全自动厂家cyfra21非小细胞肺癌相关抗原21-1电化学发光检测试剂盒说明书

1、非小细胞肺癌相关抗原21-1电化学发光检测试剂盒说明书Elecsys CYFRA 21-1Elecsys Systems 1010/2010/MODULARYTICS E100 人份【名称】通用名： 非小细胞肺癌相关抗原21-1电化学发光检测试剂盒英文名： Elecsys CYFRA 21-1汉语拼音：Fei xiao xi bao fei ai xiang gu ce shi ji heang yuan 21-1 dian hua xue fa guang jian【注意事项】【用途】用免疫学方法体外定量测定人或血浆中细胞角蛋白19的含量。电化学发光免疫测定试剂，适用于免疫测定分析仪。Ele

2、csys1010、2010和E170（Elecsys模块）【概述】细胞角蛋白是上皮细胞的结构蛋白质。目前为止已发现20种不同的细胞角蛋白多 肽。由于它们特殊的分布形式，细胞角蛋白现已成为肿瘤病理学研究的划分指标。中检测到1.2.9.10。完整的细胞角蛋白多肽是很难溶的,但是溶解的片断能够在借助于二种特异的单克隆抗体（KS19.1和BM19.21），CYFRA21-1可检测细胞角蛋白19的一个片段(分子量大约30,000)。CYFRA21-1 主要用于监测非小细胞肺癌(NSCLC)的病程2.3。CYFRA21-1 也可用于监测横纹肌浸润性癌的病程4。CYFRA21-1 用于与良性肺部疾病(鉴别，

3、特异性比较好6.7。,结核,慢性支气管炎,支气管哮喘,肺气肿)的在良性的肝病和肾功能衰竭中偶见CYFRA21-1轻微升高（约10ng/ml）。,吸烟没有任何相关性11。怀孕对CYFRA21-1的值也CYFRA21-1的含量与没有任何影响。样本的非小细胞肺癌相关抗原（CYFRA21-1）测定值的高低因采用的检测方法而异。因此的检测应注明非小细胞肺癌相关抗原所采用的检测方法。样本的非小细胞肺癌相关抗原测定值主要取决于采用不同的检测方法,因此两种方法测出的含量不能相互直接比较，以免引起出现错误的医学解释。在疗效观察过程中，如因检测方法改动引起非小细胞肺癌相关抗原的含量变化，用新的检测方法获得的 CY

4、FRA21-1 的测定值必须用原方法同时平定核实。肺癌的最初要以临床的全部症状,影像学检查,内窥镜检查,外科手术结果为基础。肺部有不明的阴影,CYFRA21-130ng/ml提示存在性支气管癌的可能性8。 血中CYFRA21-1水平显著升高提示肿瘤已晚期或预后差12。但CYFRA21-1正常或轻微升高，不能排除肿瘤的存在。治疗效果好，CYFRA21-1的水平会很快下降或恢复到正常水平，如果CYFRA21-1值不变或轻度减低提示肿瘤没有完全去除，或有多发性肿块存在。在疾病的发展过程中，CYFRA21-1值的变化常常早于临床症状和影像检查。8【原理】采抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。 第1步

5、孵育：20l标本、生物素化的抗细胞角蛋白19单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗细胞角蛋白19单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。 第2步孵育：加入链和素的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链和素间的反应结合到微粒上。 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进定。 检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。【试剂主要成份】M：链和素的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。

6、R1：生物素化的抗细胞角蛋白19单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度1.5mg/l，磷酸缓冲液100mmol/l，pH7.2。含防腐剂。R2：Ru(bpy) 32+标记的抗细胞角蛋白19单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml。浓度2mg/l，磷酸缓冲液100mmol/l，pH7.2。含防腐剂。【预防措施和警告】仅用于体外采用使用。试剂所必须的标准预防措施。所有废物的丢弃应遵循当地的要求。【试剂使用】试剂盒中的试剂是一个整体,打开后可立即使用,不能被分开。需要的确切操作信息,分别通过试剂的二维条码。【和稳定性】存放在28 .为了确保使用前自动混匀期间提供足够量的磁性微粒, CYFRA21-1试剂

7、盒倒置。稳定性：,切莫未开封28，可稳定至标明的保质期。开封后，28，放在Elecsys2010或E170上，放在Elecsys1010上，12周；8周；4周（交替在冰箱内和仪器上，室温2025，开瓶使用时间累计约20小时）【标本和准备】标本只有按照下列方法收集,检测,结果才能被接受。标本用标准样本试管。血浆：肝素(Li-,Na-)、K3EDTA或枸橼酸钠抗凝。其中用枸橼酸钠抗凝的血浆，测定结果需+10%。标准:值的批内回收 90-110%或斜率 0.9-1.1+批内干扰0.95.标本在28可稳定7天，-20可稳定6个月。只能冻融一次13.17。建议样本混匀或放置在混旋器上（最多5分钟）。含沉

