高效液相色谱法测定妇乐糖浆中大黄素与大黄酚含量

1、高效液相色谱法测定妇乐糖浆中大黄素与大黄酚含量【关键词】妇乐糖浆大黄素大黄酚高效液相色谱法DeterinatinfthententsfEdinandhrysphanlinFuleSyrupbyHPLGuangxiInstitutefrFdandDrugntrl,Nanning,530001,hinaAbstrat：bjetiveTdeterinethententsfedinandhrysphanlinFuleSyrupbyHPL.ethdsTheKrasil18lun2504.6，5asused,thebilephaseasethanl-0.1%phsphriaid(8515),thedete

2、tiveavelengthasat254n，theflrateas1.0lin-1.ResultsThelinearrangesfedinandhrysphanlereat0.0210.53gand0.0190.35grespetively,theaveragereveries(n=9)ere100.9%and101.1%ithRSD2.4%and1.6%respetively.nlusinThisethdissensitiveandaurate.Keyrds：FuleSyrup；Edin；hrysphanl；HPL妇乐糖浆由忍冬藤、大血藤、大黄制等10味药组成，具有清热凉血，消肿止痛之功，用

3、于盆腔炎、附件炎、子宫内膜炎等引起的带下、腹痛。由妇乐冲剂改变剂型而成。原剂型质量标准简单，无含量测定项。我们参照有关文献1，对方中大黄所含有效成分大黄素和大黄酚的含量进展了试验研究。1仪器与试药1.1仪器美国aters2695高效液相色谱仪；2996二极管阵列检测器；Eper色谱工作站；ILLI-PRA纯水处理器。1.2试药大黄素对照品批号：110756-200110，供含量测定用、大黄酚对照品批号：0796-200005，供含量测定用，对照品均由中国药品生物制品检定所提供，甲醇为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。妇乐糖浆：由贵港市冠峰制药提供。2方法与结果2.1色谱条件Krasil1

4、8色谱柱2504.6，5。流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(8515)；柱温：35；流速为1lin-1，进样量20l；检测波长254n；要求理论板数不低于3000。在此条件下，大黄素、大黄酚与其他组分完全别离。2.2对照品溶液的制备精细称取大黄素和大黄酚对照品用甲醇配制成含大黄素和大黄酚各3gl-1的混合溶液。2.3供试品溶液的制备取本品1g，精细称定，置具塞锥形瓶中，参加10%盐酸溶液乙醇3120l，超声处理功率400，频率42kHz3in，再加三氯甲烷20l，加热回流60in，立即冷却，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，30l/次

5、，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10l量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.4缺大黄阴性对照品溶液按处方及制备工艺制备不含大黄的阴性对照样品，按供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。2.5专属性实验照上述色谱条件分别精细汲取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液各20l注入色谱仪得到供试品在与大黄素和大黄酚对照品保存时间一样的位置上有一样特征的色谱峰，而阴性对照品溶液在此保存时间无色谱峰。如图13。2.6线性关系考察2.6.1精细称取大黄素对照品10.61g，置100l量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精细汲取贮备液0.5l，置25

6、l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用；再精细汲取贮备液0.3，0.5，1.0，2.0，3.0，5.0l，分别置10l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。2.6.2精细称取大黄酚对照品9.40g，置100l量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精细汲取贮备液0.5l，置25l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用；再精细汲取贮备液0.3，0.5，1.0，2.0，3.0，5.0l，分别置10l量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。2.6.3分别精细汲取以上对照品溶液各10l，注入液相色谱仪进展测定。以对照品进样量为横坐标X，峰面积积分值为纵坐标Y绘制标准曲线，那么回归方程为：大黄素

7、对照品的回归方程：Y=3.724106X5.230103，r=1.0000，大黄酚对照品的回归方程：Y=7.4933103X-54.919，r=0.9999,结果说明大黄素在0.0210.53g范围内时，与大黄素峰面积呈良好的线性关系；大黄酚在0.0190.35g范围内时，与大黄酚峰面积呈良好的线性关系。2.7精细度实验精细汲取供试品溶液批号2022010320l，重复进样5次，按上述色谱条件测定峰面积。大黄素峰面积均值为370461，RSD为0.5%，大黄酚素峰面积均值为353876，RSD为0.3%。2.8重复性实验取同批批号20220103样品5份，按“2.3项下方法制备，进样20l，测

8、定。大黄素平均含量为22.5gg-1，RSD2.2%，大黄酚平均含量为21.7gg-1，RSD2.0%。2.9稳定性实验分别于0，2，4，8，12，24h精细汲取供试品溶液批号2022010320l，按上述色谱条件测定峰面积，大黄素峰面积均值为371802，RSD为0.5%，大黄酚峰面积均值为355220，RSD为0.4%，结果说明大黄素和大黄酚在24h内稳定。2.10回收率实验采取加样回收法。精细称取含量的供试品批号202201036份，参加一定量的大黄素和大黄酚对照品，按“2.3项下方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定。大黄素的平均回收率为100.6%，RSD2.5%；大黄酚的平均回收率为100.1%，RSD1.5%。2.11样品测定取样品，按“2.3项下方法制备供试品溶液，精细量取20l测定，按外标法计算含量，结果见表1。表1妇乐糖浆中大黄素和大黄酚含量测定结果略3讨论将大黄素和大黄酚的对照品溶液分别于200400n扫描其紫外吸收，大黄素在290n有最大吸收，大黄酚在258n有最大吸收，但两者均在258n处有较大吸收，同时参照有关文献1，应选择254n为测定波长。供试品制备时对不