高效液相色谱法测定仔花感冒胶囊中对乙酰氨基酚的含量

1、高效液相色谱法测定仔花感冒胶囊中对乙酰氨基酚的含量【摘要】目的建立仔花感冒胶囊中对乙酰氨基酚含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,以krasil-18柱为固定相,甲醇-水(3565)为流动相,检测波长为249n。结果对乙酰氨基酚在0.1650.99g(r0.9999)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.41%,rsd0.64%(n6)。结论含量测定方法准确可靠,重复性好,可用于控制仔花感冒胶囊的质量。【关键词】仔花感冒胶囊；对乙酰氨基酚；高效液相色谱法keyrds：zihuaganaapsule；paraetal；hpl仔花感冒胶囊由狗仔花、柴胡、藁本、防风、黄芩以及马来酸氯苯那敏、

2、对乙酰氨基酚等制成,具有清热解毒、祛风止痛的成效,用于风热感冒所见发烧头痛、肢体不适。对乙酰氨基酚为其中的主要西药成分之一,原质量标准中用紫外分光光度法1测定对乙酰氨基酚的含量,重现性差、阴性干扰严重、误差较大。为了更好地控制该药的质量,笔者采用高效液相色谱法测定对乙酰氨基酚的含量,方法简便、结果准确、重复性好,可以较好地控制该产品的质量。1仪器与试药高效液相色谱仪：日本岛津l-10ad泵,spd-10av紫外检测器,-r7ae数据处理机；超声波清洗器必能信超声(上海)。对乙酰氨基酚(中国药品生物制品检定所提供,批号10018-202208,供含量测定用)；仔花感冒胶囊(广西玉林制药有限责任公

3、司提供,批号635002、635003、635004、735001、735002)。甲醇为色谱纯,其他为分析纯、水为去离子水。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：krasil-18(4.6250,5)；流动相：甲醇-水(3565),流速：0.5l/in,柱温：30,检测波长：249n,进样量10l。2.2对照品溶液的制备精细称取在105枯燥至恒重的对乙酰氨基酚适量,加甲醇制成每1l含50g的溶液,即得。2.3供试品溶液的制备取本品20粒的内容物,精细称定,研细,混匀,取约0.3g,精细称定。加甲醇35l,超声处理(功率500,频率50khz)20in,放冷,滤过,滤液置50l量瓶中,用少量甲醇分

4、次洗涤容器和残渣,洗液滤入同一量瓶中,用甲醇稀释至刻度,摇匀。精细量取1l置50l量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得供试品溶液。2.4线性关系考察精细称取在105枯燥至恒重的对乙酰氨基酚适量,加甲醇制成每1l含0.165g的溶液作为对照品溶液。精细汲取对照品溶液1、2、3、4、5、6l,分别置10l量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,各精细汲取10l,分别注入液相色谱仪,依本法测定。以测得峰面积为纵坐标,对照品进样量(g)为横坐标,绘制标准曲线,求得线性回归方程：y3450864x9698,r0.9999(n6),说明对乙酰氨基酚进样量在0.1650.99g范围内呈良好的线性关系。2.5精细度试验取同一

5、份供试品溶液,依本法,按上述色谱条件测定,精细汲取10l,注入液相色谱仪,重复进样6次,对乙酰氨基酚峰面积的rsd0.55%,结果说明仪器精细度良好。2.6稳定性试验汲取供试品溶液10l,于0、1、4、8、12、24h,分别注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定,结果对乙酰氨基酚峰面积rsd1.6%,说明供试品溶液在24h内稳定。2.7重复性试验取同一批号(批号635003)的仔花感冒胶囊样品5份,按供试品溶液制备项下操作,制备5份供试品溶液,按上述色谱条件测定,分别汲取10l注入液相色谱仪,测得对乙酰氨基酚的平均含量为0.3068g/g(n5,rsd1.50%)。2.8加样回收率试验精细称取含量

6、的仔花感冒胶囊(对乙酰氨基酚含量为0.3215g/g)6份,分别准确参加对乙酰氨基酚对照品溶液(98.5g/l)各1l,按供试品溶液制备项下操作,制备6份供试品溶液,按上述色谱条件测定,分别汲取10l注入液相色谱仪。结果见表1。表1加样回收率试验结果略2.9样品测定精细汲取对照品溶液和供试品溶液各10l,注入液相色谱仪,测定,记录峰面积,根据对照品峰面积,计算出样品溶液中对乙酰氨基酚的含量(见表2)。表2样品测定结果(略)2.10专属性考察对乙酰氨基酚对照品和仔花感冒胶囊在一样保存时间处有吸收峰,而阴性样品在此处无吸收峰。色谱图见图1。3讨论由于仔花感冒胶囊样品中对乙酰氨基酚含量较大,为了尽量

7、减少误差,进步方法的准确性,通过紫外扫描,对乙酰氨基酚在249n有处最大吸收,应选择249n为检测波长。根据文献报道,曾用过流动相、检测波长：甲醇-水(1585),冰醋酸调ph至4.5,波长243n2；以甲醇-0.025lkh2p4(1585)用磷酸调节至ph3.0,检测波长为295n3,结果以本试验所用的流动相较佳,对乙酰氨基酚保存时间约为7.6in,整个分析时间10in。在提取条件的选定过程中,我们曾采用过索氏提取法、热回流法、超声提取法,结果三者之间提取出的对乙酰氨基酚含量没有显著差异,但由于索氏提取法和热回流法费时间较长,不利于消费过程的控制,超声20in提取所测定的对乙酰氨基酚含量最高。因此,选择了比拟简便、且效率较高的超声提取法。【参考文献】1广西壮族自治区卫生厅.广西药品标准s.1988.2