食品的前处理方法

1、样品前办理条件的优化前办理是剖析方法的重点一环，样品前办理的目的是使样品能合适剖析方法的要求。往常包含消化和提取、分别和净化等步骤。灰化样品时选择适合的温度和时间，必需时可加助熔剂；湿法消化选择适合的酸和温度。提取要选择提取效率高的提取剂和提取方法。提取条件的选择一般以加标样品或阳性样品用不一样溶剂和方法提取，将样品与标准溶液的测定结果进行比较，计算提取率。分别和净化是为了去除扰乱成分。可用C18柱、硅镁吸附剂、D101大孔吸附树脂等吸附分别，对洗脱条件进行优化，选择适合洗脱剂和洗脱时间。二、食品样品的前办理pretreamentoffoodsamples）指食品样品在测定前除去扰乱成分，浓缩

2、待测组分，使样品能知足剖析方法要求的操作过程。1.无机化办理采纳高温或高温下强氧化条件，使食品样品中的有机物分解并呈气体逸出，而待测组分被保存下来用于剖析的一种样品前办理方法。1）湿法消化（wetdigestion）加入氧化性强酸，加热损坏有机物，使待测的无机成分开释出来，以便剖析测定。方法特色.长处：分解有机物速度快、所需时间短；加热温度低，减少待测组分的挥发损失。弊端：消化过程产生大批有害气体，操作一定在通风橱中进行；试剂用量较大，有时空白值高；消化早期，反响激烈产生大批泡沫，样品可能溢出；样品可能出现炭化，使待测组分损失。常用的氧化性强酸a）硝酸浓硝酸（6568%,14mol/L),沸点

3、121.8拥有较强的氧化能力，能将样品中有机物氧化成CO2和H2O，自己复原成NO2。独自使用硝酸不可以完整分解有机物，所以经常与其余酸配合使用。几乎所有的硝酸盐都溶于水，但易与锡和銻形成难溶的偏锡酸H2SnO3）和偏銻酸（H2SbO3）或其盐。b）高氯酸（65%70%，11mol/L）能与水形成恒沸溶液，沸点203。热的高氯酸是强氧化剂，氧化能力较硝酸和硫酸强，几乎所有的有机物都能被它分解。高氯酸沸点适中，氧化能力长久，用于消化食品样品速度快，过度的高氯酸易除去。但一般不独自用高氯酸氧化样品，而使用硝酸和高氯酸的混淆酸分解有机物。除K和NH4盐外，一般高氯酸盐都溶于水。c）硫酸稀硫酸没有氧化

4、性，热的浓硫酸（98%，18mol/L）有较强氧化性，对有机物有激烈的脱水作用，可使食品中的蛋白质氧化脱氨。.硫酸沸点高（338），不易挥发损失。硫酸的氧化能力不如高氯酸和硝酸强，硫酸与碱土金属（Ca、Mg、Ba和Pb）形成的盐在水中溶解度较小。常用消化方法a）硫酸消化法凯氏定氮法测定食品中蛋白质含量采纳硫酸消化法，同时加入硫酸钾和硫酸铜，蛋白质中的氮转变为硫酸铵留在消化液中，不会进一步氧化成氮氧化物而损失。b）硝酸高氯酸消化法可采纳两种方式：一是先加硝酸消化，待大批有机物分解后再加高氯酸；二是预先以必定比率（一般为HNO3HClO44+1）配制混淆酸，将样品浸泡留宿，第二天消化。该法氧化能力

5、强，消化速度快，消化温度较低，挥发损失少。消化时应特别注意安全。含酒精和含油脂许多组分，不宜采纳此法。c）硝酸硫酸消化法加入两酸混淆液或先加硫酸，加热使有机物分解、炭化，而后不停补加硝酸。此法不宜做食品中碱土金属的剖析。对含大批脂肪和蛋白质的样品，消化后期可加入少许高氯酸或过氧化氢，加快消化速度。消化操作技术a）敞口消化法：往常在凯氏烧瓶或硬质锥瓶中进行，是最常用的消化方法。b）回流消化法.测定含挥发性成分的样品时，可在回流消化妆置中进行，防止被测组分挥发损失。c）冷消化法又称低温消化。将样品与消化液混淆后置于室温或3740烘箱内，搁置留宿。低温消化可防止易挥发元素的损失。仅适于含有机物较少的

6、样品。d）密封罐消化法采纳压力密封消化罐和少许消化液，在必定压力下对样品消化。将密封罐置于150烘箱中保温2h。因为在密闭容器中消化液的蒸气不可以逸散，产生较高压力，提升了消化剂的利用率。此法样品用量一般小于1g，只要加30%的过氧化氢和一滴硝酸即可，空白值较低。e）微波消解法在2450MHz的微波电磁场作用下，微波穿透容器直接辐射到样品和试剂的混淆液中。汲取微波能量后，使消化介质的分子互相摩擦）干灰化法（dryashing）将样品置于磁坩埚中，先在电炉上脱水、炭化，再置于500600高温炉中灼烧灰化。有机物分解，留下无机物供测定。产生高热。同时交变电磁场使介质分子极化，高频辐射使极化分子迅速

