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文档简介
1、辣椒红色素辣椒红色素 (水溶、油溶 ) 是以辣椒为原料,承受科学方法提取、分别、精制而成的自然色素。主要成份为辣椒红素和辣椒玉红素辣椒红素的分子式为C40H56O3,辣椒玉红素分子式为 C40H56O4为深红色油溶性液体, 色泽明媚,着色力强,耐光、热、酸、碱,且不受金属离子影响;溶于油脂和乙醇,亦可经特别加工制成水溶性或水分散性色素。该产品富含 胡萝卜素和维生素 C,具保健功能。广泛应用于水产品、肉类、糕点、色拉、罐头、饮料等各类食品和医药的着色。没有辣味、色泽明媚、性能稳定,耐热性、抗光性良好,不受PH值变化的影响,对油脂产品染色力强。本产品经反复除味、精制,虽有稍微的异味,添加在产品中,
2、没有任何味道。试验主要分为超声提取辣椒红素、柱层析提取辣椒红素、薄层层析提取辣椒红素三个板块。超声提取辣椒红色素一试验原理:2.旋转蒸发仪的工作原理:通过电子把握,使烧瓶在最适合速度下,恒速旋转以增大蒸 瓶内溶液在负压下在旋转烧瓶内进展加热集中蒸发。1.是辣椒粉是片状凹凸不平的纤维组织构造, 色素及其它脂溶性成分存在于纤维组织之内,,2.旋转蒸发仪的工作原理:通过电子把握,使烧瓶在最适合速度下,恒速旋转以增大蒸 瓶内溶液在负压下在旋转烧瓶内进展加热集中蒸发。二试验仪器与材料:材料:干红辣椒;仪器:粉碎机,超声波清洗器,旋蒸仪,冰箱,锥形瓶,小试管,漏斗,封口膜,滤纸,试管夹,量筒,电子天平;试
3、剂:石油醚,丙酮。三试验步骤:干红辣椒去籽粉碎辣椒粉1至2克150ml锥形瓶中70ml丙酮封口戳几个小眼试管夹夹住超声20min过滤旋蒸茄形瓶中加3至4ml石油醚标记冰箱储存;四试验说明:丙酮简洁挥发且有毒害,试验中留意避开吸入过多;超声提取中应保证锥形瓶直立,切勿斜倒让水流入;参加石油醚在茄形瓶后来回震荡,尽量溶解附着在壁上的辣椒红素;旋蒸的作用就是蒸去溶剂,比一般的方法效率高。 原理:一是靠减压;二是靠旋转时,使溶液形成液膜,扩大蒸发面。操作旋蒸仪中留意:在盛装样品的茄型瓶顺当与旋蒸仪端口连接好后,应先开动旋转按钮检查一下旋转是否机敏,更重要是的看旋蒸样品是否全部或大局部浸没于水浴锅的液面
4、内, 这样才能保证旋蒸效率。在茄型瓶中盛装的样品最多不要超过75%,否则在减压时会消灭倒吸。减压过程中要调整好水浴锅内水的温度,使其与你所旋蒸的样品的沸点相适应, 这可以从回流管的回流液状态看出,当回流液呈滴状而非呈水流时最正确。在旋蒸接近完毕时,应先翻开通气阀门,使旋蒸仪内外气压全都,然后关闭旋转开关,取下茄型瓶。柱层析分别辣椒红色素一试验原理:在吸附柱色谱中,吸附剂是固定相,洗脱剂是流淌相,相当于薄层色谱中的开放剂。吸附剂的根本原理与吸附薄层色谱一样,也是基于各组分与吸附剂间存在的吸附强弱差异,通过使之在柱色谱上反复迸行吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程而完成的。所不同的是,在进展柱色谱的过
5、程中,混合样品一般是加在色谱柱的顶端,流淌相从色谱柱顶端流经色谱柱,并不断地从柱中流出。由于混合样中的各组分与吸附剂的吸附作用强弱不同,因此各组分随流淌相在柱中的移动速度也不同,最终导致各组分按挨次从色谱柱中流出。假设分步接收流出的洗脱液,便可到达混合物分别的目的。一般与吸附剂作用较弱的成分先流出,与吸附作用较强的成分后流出。二试验仪器与材料:器材:色谱柱,滤纸片,剪刀,烧杯,小试管,量筒; 试剂:柱层析硅胶,石油醚,丙酮;三试验步骤:装柱:柱层析硅胶一次参加色谱柱振动管壁使其均匀下沉外表敲平滤纸片盖住外表沿管壁缓缓参加洗脱剂石油醚旋开活塞使洗脱剂缓缓滴出缓缓加 入石油醚使其均匀润湿下沉在管内
6、形成松紧适度的吸附层应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。样品参加:下口流出石油醚上口有石油醚 0.51ml样品;洗脱:上口马上干时石油醚冲洗石油醚:丙酮=10:1的洗脱剂收集辣椒红色素; 四试验现象:结论:承受柱层析分别技术,选用吸附剂和混合洗脱液将辣椒色素中红、橙、黄色素进一步过程中不再是一个平面地同步分别,且辣椒红色素渐渐位于了最下端。五试验说明:色谱法按固定的状态可分为柱色谱、平板色谱和棒色谱三种而试验室中最常用的是除了干法装柱外,还有湿法装柱:将吸附剂与洗脱剂混合,搅拌除去空气泡,缓缓3.吸附剂,一般应满足以下几个根本要求 :3.吸附剂,一般应满足以下几个根本要求 :对样品组分和洗脱