8、淀的标本使用前需离心。不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠作稳定剂。样本唾液污染会导致测定值假性升高17。确保样本、定标物、质控物在测试前温度达到20-25.因为可能挥发的影响,放在分析仪上的样本、定标物、质控物应在两小时内测试完。【检测步骤】提供的材料：货号：11820966，100人份的Elecsys CYFRA21-1试剂盒包含： M 链和素的微粒R1 生物素化的抗细胞角蛋白19抗体R2 三联吡啶钌标记的抗细胞角蛋白19抗体需要的材料（未提供）：Elecsys CYFRA21-1定标液（CalSet），41ml，货号11820974Elecsys 肿瘤标志物质控品（PreciCont

9、rol Tumor Marker）1和2，每个23ml，货号11776452Elecsys通用稀释液，218ml，货号11732277或Elecsys通用稀释液，240ml，货号03183971 常用设备 Elecsys1010、2010 或E170分析仪Elecsys1010/2010分析仪需要 Elecsys 系统缓冲液（ProCell）,6380ml，货号11662988 Elecsys 测量池液（CleanCell），6380ml，货号11662970 Elecsys 添加剂液（SysWash），1500ml，货号11930346 Elecsys 系统液支架（Adapter for S

10、ysClean），货号11933159 Elecsys 1010反应杯（Assay Cup），1232， 货号11706829或Elecsys 2010反应杯（Assay Cup），6060， 货号11706802 Elecsys 2010吸样头（Assay Tip），30120，货号11706799E170分析仪需要 Elecsys 系统缓冲液（ProCell M）,12L,货号12135019 Elecsys 测量池液（CleanCell M）,12L,货号12135027 Elecsys 系统缓冲液/测量池液预热杯（PC/CC-Cup）,50个,货号03023141 Elecsys液（P

11、robeWash M），1270ml，用于最终和试剂转换，货号03005712 Elecsys 反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M),4884，货号 12102137 Elecsys 废物盒(wasiner)，货号03023150 Elecsys 系统液支架(SysClean Adapter M)，货号03027651各种分析仪均适用的材料 Elecsys 系统液（SysClean），5100ml，货号11298500仅在提供: Elecsys CYFRA21-1 三个浓度的定标检查物 (Calcheck) 货号11776789【方法】按仪

12、器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前自动混匀混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入 15 位数字。按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前自动混匀混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入 15 位数字。Elecsys2010 和 E170：将冷藏试剂预温到 20后放置于仪器的试剂盘上，避免产生试剂温度和开/关试剂瓶盖。Elecsys1010：将冷藏试剂预温到 2025后放置于仪器的样品/试剂盘上

13、（室温 2025），避。仪器自动控制免产生8。使用前手工打开试剂瓶盖，使用后手工关闭试剂瓶盖并放回 2【定标】Elecsys CYFRA21-1 用酶法来标定 13。每批 CYFRA21-1 试剂有一条形码，含有该批试剂定标所需的特殊信息。应用CYFRA21-1CalSet 定标液定标校正母定标曲线。定标频率：每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器即根据下列要求：E170/Elecsys2010：同一批号试剂一个月后（28 天）7 天（放置仪器上的同一试剂盒）Elecsys1010：每一试剂盒做一次 7 天（室温 2025） 3 天（室温 2532）各种分析仪均适用的情况：24 小时以内）标定一次

14、，如再次标定 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时。定标确认:不需要.分析仪的会自动检查定标曲线的有效性有效性及任何偏离。【质控】Elecsys 肿瘤标志物质控品（Precicontrol Tumor Marker）1 和 2 以及其它合适的质控品。各浓度区域的质控至少每 24 小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期用于各的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如果出现质控值落在范围以外，每个个方案采取校正措施。应该有一【计算】对每一个标本，E170,Elecsys1010 和 2010 分析仪会自动计算 CYFRA21-1 含量，单位是 ng/ml 或 ug/l。】13【干扰该方法不受黄疸（

15、胆红素65mg/dl）、溶血（血红蛋白1.5g/dl）、脂血（脂质1500mg/dl）和生物素5mg/天）治疗的后才能采血 13。，至少要等最后一次摄入生物素 8 小时CYFRA21-1 浓度高达 2000ng/ml 也不出现钩状效应。不受类风湿因子干扰（1500U/ml）。28 种常用药物经试验对本测定无干扰。试剂含有鼠单克隆抗体,接受过小鼠单抗治疗或的会出现错误。罕见的例子,由于高浓度的抗链酶亲和素抗体发生干扰。Elecsys CYFRA21-1 含的添加物会有很小的影响。Elecsys CYFRA21-1 测定结果应结合断。病史、临床其他检查结果综合起来进行诊【检测范围】130.1005

16、00ng/ml(由 master 定标曲线的最低检测限与最高检测限决定)。如果测定值低于最低检测限,为0.100ng/ml. 如果测定值高于检测范围,为500ng/ml(结果达到 1000ng/ml 样本应作 50 倍稀释)。【稀释】高于检测范围的标本可用通用稀释液稀释。建议 1:2 稀释(E170,Elecsys1010/2010 既可以自动稀释也可以手工稀释) 。稀释后的标本 CYFRA21-1 含量必须高于 250ng/ml。如用手工稀释，结果应乘上稀释倍数。如果是机器自动稀释，E170，Elecsys1010/2010会自动计算结果。【参考值】13Cutoff 值是 3.3ng/ml