7、转动，产生剧烈摩擦、碰撞和震动，使样品分解。微波消解试剂用量小，空白值低；使用密闭容器，减少了对外界的污染。方法特色操作简易，基本不加或加极少试剂，因此空白值很低。.提升干灰化法回收率的举措a）加入助灰化剂为加快有机物氧化，防备某些组分挥发或被坩埚吸留，可加适当助灰化剂。如测食品中碘时可加氢氧化钾使碘元素变为难挥发的碘化钾，减少损失；测砷时可加氧化镁和硝酸镁，使砷转变为难挥发的焦砷酸镁（Mg2As2O7），经常将氧化镁衬垫在坩埚底减少坩埚吸留。b）采纳适合的灰化温度应选择尽可能低的温度灰化，但温度过低会延伸灰化时间。往常选55025灰化4h，一般不超出600。最近几年发展了低温灰化技术，将样品

8、放在低温灰化炉中，先将炉内抽至近真空，并通入氧气，用射频照耀使氧气活化，在低于150下即可是有机物所有灰化。但当前低温灰化炉价钱昂贵，尚难普及。2.扰乱成分的去除测定各样有机成分时，可采纳多种前办理方法，将待测的有机成分与基体或其余扰乱成分分别后再进行测定。常用分别净化方法有：1）溶剂提取法依据相像相溶的原则。一般分为浸提法和液液萃取法。浸提法利用样品中各组分在某一溶剂中溶解度的差别。包含：振荡浸渍法、捣碎法、索氏提取法和超声波提取。液液萃取法.利用溶质在两种不相溶的溶剂中分派系数不一样。如测定动物油脂中的有机氯农药，可先用石油醚萃取，而后加浓硫酸使脂肪磺化生成极性大的亲水性物质，加水反萃取可

9、除掉脂肪，有机氯农药留在石油醚层。如测定鱼肉中的组胺，是以盐的形式存在于样品中，需加碱使之生成组胺，用戊醇萃取至有机相中，再加盐酸，组胺以盐酸盐的形式存在，易溶于水，被反萃取至水相，与样品中其余组分分别。2）挥发法和蒸馏法利用待测组分的挥发性或经过化学反响将其转变为拥有挥发性的气体，与样品基体分别，经汲取液采集后用于测定。蒸馏法常压蒸馏、减压蒸馏及水蒸气蒸馏。吹蒸法测定挥发性有机磷农药，第一用乙酸乙酯提取样品中的残留农药。取必定量样液加入填有玻璃棉、砂子的Storherr管中，将管加热到180185，用氮气将农药吹出，经聚四氟乙烯螺旋管冷凝，采集到玻璃管中供测定用。样品中的脂肪、蜡质、色素等高

10、沸点物质仍留在Storherr管中。达到分别、净化、浓缩的目的。顶空法一般与气相色谱联用。静态顶空法：将样品置于密闭容器中，恒温加热一段时间，低沸点组分在容器内挥发达到蒸气压均衡，抽取上层蒸气用于气相色谱剖析。.动向顶空法：在顶空装置中不停通入氮气，使此中挥发性成分随氮气逸出，采集于吸附柱中，经热解吸或溶剂分析后剖析。此法操作复杂，但敏捷度高。氢化物发生法用复原剂将待测组分复原成易挥发的氢化物，从基体中分别出来。氢化物经汲取液汲取后）利用显色反响分光光度法测定；）直接导入原子汲取光谱仪测定。3）固相萃取solidphaseextraction，SPE）1）基来源理和长处基来源理是样品在固相（吸

11、附剂）和液相（溶剂）之间的分派。其保留或洗脱的体制取决于被分别物与吸附剂表面的活性基团以及被分离物与液相之间的分子作使劲。洗脱模式有两种：一是目标化合物比扰乱物与吸附剂之间的亲和力更强，因此被保存，扰乱物先洗出，而后采纳对目标化合物亲和力更强的溶剂洗脱目标化合物。二是扰乱物比目标化合物与吸附剂之间的亲和力更强，扰乱物质被保留，目标化合物直接被洗脱。采纳第一种洗脱方式的许多。2）装置和操作.主要装置是固相萃取柱（SPE小柱），外形近似于注射器针筒，往常选玻璃或聚四氟乙烯作柱体。柱体积150ml不等，最常用的是16ml。此中吸附剂的粒径多为40m。操作步骤分为：萃取柱预办理上样洗去扰乱杂质洗脱及采

