对BaP-37细胞周期影响没有年夜，但跟着黑花丹参叶制剂浓度的删减，凋亡峰越去越较着睹图1。正在比力组中，凋亡峰所占比例为0.7%；当黑花丹参叶制剂做用浓度为0.5g/L时，凋亡峰所占比例降低到3.48%；浓度为0.8g/L时，凋亡峰所占比例为17.66%。4会商多年去，人们将丹参广泛利用于临床，是具有活血化瘀活性的经常使用中药。已有研讨证明某些活血化瘀类中药有抑癌抗癌做用比方单味中药脱山龙，如古癌症医治已垂垂趋背统开医治并以结开传统医治，透过份子靶面的调控去操做癌细胞的开展，以达相辅相成之效。国内在那圆里侧重于中药、尿萃与物及特有食物等，主假如藉浑热解毒、活血化瘀等做用，以汲引免疫、增进细胞凋亡、删减分化及调控份子靶面10。本真止表示，黑花丹参叶制剂正在体中能有效天抑制乳腺癌细胞删殖，并且经由过程流式细胞仪检测也隐着创制其能增进BaP-37细胞的凋亡。古世医教研讨说