17、时，特异性为 95%。急性肺病,慢性支气管炎,间质性肺疾病样本中的 CYFRA21-1 浓度会明显增高。肝硬化,肾衰必要，各CYFRA21-1 浓度可能也会超出正常参考值范围。应根据自己的群建立一个自己的正常值范围。【性能评估资料】精密度:下面为从Elecsys分析仪上获得的评估资料。不同得出的结果可能会不同。用 Elecsys 试剂、人、质控物根据国际临床试验室标准(National Committeefor Clinical laboratory Sdandards)的修改草案(EP5-A)来检验它的重复性：试验 6次共进行 10 天实验(n=60)。用 E170 检测批内的精密度，n=2

18、1。下面为得到的实验结果:E170批内精密度总精密度样本Medianng/mlSDng/mlCV%Medianng/mSDng/mlCV%人12.600.041.52.650.072.7人25.510.061.25.510.132.3Elecsys1010/2010批内精密度总精密度样本Medianng/mlSDng/mlCV%SDng/mlCV%人12.680.062.10.134.7人26.860.142.00.233.3人321.50.361.70.663.1质控 TM15.040.102.00.122.4质控 TM229.90.491.60.632.1分析灵敏度:(最低检测限)0.10

19、ng/mlCYFRA21-1 最低检测限代表能够区别于零的最低检测分析水平。 它的计算值依赖于最低标准值的两倍标准差。(master 标准物,标准 1+2SD, 批内精密度,n=21)分析特异性:抗角蛋白 19 的单克隆抗体识别角蛋白 19 多肽的一个片段。与角蛋白 8 和 18 没有任何交叉反应。方法比较:临床样本使用电化学发光 CYFRA21-1 检测方法的线性(y)与 CYFRA21-1 酶免检测方法的线性(x)比较.下面为两种线性的相关性：检测的样本量：76Passing/Bablok14-16 y = -0.30 + 0.98xr = 0.99SD (md68) = 0.834线性回

20、归y = -0.10 + 0.95x r = 0.99Sy.x = 1.0871.0 和 44 ng/ml 之间.样本浓度大【包装规格】【有效期】【生产企业】【地址】100人份/盒21个月Roche Diagnostics GmbH,D-68298 Mannheim, Germany【参考文献】1.Bodenmueller H, Ofenloch-Hhn, Lane EB, Dessauer A.g CancerassotedKeratin19Frag-ments:DevelopmentandBiochemicalCharacterization of the new Serum Assay

21、Enzymun-Test CYFRA 21-1. J Biol Markers 1994;9:7581.2.Bodenmueller H. The biochemistry of CYFRA 21-1 and other cytokeratin- tests. Scand J Clin Lab In-vest 1995;55,Suppl 221:6066.Ebert W, Leichtweis B, Schaphler B, Muley T. The new tumormarker CYFRA i perior to SCC Anti-gen and CEA he primary diagno

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23、56.01.102.0质控 TM15.060.112.15.120.132.6质控 TM233.40.531.633.90.651.95.Stieb, Hasholzner U, Bodenmueller H, Nagel D, Sundlassmann L,Dienemann H, et al. CYFRA 21-1: A new marker ing cancer. Cancer 1993;72:707713.Van Dalen A. Quality control and standardization of tumormarker-tests. Tumor Biol. 1993;14:

24、131135.6.7.Ebert W, Dienemann H, Fateh-Moghadam A, Scheulen M, Konietzko N, Schleich T, Bombardiere E. Cytokeratin 19 Fragment CYFRA 21-1 Compared with Carcinoembryonic Antigen, Squamous Cell CarcinomaAntigen and Neuron-Specific Enolase ing Cancer.Results of anernationalMulticentreStudy.EurJClinChem

25、ClinBiochem1994;32(3):189-199.8.Stieber P, Dienemann H, Nagel D, Hasholzner U,Reiedel J,Zimmermann A,et al. Prognostic rel-evance of CYFRA 21-1 ingcancer-a multivariate zZt.im Druck.ysis.ancer Res. Abstract 1996, Publikation9.Stieb, Dienemann H, Hasholzner U, Mueller C, Poley S, Hofmann K,Fateh-Mogh

26、adam. Compari-son of Cytokeratin Fragment 19 (CYFRA 21-1)Tie Polypeptide Antigen (TPA) and Tie Polypep-tide SpecificAntigen (TPS) as Tumor Markers in Biochem 1993;31:689694.g Cancer. Eur J Clin Chem Clin10. Bodenmueller H, Donie F, Kaufmann M, Banauch D. The tumor markers TPA, TPS TPACYK and CYFRA 21-1 react differently with the keratins8,18 and 19.J Biol Markers 1994;9:7074.11. Oremek GM, Seiffert UB, Siekmeier R, Kirsten R. CYFRA 21-1 - ein neuer Tumormarker aus der Zytokeratinreihe in der Differentialdiagnostik vongenerkrungen. Med Klin 1995;90:2326.12. van der