12、集剖析物与液液萃取对比，固相萃取有以下长处：回收率和富集倍数高；有机溶剂耗费量低，减少环境污染；采纳高效、高选择性定性吸附剂，被剖析物与扰乱物分别更有效；易于办理小体积试样；操作简易、花费低，易于实现自动化。柱中填补物除吸附剂外也能够是离子互换树脂、凝胶等其余资料，故分别原理能够有吸附、分派、凝胶过滤、亲和萃取等。如测定保健食品中总皂甙，先用水提取，再经AXD2大孔树脂柱分别净化，用分光光度法测定。有报导将黄曲霉毒素的特异抗体联到某载体上制结婚和柱，用于剖析黄曲霉毒素时去除扰乱物。（4）固相微萃取(solidphasemicro-extraction，SPME)上世纪90年月初发展起来的样品前

13、办理技术。1993年美国Supelco企业第一推出了商品化的SPME装置，在剖析化学领域惹起了极大反响。1994年威望杂质Research&Development将其评为最优异的100项新产品之一。分为萃取和解吸两个步骤：.萃取过程将萃取针头插入带隔阂塞的固相萃取专用样品瓶内，压下活塞使萃取头纤维裸露在样液中进行萃取，经过一段时间后，拉起活塞，萃取头缩回到不锈钢针头中，拔出针头，达成萃取。可在样品瓶中加无机盐、调理pH、加热或磁力搅拌。萃取方式有两种：一种是将萃取头直接插入试样中萃取，合用于液体或气体样品中组分的分别。另一种是顶空萃取，合用于各样基质试样中挥发性和半挥发性组分的分别。影响固相萃

14、取敏捷度的要素有：涂层的种类、待测物性质、基质的种类、试样pH值、盐浓度、搅拌和加热状况等。解吸过程将萃取针头插入剖析仪器进样口，推出石英纤维，进行热解吸或溶剂解吸。热解吸合适于气相色谱法，萃取针头放入色谱仪炉箱中热解吸。用合适溶剂注入萃取柱中解吸，解吸液进行后续剖析。（5）色谱分别法柱色谱：常用硅胶、氧化铝、离子互换树脂柱。用荧光法测VB2时,用硅镁吸附剂柱吸附VB2后洗脱测定。纸色谱法:现有纸色谱分别,将样点浸出后,再用其余方法测定。剖析合成色素时，常用纸色谱分别.薄层色谱法:黄曲霉毒素B1的测定(GB法),先用薄层色谱分别,再用荧光法测定.（6）超临界流体萃取（supercritical

15、fluidextraction，SFE）与一般液液萃取或液固萃取相像，也是在两相之间进行的一种萃取方法，不一样的是所用萃取剂为超临界流体。超临界流体只好存在于超临界状态下，是介于气态和液态之间的一种既非气态又非液态的特别流体。超临界流体密度较大，与液体相像，可作为溶剂溶解其余物质；超临界流体粘度小，又与气体邻近，传质速度快，表面张力小，很简单进入固体样品内，使目标剖析物易溶于超临界流体。不一样的物质达来临界点要求的温度和压力不一样，改变物质的温度和压力，使之超出临界温度和临界压力，达到超临界状态，即可获取超临界流体。超临界流体仍是“绿色化学”倡导的洁净溶剂，正渐渐代替实验室常用的高毒、高污染的

16、有机溶剂。最常用的超临界溶剂是CO2，其临界值较低（临界温度31.06，临界压力7.39MPa）化学性质稳固，不易与溶质发生化学反响，无臭、无毒、沸点低，易与从萃取后的组分中除掉，合适于对热不稳固化合物的萃取。但CO2是非极性分子，不适于极性化合物的萃取。极性化合物的萃取可用NH3或氧化亚氮作萃取剂。超临界流体萃取常与色谱剖析联用SFEGC、SFEHPLC、SFESFC（超临界流体色谱），.用于食品中多环芳烃、多氯联苯、农药残留等测定。7）透析法利用高分子物质不可以透过半透膜而小分子或离子能经过半透膜的性质，实现大分子与小分子物质的分别。如测定食品中糖精钠含量，可将食品样品装入玻璃纸的透析膜袋中，放在水中透析。因为糖精钠分子较小，能经过半透膜进入水中，而蛋白质、鞣酸、树脂等高分子杂质不可以经过半透膜，仍留在玻璃纸袋中，进而达到分别。8）积淀分别法利用积淀反响进行分别。在试样中加入合适积淀剂，使被测成分或扰乱成分积淀下来，经过滤或离心达到分别目的。如测食品中亚硝酸盐，先加入碱性硫酸铜或三氯乙酸等积淀蛋白质，使水溶性亚硝酸盐与蛋白分别。（8）微波协助样品前办理技术微波是波长在1000.1cm的电磁波微波协助消解微波协助萃取微波加热机理：惯例加热是由外面热源经过热辐射由表及里的传导