7、剂都不会发生任何化学反响,在洗脱剂中也不会溶解;颗粒外形均匀大小适当以保证洗脱剂能够以肯定的流速(一般为1.5mLmin-1)通过色谱柱;材料易得,价格廉价而且是无色的,以便于观看。可用于吸附剂的物质有氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙 (镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。4.样品在色谱柱中的移动速度和分别效果取决于吸附剂对样品各组分的吸附力量大小和洗脱剂对各组分的解吸力量大小,因此,吸附剂的选择和洗脱剂的选择经常是结合起来进展的:首先,依据待分别物质的分子构造和性质,结合各种吸附剂的特性,初步选择一种 吸附剂。然后依据吸附剂和待分别物质之间的吸附力大小, 选择出认为适宜的洗脱剂。
8、还是更换吸附剂的种类,或是转变洗脱剂的极性。直到确定出适宜的吸附剂和洗脱剂为止。物质与吸附剂之间的吸附力量大小既与吸附剂的活性有关,又与物质的分子极性有关。分子极性越强,吸附力量越大,分子中所含极性基团越多,极性基团越大,其吸 附力量也就越强。具有以下极性基团的化合物,其吸附力量按以下次序递增:-Cl,-Br,-I-C=C-OCH3-CO2R-CO-CHO-SH-NH2-OH-COOH一试验原理:薄层层析分别辣椒红色素薄层色谱是一种微量、快速和简便的色谱方法。薄层色谱可适用小量样品几到 几十微克甚至 0.01g的分别:也可用于多达 500mg用于定性,定量的一种重要手段。特别适用于那些挥发性小
9、的化合物,以及在高温下 易发生化学变化而不能用气相色谱分析的物质。薄层色谱常用TLC表示,又称薄层层析,属于固液吸附色谱。样品在薄层板上的吸附 剂固定相和溶剂移动相之间进展分别。由于各种化合物的吸附力量各不一样,在开放剂上移时,它们进展不同程度的解吸,从而到达分别的目的。由于小试管里提取的不是单一色素,包括辣椒红素、类胡萝卜素、辣素等。各色素的极性不同,吸附力量不一样,在开放剂上移动,进展不同程度的解析,依据原点至主斑点中心及开放剂前沿的距离,计算比移值 Rf;化合物的吸附力量与它们的极性成正比,具有较大极性的化合物吸附较强,因此Rf值较小。在给定的条件下吸附剂、开放剂、板层厚度等 ,化合物移
10、动的距离和开放剂移动的距离之比是肯定的,即 Rf值是化合物的物理常数,其大小只与化合物本身的构造有关,因此可以依据 Rf值鉴别化合物。溶质最高浓度中心至原点中心的距离Rf溶剂前沿至原点中心的距离二试验仪器与材料: 尺子;试剂:羧甲基纤维素钠,石油醚,丙酮,乙醇,薄层层析硅胶;三试验步骤:铺板:10克薄层层析硅胶于研钵35ml羧甲基纤维素钠调成均匀糊状涂在载玻片上上下稍微颠动制成薄厚均匀、外表光滑平坦的薄层板室温放置 0.5h烘箱1100.5h取出冷却枯燥器;点样:距一端 5mm处轻轻划一横线作为起始线毛细管吸取样品在起始线上留神点样;开放:广口瓶内依次参加少量石油醚:丙酮 20:1,10:1,
11、1001和石油醚:乙醇10:1的开放剂点好试样的薄层板放入 (点样的位置必需在开放剂液面之上) 开放剂上升到薄层的前沿或多组分已明显分开取出薄层板放平用铅笔划溶剂前沿的位置 ;计算Rf值:准确地找出原点,溶剂前沿以及样品开放后斑点的中心,分别测量溶剂前沿和样点在薄层板上移动的距离,求出其 Rf值。四试验现象:柱层析分别后的辣椒红色素石油醚:丙酮=100:120:110 :1石油醚:乙醇 =10:1所以,辣椒红色素的 Rf=2.3/6.4=0.36类胡萝卜素的 Rf=2.5/6.4=0.39辣素的Rf=5.5/6.4=0.86未经柱层析分别后的辣椒红色素石油醚:乙醇=10:1石油醚:丙酮 =10
12、:1结论:通过柱层析分别后所得的色素明显种类少了,于是在薄层层析中能分别出的色素带少了;从这四种开放剂的效果看,石油醚:丙酮 =10:1的开放剂效果最好。五、试验说明:试验留意事项:研磨要细、调和均匀,铺板要留意避开气泡、厚薄均匀;硅胶和羧甲基纤维素钠的比例要适宜 :2.5-4.5 最正确.依据自己点样的粘稠度调整;铺板时手要平稳,否则简洁不均匀。室内温度不能太潮湿;活化不充分的话板易裂且斑点无法分开;如需重复点样,则应待前次点样的溶剂挥发前方可重点,以防样点过大,造成拖尾、集中等现象,影响分别效果;假设在同一块板上点几个样,样品点间距离为 5mm以上。点样时几个样点要在一条2mm);薄层板侵入开放剂不能超过点样线, 否则样品不在薄板上分别而直接溶入开放剂;点样完毕待样点枯燥后,方可进展开放。点样要轻,不行刺破薄层。在条件完全全都的状况,纯碎的化合物在薄层色谱中呈现肯定的移动距离,称Rf 值, 所以利用薄层色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相像的化合物是否为同一物质。但影响比移值的因素很多,如薄层的厚度,吸附剂颗粒的大小,酸碱性,活性等级,外界温度和开放剂纯度、组成、挥发性等。所以,要获得重现的比移值就比较困难。为此,在测定某一试样时,最好用样品进展比照。薄层色谱用途在于
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