大叶蛇葡萄化学成分研究

1、大叶蛇葡萄化学成分研究【摘要】目的别离和鉴定大叶蛇葡萄的化学成分。方法利用硅胶柱色谱、SephadexLH-20柱色谱等方法进展别离纯化，根据理化性质和波谱数据进展构造鉴定。结果得到7个化合物，分别鉴定为蛇葡萄素()、杨梅素()、花旗松素()、槲皮素()、槲皮素-3-L-鼠李糖苷()、杨梅苷()、-谷甾醇()。结论化合物均为首次从该种植物中别离并鉴定。【关键词】大叶蛇葡萄;化学成分;别离;鉴定大叶蛇葡萄A.egalphyllaDielset.Gilg为葡萄科蛇葡萄属植物,味酸涩,性平,具有清热利湿、活血化瘀的功能，用于治疗高血压并痢疾、泄泻、小便淋痛、头昏目胀等1，在我国主要分布于湖北、陕西、

2、甘肃、福建、四川、贵州、云南等地2。目前，国内外关于该种植物的研究较少3。为了更好地开发大叶蛇葡萄这味传统药材，本课题组前期已进展了一系列的研究工作，包括生药学研究4、抗高血压有效部位挑选实验研究5及HPL指纹图谱研究6。笔者对湖北恩施采集的大叶蛇葡萄进展了化学成分研究，利用硅胶柱色谱、SephadexLH-20柱色谱等方法进展别离纯化，得到7个化合物，通过理化性质和波谱数据鉴定了它们的构造。化合物均为首次从该植物中分得。1仪器与材料VarianINVA-600型核磁共振仪(内标为TS，美国Varian公司)，Finnigan-TRAES型质谱仪，可见-紫外分光分光光度仪(SHIADZU，UV

3、-2401)，显微熔点测定仪(北京西城光学仪器厂)。SephadexLH-20(美国Pharaia公司)，硅胶柱用硅胶(100200目，试剂级，青岛海洋化工)。实验所用试剂均为分析纯，水为重蒸水。大叶蛇葡萄采于湖北省恩施地区，经湖北中医学院生药学教研室张秀桥副教授鉴定为葡萄科蛇葡萄属植物大叶蛇葡萄A.egalphyllaDielset.Gilg，取其茎叶为实验材料。2方法与结果2.1提取与别离将8.5kg大叶蛇葡萄药材粉碎后，分别以10倍量95%，75%乙醇渗漉提取1次(浸泡24h，流速10l/in)，合并提取液，减压回收乙醇并浓缩至小体积(5.5L)。将浸膏加适量水分散，依次用石油醚、醋酸乙

4、酯萃龋取醋酸乙酯萃取部位干浸膏200g拌样后上正相硅胶柱，以石油醚-丙酮梯度洗脱，得到各组分再反复经硅胶柱色谱、制备薄层色谱、SephadexLH-20柱色谱得到化合物(55g)，(19g)，(20g)，(5g)，(7g)，(50g)，(10g)。2.2构造鉴定2.2.1化合物无色针状结晶，p：244245。盐酸-镁粉反响和三氯化铁反响均为阳性，lish试验为阴性。FAB-S/z(%)：321(+1,12)、304(3)、277(13)、241(3)、186(7)、185(100)、167(4)、149(4)。1H-NR(D3D3，600Hz)：4.56(1H，d，J=11.4Hz，H-3)，

5、4.94(1H,d,J=11.4Hz,H-2)，5.98(1H,d,1.8Hz,H-8)，5.94(1H,d,1.8Hz,H-6)，6.62(2H,s,H-2,6)，11.72(1H,s,5-H)。13-NR(D3D3,150Hz)：198.0(-4)，167.8(-7)，164.9(-9)，164.0(-5)，146.2(-3、-5)，134.1(-4)，128.9(-1)，107.9(-2、-6)，101.4(-10)，96.9(-6)，95.9(-8)，84.6(-2)，73.1(-3)。以上理化常数和波谱数据与文献7报道一致，确定化合物为蛇葡萄素(apelpsin)。2.2.2化合物黄

6、色针状结晶，p：324325。盐酸-镁粉反响和三氯化铁反响均为阳性，lish试验为阴性。S/z(%)：320(+2)、319(+1)、318(+,100)、317(+-1,10)、303、302、301、290(6)、289(+-H,9)、286、273(3)、245(5)、216(+-8H6,2)、153(-8H64-H,3)、136(1)、108(2)、51(2)。1H-NR(D3D3,600Hz)：7.42(2H,s,H-2,6)，6.51(1H,d,J=1.8Hz,H-8)，6.26(1H,d,J=1.8Hz,H-6)，12.16(1H,s,5-H)。以上理化常数和波谱数据与文献8报道

7、一致，确定化合物为杨梅素(yrietin)。2.2.3化合物白色针状结晶，p：220221。盐酸-镁粉反响和三氯化铁反响均为阳性，lish试验为阴性。1H-NR(D3D3，600Hz)：4.60(1H,d,J=11.4Hz,H-3)，5.02(1H,d,J=11.4Hz,H-2)，5.94(1H,d,1.2Hz,H-6)，5.98(1H,d,1.2Hz,H-8)，6.86(1H,d,8.4Hz,H-5)，6.91(1H,dd,J=8.4Hz,1.8Hz,H-6)，7.06(1H，d，J=1.8Hz，H-2)。13-NR(D3D3,150Hz)：198.1(-4)，167.7(-7)，164.9

