凝血检测质量保证

1、凝血检测质量确保凝血检测质量保证第1页炮制虽繁必不敢省人工品味虽贵必不敢减物力凝血检测质量保证第2页临床试验室质量控制凝血检测质量保证第3页全方面质量控制室内质控室内比对室间比对室间质评分析前质量控制分析后质量控制凝血检测质量保证第4页1、抗凝剂：109mmol/L枸橼酸钠抗凝。与钙离子形成可溶性螯合物而起到抗凝作用有效阻止凝血因子FV、FVIII降解不受肝素影响，以用于肝素治疗监测 EDTA ：抑制或干扰纤维蛋白凝块形成纤维蛋白单体聚合， 对FV保护性差。 肝素：可与AT-作用抑制凝血因子反应。 草酸盐：与钙离子形成不溶性沉淀物，影响血凝仪光电终点。 分析前凝血检测质量保证第5页2、采血管次

2、序（CLSI H3-A6）：血培养管，凝血项目管（如：蓝帽）含有或不含促凝剂、含有或不含分离胶血清管（如：红帽）含有或不含分离胶肝素血浆管（如：绿帽）含有或不含分离胶EDTA 管（如：紫帽或珍珠色帽）含酵解抑制剂管（如：灰帽）对于凝血项目该文件改变了第一管必须弃置要求，当凝血管为第一管时，不论是正常人或口服华法令患者其PT或INR均不受影响，正常人APTT不受影响。不过尚不知其它凝血项目是否受到影响，所以对其它凝血项目，还是提议第二管采集。分析前凝血检测质量保证第6页3、采血管：内壁应硅化，而且死腔量越小越好。4、采血量：通常按1：9抗凝百分比采血。 但对于HCT55%患者，血浆相对于抗凝剂量

3、会降低，使凝血试验结果延长，应调整采血量。需取出抗凝剂量(ml)=0.3-血量（ml）0.00185 (100-HCT%)5、标本送检条件：室温下2小时内送检，低温会损伤血小板活化因子，使PT结果降低。6、标本保留时间：2-8 4小时，-20 1周，-80 6个月。7、凝血、溶血标本为不合格标本。分析前凝血检测质量保证第7页造成标本溶血原因凝血检测质量保证第8页室内质控室内质控功效：查找分析测定中误差，即用室内质控物检测结果去确认常规标本检测结果有效性，假如确认经过，此时常规标本检验结果才可用于疾病诊疗、治疗及预后观察等凝血检测质量保证第9页室内质控质控品选择 1.1 检测系统配套质控品1.2

4、 第三方质控品1.3 质控品要求凝血检测质量保证第10页自动质控！室内质控室内质控项目、质控频度2.1 室内质控项目PT、INR、APTT、Fbg、TT、DD、FDP2.2 质控频度凝血检测质量保证第11页凝血检测质量保证第12页允许CV建立与评定凝血允许CV评定失控率仪器失控率项目失控率室内质控质控目标确立失控限警告限凝血检测质量保证第13页室内质控质控靶值及SD累积 4.1 靶值设定？质控厂商提供数据仅供参考！ 不一样仪器对同一批号质控反应程度不一样！ 4.2 SD设定？凝血检测质量保证第14页室内质控质控规则（Westgard多规则）/5.1 警告：12s、10 x、41s5.2 失控：

5、22s、13s、R4s凝血检测质量保证第15页室内质控6. 室内质控月报表、失控处理统计凝血检测质量保证第16页允许误差本室标准PT15%15%APTT15%15%TTNA15%FBG20%10%DD3SD20%室内比对1、频率：每年2次。2、参加仪器：全部仪器，以参加EQA仪器为参考仪器。3、执行人员：当班人员、质控员；组长、主任签字确认。4、比对血浆：搜集高、中、低水平新鲜血浆共20份。5、比对项目：PT、INR、APTT、FBG、TT、DD。6、数据处理：录入专用EXCEL表格，统计r、bias%。7、判断标准：PT、INR、APTT、FBG、DD各项r0.975，而且80%样本bias

6、%在以下标准范围内为合格。8、比对试验不合格仪器需启用校准程序。凝血检测质量保证第17页室内比对*凝血检测质量保证第18页WFH卫生部、北京市CAPWFH（世界血友病联盟）EQASPT/INR、APTT、Fbg、TT（卫生部，北京市）PT/INR、APTT、Fbg、D Dimer、FDP、凝血因子、狼疮抗凝物、蛋白S/C、AT-III、vWF：Ag室间质评凝血检测质量保证第19页室间质评凝血检测质量保证第20页室间质评室间质评失控处理*凝血检测质量保证第21页室间质评室间质评失控处理-1*凝血检测质量保证第22页室间质评室间质评失控处理-2*凝血检测质量保证第23页室间质评室间质评失控处理-3

7、APTT、TT无定标项目1、订货量；2、东西两院保持批号一致；3、试剂更换批号后进行标本传递（质控品、标本），观察批间差。凝血检测质量保证第24页/1/7PT旧试剂新试剂CS5100CA7000-2CA7000-3CA7000-4143.342.643.64043220.920.72219.720.9316.616.717.915.816.9436.435.235.433.735.5511.511.812.111.212.1INR旧试剂新试剂CS5100CA7000-2CA7000-3CA7000-413.713.83.65 3.683.7221.821.861.83 1.791.8231.4

8、51.511.49 1.431.4843.133.152.96 3.063.0851.011.071.00 1.011.06室间质评标本传递举例凝血检测质量保证第25页怎么来？怎么用？APTT 100s或 15s；Fbg 1.0g/L；FDP 40g/ml，同时Fbg 1.0g/L； PT 70s或9s；TT 150s；危急值分析后凝血检测质量保证第26页分析后凝血检测质量保证第27页华法林凝血酶原时间（Prothrombin Time, PT）PT=各国货币INR=美金INR=（患者PT/MNPT）ISILocal ISI 凝血检测质量保证第28页ISI值确定？ISI是什么：反应试剂对Vit

