微生物学 知识点

1、微生物学复习题一、名词解释微生物一类个体微小，结构简单，必须借助显微镜才能看见，单细胞，简单多细胞，甚至无细胞结构的低等微生物通称病原微生物指可以侵入人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体。性菌毛又称性毛，性丝，是一种长在细菌体表的纤细，中空，长直的蛋白质类附属物，比菌毛长，且每一个细胞仅一至少数几根。菌落是由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。质粒凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dDNA分子6、荚膜某些细菌表面的特殊结构，是位于细胞壁表面的一层松散的粘液物质。芽孢某些细菌在其生长发育后期，一

2、定条件下，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量极低，抗逆性极强的休眠构造。菌毛又称纤毛，伞毛，线毛或须毛，是一种长在细菌体表的纤细，中空，短直且数量较多的蛋白质类附属物。细菌生长曲线定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的试验曲线。酵母菌一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌的通俗名称。病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非单细胞生物”，其本质是一类含DNA或RNA的特殊遗传因子。12、培养基是指由人工配置的，含有六大营养要素，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。消毒采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动植物有害的病原菌，而对被消毒对象基本无

3、害的措施。灭菌采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。无菌操作用于防止微生物进入人体或其他无菌范围的操作技术。自发突变是指物体在无人干预下自然发生的低频率突变。诱变即诱发突变，是指通过人为的方法，利用物理，化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。变异指生物体在某种外因或内因的作用下引起的遗传物质结构或数量的改变，亦遗传型的改变。营养缺陷型指微生物等不能在无机盐类和碳源组成的基本培养基中增殖，必须补充一种或一种以上的营养物质才能生长。抗体是高等动物体在抗原物质的刺激下，由浆细胞产生的一类能与相应抗原在体内发生特异结合的免疫球蛋白。传染又称感染或侵染，指外

4、源或内源性病原体在突破其宿主的三道防线（机械屏障，非特异性免疫和特异性免疫）后，在宿主的特定部位定居，生长，繁殖，产生特殊酶和毒素，进而引起一系列病理，生理性反应的过程。人畜共患病即人和脊椎动物由同一种病原体引起的，在流行病学上密切相关的一类传染病。毒力又称致病力，表示病原体致病能力的强弱。抗原是一类能诱导机体发生免疫应答并能与相应抗体或T淋巴细胞受体发生特异性反应的大分子物质。细胞因子曾称淋巴因子，是一类存在于人和高等动物体中的，由白细胞和其他细胞合成的异源性蛋白或糖蛋白，一般以小分子分泌物形式释放，可结合在靶细胞的特异受体上。免疫应答是指一类发生在活生物体内的特异性免疫的系列反应过程。这是

5、一个从抗原的刺激开始，经过抗原特异性淋巴细胞对抗原的识别，使淋巴细胞发生活化，增殖，分化等一系列变化，最终表现出相应的体液免疫或细胞免疫效应。干扰素是高等动物细胞在病毒或dsRNA等干扰素诱生剂的刺激下，所产生的一种具有高活性,广谱抗病毒等功能的特异性糖蛋白，相对分子质量很小。菌株又称品系，表示同种微生物不同来源的纯种培养，从自然界种分离得到的每一个微生物纯培养都可称一个菌株。隐蔽期在病毒感染细胞之后的一个短时间内，病毒完全消失，甚至在细胞内也找不到感染性的病毒颗粒，直至感染数小时后子代病毒出现为止，此阶段称为隐蔽期。拟病毒是指一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒。类病毒一类只含RNA一种成分

6、、专性寄生在活细胞内的分子病原体。卫星病毒是一类基因组缺损、必须依赖某形态较大的专一辅助病毒才能复制和表达的小型伴生病毒。互生两种可单独生活的生物，在它们在一起时，通过各自的代谢活动而有利于对方，或偏利于一方的相互关系共生两种生物共居在一起，相互分工合作、相依为命，甚至形成独特结构、达到难分难解合二为一的极其紧密的相互关系寄生一般指一种小型生物生活在另一种较大型生物的体内（包括细胞内）或体表，从中夺取营养并进行生长繁殖，同时使后者受损害甚至被杀死的一种相互关系。卡介苗一种历史悠久、由牛型结核分枝杆菌制成、预防肺结核病的优良减毒活菌苗核酸疫苗指一种用编码抗原的基因制成的疫苗。单克隆抗体由单一B细