8、(-5)，164.1(-9)，146.4(-4)，145.6(-3)，129.7(-1)，120.7(-6)，115.7(-2)，115.6(-5)，101.4(-10)，96.9(-6)，95.9(-8)，84.4(-2)，73.0(-3)。以上理化常数和波谱数据与文献9报道一致，确定化合物为花旗松素(Taxiflin)。2.2.4化合物淡黄色粉末，p：308310。盐酸-镁粉反响和三氯化铁反响均为阳性，lish试验为阴性。1H-NR(D3D3,600Hz)：6.26(1H,d,J=1.8Hz,H-6)，6.52(1H,d,J=1.8Hz,H-8),6.99(1H,d,J=8.4Hz,H-5

9、),7.69(1H,dd,J1=8.4Hz,1.8Hz,H-6),7.82(1H,d,J=1.8Hz,H-2)，12.17(1H,s,5-H)。13-NR(D3D3,150Hz)：176.4(-4)，164.9(-7)，162.3(-9)，157.7(-5)，148.2(-3)，146.9(-2)，145.7(-4)，136.7(-1)，123.7(-3)，121.4(-6)，116.1(-2)，115.6(-5)，104.0(-10)，99.0(-6)，94.4(-8)。以上理化常数和波谱数据与文献10报道一致，确定化合物为槲皮素(Queretin)。转贴于论文联盟.ll.2.2.5化合物黄

10、色粉末，p：176179。盐酸-镁粉反响和三氯化铁反响均为阳性。lish反响显阳性，化合物经酸水解后，与标准糖进展薄层层析，鉴定为-L-鼠李糖。ESI-S在/z447处可见-H+离子峰，说明该化合物的分子量为448。1H-NR(D3D3,600Hz)：7.49(1H,d,J=1.8Hz,H-2)，6.99(1H,d,J=8.4Hz,H-5)，7.39(1H,dd,J1=8.4,J2=1.8Hz，H-6)，6.47(1H,d,J=2.0Hz,H-8)，6.26(1H,d,J=2.0Hz,H-6)，12.73(1H,s,5-H)，5.51(1H,d,J=1.8Hz,Rha-H-1)，3.324.2

11、1(4H,Rha-H-2Rha-H-5)，0.91(3H,d,J=6.0Hz,Rha-H-6)。13-NR(D3D3,150Hz)：164.9(-7)，163.0(-5)，158.3(-2)，157.9(-9)，148.9(-4)，145.8(-3)，135.8(-3)，122.8(-1)，122.5(-6)，116.6(-2)，116.0(-5)，105.7(-10)，99.4(-6)，94.4(-8)，102.7(Rha-1)、72.9(Rha-4)、72.0(Rha-3)、71.4(Rha-2)、71.2(Rha-5)、17.7(Rha-6)。由HQ谱和HB谱可以得到每个和其直接相关及远

12、程相关的H的信息，能准确的归属每个、H信号。由HQ谱得到了2、6、5、6、8和鼠李糖端基的、H信号。由HB谱可以判断出糖的连接位置是135.8(-3)，同时也验证了各取代基团的位置。根据以上理化常数和波谱数据，确定化合物为槲皮素-3-L-鼠李糖苷(Quereetin-3-L-rhanside)。2.2.6化合物浅黄色粉末状结晶，p：177178。盐酸-镁粉反响和三氯化铁反响均为阳性。lish反响显阳性，化合物经酸水解后，得到沉淀和水液两局部，沉淀经TL鉴定为杨梅素，水液局部经TL鉴定为鼠李糖。以上信息提示糖基可能连在-3位上。S/z(%)：320(5)、319(19)、318(+-6H104，

13、100)、302(69)、286(5)、261(3)、245(6)、229(3)、153(-6H104-8H64-H，10)、128(4)、85(17)、57(3)。1H-NR(D3D,600Hz)：6.94(2H,s,H-2,6)，6.19(1H,d,J=1.8Hz,H-6)，6.35(1H,d,J=1.8Hz,H-8)，5.31(1H,d,J=1.8Hz,Rha-H-1),3.304.21(4H,Rha-H-2Rha-H-5),0.96(3H,d,J=6.0Hz,Rha-H-6)。以上理化常数和波谱数据与文献7报道的杨梅苷相符合，确定该化合物为杨梅苷(yrietrin)。2.2.7化合物无

14、色针晶，p：137138。IR(KBr)-1：3429、1059(-H)、2936、1463、1379;1H-NR(DI3,600Hz)：5.348(1H,s,-H)、5.057(1H,H-6)、3.529(1H,H-3)。与对照品-谷甾醇共薄层，经石油醚-丙酮(体积比5:1)、石油醚-醋酸乙酯(体积比41)、环己烷-丙酮(体积比41)3种溶剂系统展开，Rf值均一致，且与-谷甾醇对照品混合熔点不下降，故鉴定化合物为-谷甾醇。3讨论本课题组在进展大叶蛇葡萄化学成分后续研究，以期能挑选得到专属性或特征性有效成分，为该药材的品质评价和新药开发提供科学根据。【参考文献】1中国药材公司.中国中药资源志要.北京:科学出版社，1994：722.2湖北省卫生局.湖北中草药志，第2册.武汉:湖北人民出版社，1982：1078.3沈伟，陈树和，张秀桥，等.蛇葡萄属药用植物研究概况J.湖北中医杂志,2022,28(9):55.4张秀桥，程莲银，张琦，等.霉茶的性状和显微特征J.中药材，2022，27(5):330.5孙晓杰，沈伟,张秀桥，等.大叶蛇葡萄抗高血压有效部位挑选实验研究J.齐鲁药事,2022,27(12):747.6沈伟，陈树和，张秀桥，等.大叶蛇葡萄有效部位HPL指纹图谱研究J.时珍国