9、amin K依赖凝血因子水平敏感程度，经过国际参考品（International reference preparation，IRP）来溯源。参考试剂BCA校正用户所用批号试剂Local ISI凝血检测质量保证第29页=MNPTPTINRISI预先ISI赋值促凝血酶原活酶试剂，Local ISI校准。用户预先测定 MNPT计算MNPT和ISI值 PT-INR系统校准Local ISI凝血检测质量保证第30页 MNPT3、冻干标准血浆1、仪器/厂商数据 地域、人群差异2、冻干正常水平质控4、20例正常新鲜血浆PT几何均数潜在问题：工作量较大Local ISI凝血检测质量保证第31页直接INR测定

10、用56个浓度认证血浆（不一样系统定值不一样）产生本试验室校准线。使用本试验凝血活酶/联合试剂测定认证血浆PT值，将所得结果和认证血浆INR赋值绘成对数图。能够用线性或正交回归方法绘制校准线，从校准线上读取患者INR值。这种方法与ISI和正常人PT均值（MNPT）无关。全部当地原因都被消除了。给每个批号试剂校准INRMNPT2,03,04,05,01,010203040= 1/ISIINRPT (sec)PT-INR系统校准Local ISI凝血检测质量保证第32页用参考血浆对试剂进行定标作校准曲线，依据定标曲线直接得到INR室间变异能够大大降低 多点定标进行校准愈加精密准确全部当地原因都被消除

11、了Local ISI采取INR定值血浆校准当地PT/INR检测系统，不但使INR结果愈加准确，而且加强了试验室间INR结果一致性，使口服抗凝剂监测愈加有效。凝血检测质量保证第33页Local ISI定标:PT-INR标准化绝不但仅是对某一仪器或某一试剂校准，从试验室角度出发是对整个系统（System）标准化！“一个样本，一个结果”，不一样系统结果趋于一致。Local ISI凝血检测质量保证第34页性能验证目标确保正确选择试验室方法，并在方法使用前进行充分、有效评价，以确保方法可靠性对试验室正在使用检验系统/方法进行定时、有效验证，以确保所使用检验系统/方法能够满足临床和患者需求，并确保检验系统

12、/方法可靠性凝血检测质量保证第35页定量方法性能验证精密度准确度评价线性携带污染方法学比较参考范围验证分析干扰及稀释验证凝血检测质量保证第36页性能验证内容批内不精密度参数PTAPTTTTFibD-dimerFDP水平1判定标准%2.002.005.004.005.005.00水平2判定标准%4.004.0010.008.0010.0010.00凝血检测质量保证第37页性能验证内容日间精密度参数PTAPTT TT Fib D-dimerFDP判定标准CV %5.005.006.676.67 6.676.67凝血检测质量保证第38页性能验证内容准确度：是测量结果中系统误差与随机误差综合，表示测量

13、结果与真值一致程度。确保检验结果准确性最有效伎俩是建立和确保检验结果溯源性计算定值参考物质或校准品测定值（测定三次取均值）与靶值偏差判断标准：小于1/2CLIA88允许变异凝血检测质量保证第39页性能验证内容线性：选取一份靠近预期上限高值血浆样本（H），分别按100%、90%、75%、50%、25%百分比进行稀释，每个稀释度重复测定2次，计算均值。将实测值与预测值作比较（偏离应小于10%），计算 y=ax+b，验证线性范围。判断结果：a值在10.1范围内，相关系数R2 0.95凝血检测质量保证第40页性能验证内容携带污染：指分析物含量高标本对分析物含量低标本其测定结果影响携带污染率=(L1-L

14、3)/(H3-L3)*100%携带污染率3%凝血检测质量保证第41页性能验证内容稀释验证：选取高值样本，分别以仪器自动稀释和手工法两种方式，按照原倍、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32百分比进行稀释，将两次结果比较，偏离应小于10%。凝血检测质量保证第42页性能验证内容参考范围验证：搜集20例健康人血浆，年纪20-70岁，男10例，女10例计算检测系统R值（R值=落在参考范围内样本数/总样本数）。要求R0.9凝血检测质量保证第43页性能验证内容方法学比对：为确保检验结果可比性，使用试验室不一样分析系统和/或公认参考方法同时检测一批病人标本，从测定结果差异了解不一样分析系统之间偏倚标本范

15、围应涵盖所比对项目标高中低值，正常结果占4060%，分别用被比较仪器方法以及比较仪器方法检测凝血检测质量保证第44页性能验证内容干扰试验：分析干扰是指某一物质对某分析物浓度或催化活力测定中任何一步骤影响作用在标本中添加不一样浓度干扰物后与未添加干扰物标本同时测定怀疑被干扰项目，比较二者结果通常添加干扰物标本和未添加干扰物标本测定结果差异应10%。凝血检测质量保证第45页干扰试验结果（乳糜）凝血检测质量保证第46页性能验证凝血检测质量保证第47页谢谢聆听！ ww_pumch凝血检测质量保证第48页检测项目1/3允许误差1/2允许误差2/3允许误差允许误差试验室自定标准提议允许CV备注PT5.00%7.50%10.00%15.00%5.40%5.40%.01-.05三水平共158次CV%结果，7次超出允许CV，均在5/12CLIA88（6.25%）以内。APTT5.00%7.50%10.00%15.00%5.00%.01-.05三水平共158次CV%结果，5次超出允许CV，最高值6.78%。与试剂换批号后批间差相关，维持1/3CLIA88。Fbg6.67%10.00%13.33%20.00%5.40%6.67%.