7、胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体伯杰氏手册是一本细菌（包括放线菌）鉴定方面的权威性手册，由美国微生物学会组织的一个委员会主编，世界各国的有关专家共同用英文编写而成。二、问答题1、微生物的种类有哪些？试举例说明属于原核类的细菌（真细菌和古生菌），放线菌，蓝细菌，支原体，立克次氏体和衣原体属于真核类的真菌（酵母菌，霉菌和蕈菌），原生动物和显微藻类属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒，拟病毒。2、微生物学的先驱有那些？他们的主要成绩是什么？初创期：列文虎克。自制单式显微镜，观察到细菌等微生物的个体，并出于个人爱好对一些微生物进行了形态描述。奠基期：微生学奠基人巴斯德和细菌学奠基人科赫

8、。自此微生物学开始建立，并创立了一整套独特的微生物学基本研究方法，开始运用“实践-理论-实践”的思想方法开展研究；建立了许多应用性分支学科；进入寻找人类和动物病原菌的黄金时期。发展期：EBuchner。发现了青霉素等。成熟期：JWatson。把传统工业发酵提高到发酵工程新水平3、微生物的特点有哪些？体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快适应强，易变异；分布广,种类多。4、原核微生物细胞与真核微生物细胞的区别？比较项目真核生物原核生物细胞大小较大（通称直径2um）较小（通常直径2um）若有壁，其主要成分纤维素，几丁质等多数为肽聚糖细胞膜中甾醇有无（仅支原体例外）细胞膜含呼吸或光合成分无有

9、细胞器有无鞭毛结构如有，则粗而复杂如有，则细简单线粒体，溶酶体有无叶绿体光合自养生物中有无真液泡有些有无高尔基体，微管系统，流动性有无核糖体80S（指细胞质核糖体）70S间体无部分有贮藏物淀粉，糖原等PHB等核膜有无DNA含量低（约5%）高（约10%）组蛋白有无核仁有无染色体数一般1一般为1有丝分裂有无减数分裂有无5、细菌的基本结构和特殊结构有哪些，有何作用？基本结构：细胞壁（固定细胞外形和保护细胞不受损伤等多种生理功能），细胞膜（选择性控制细胞内，外营养物质和代谢产物的运送；是维持细胞内正常渗透压的结构屏障；是合成细胞壁和糖被有关成分；膜上含有与氧化磷酸化或光和磷酸化等能量相关的酶系，可使膜

10、的内外两侧间形成一电位差，此即质子动势，故是细胞的产能基地；是鞭毛基体着生的部位，并可提供鞭毛旋转运动所需要的能量。）内含物，细胞质，包含物（主要成分为核糖体，贮藏物，酶类，中间代谢物，质粒，各种营养物质等，都具有特定的功能）。核区（是细菌等原核生物负载遗传信息的主要物质基础），间体，特殊结构：鞭毛（有利于细菌的运动）菌毛（使菌体附着于物体表面）性菌毛（常见于革兰氏阴性菌的雄性菌株中，具有向雌性菌株传递遗传物质的作用）。芽孢：有利于提高菌种的筛选效率，有利于菌种的长期保存，有利于对各种消毒，杀菌措施优劣的判断。微荚膜，荚膜，黏液层：三者组成糖被，具有保护作用，其上大量极性基团可保护菌体免受干旱

11、损伤；可防止噬菌体的吸附和裂解，一些动物致病菌的荚膜还可保护它们免受宿主白细胞的吞噬；贮藏养料，以备营养缺乏时重新利用；作为透性屏障和离子交换系统，以保护菌体免受重金属离子的毒害；表面附着作用。6、细菌革兰氏染色的步骤是什么？简叙为紫，碘，酒，红四步草酸铵结晶紫染色1-2分钟（初染），水洗革兰氏碘液染1-3分钟（媒染剂媒染），水洗酒精脱色30秒左右（脱色剂），水洗稀释的石炭酸复红30s-lmin（复染），水洗，干燥，镜检。7、细菌革兰氏染色的机制是什么？革兰氏阳性菌：细胞壁肽聚糖层厚，交联而成的肽聚糖网状结构致密，经乙醇处理发生脱水作用，使孔径缩小，通透性降低，结晶紫与碘形成的大分子复合物保留

12、在细胞内而不被脱色，结果使细胞呈紫色。革兰氏阴性菌：细胞壁肽聚糖层薄，网状结构交联少，类脂含量较高，经乙醇处理后，类脂被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁，因而细菌细胞壁被脱色，再经石炭酸复红复染后细胞呈红色。8、芽抱的耐热机制是什么？渗透调节皮层膨胀学说认为:芽抱的耐热性在于芽抱衣对多价阳离子和水分的透性很差以及皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽抱核心中的水分，其结果造成皮层的充分膨胀和核心的高度失水，正是这种失水的核心才赋予了芽抱极强的耐热性。另一种学说则认为，芽抱皮层中含有营养细胞所没有的DPA-Ca，它能稳定芽抱中的生物大分子，从而增

13、强了芽抱的耐热性。9、酵母菌的特点及繁殖方式分别是什么？特点：个体一般以单细胞非菌丝状态存在。多数营出芽繁殖。能发酵糖类产能。细胞壁常含甘露聚糖。常生活在含糖量较高，酸度较大的水生环境中。繁殖方式：分为有性生殖和无性生殖。其中无性生殖分为芽殖（各属酵母菌都存在），裂殖（在裂殖酵母菌中存在），产无性抱子（节抱子，掷抱子,）厚垣抱子）；有性生殖（产子囊抱子）10、霉菌菌丝体的特化形态有哪些？营养菌丝体的特化形态：假根、匍匐菌丝、吸器、附着胞、附着枝、菌核、菌索、菌环和菌网。气生菌丝体的特化形态：分生抱子头、抱子囊、担子。分生抱子器、分生抱子座、闭囊壳、子囊壳、子囊盘11、一个完整的病毒粒子由哪些结

14、构组成？请用图形简单描绘并指出其结构病毒粒的基本成分是核酸和蛋白质。核酸位于它的中心，蛋白质包围在核心周围，形成衣壳。核心和衣壳合称核衣壳，核衣壳外还被一层含蛋白质或糖蛋白的类脂双层膜覆盖着，这层膜称为包膜。12、病毒的基本特征有哪些?形体极其微小，一般都能够通过细菌过滤器，故必须在电镜下才能观察；没有细胞构造，其主要成分为核酸和蛋白质两种，故又称“分子生物”每一种病毒只含一种核酸，不是DNA就是RNA；既无产能酶系，也无蛋白质和核酸合成酶系，只能利用宿主活细胞内现成代谢系统合成自身的核酸和蛋白质成分；以核酸和蛋白质等“元件”的装配实现大量繁殖；在离体条件下，能以无生命的生物大分子状态存在，并

15、可长期保持其侵染活力；对一般抗生素不敏感，但对干扰素敏感；有些病毒的核酸还能整合到宿主的基因组中，并诱发潜伏性感染。13、试述病毒化学组成、结构及功能。病毒的主要化学组成为蛋白质。分为结构蛋白和非结构蛋白。结构蛋白由病毒的基因组编码，组成病毒体的蛋白成分，如病毒体的衣壳蛋白，基质蛋白和包膜蛋白。非结构蛋白由病毒的基因组编码，但不参与病毒体构成的蛋白成分。可存在于病毒体内，如病毒的酶，也可存在于感染细胞。功能：保护病毒核酸，避免环境中的核酸酶和其他理化因素对病毒核酸的破坏；参与病毒的感染过程，衣壳蛋白和包膜上的蛋白突起能吸附至易感染细胞受体，引起感染；具有抗原性，病毒基因编码的衣壳蛋白和包膜蛋白

16、具有良好的抗原性，能刺激机体产生免疫反应。14、病毒粒子的对称体制有哪几种？分别举例、对称体质：螺旋对称和二十面体对称（等轴对称），少数为复合对称螺旋对称的有：烟草花叶病毒、狂犬病毒等二十面体对称的有：脊髓灰质炎病毒、腺病毒、孢疹病毒等15、病毒粒子的一步生长曲线是怎样的？定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线称作一步生长曲线。分为潜伏期、裂解期和平稳期。潜伏期潜伏期指噬菌体的核酸侵入宿主细胞以后至第一个成熟噬菌体粒子装配前的一段时间。它又可以分为两个阶段：1、隐晦期：噬菌体在吸附和侵入寄主后，细胞内只出现噬菌体的核酸和蛋白质，还没有释放出噬菌体。在此期间如人为地用氯仿裂解解宿主细胞，此裂解液仍

17、无侵染性。也就是说，这时细胞正处于复制噬菌体核酸和合成蛋白质衣壳的阶段；2、胞内累积期：即潜伏期的后期，指在隐晦期后，若人为地裂解细胞，其裂解液已呈现侵染性的一段时间，这意味着细胞内已经开始装配噬菌体粒子，此时电镜可以观察到。裂解期紧接在潜伏期后的宿主细胞迅速裂解、溶液中噬菌体粒子急速增加的一个阶段。噬菌体或者其它病毒粒因只有个体装配而不能存在个体生长，再加上若宿主细胞裂解的突发性，因此，从理论上来说，其裂解是瞬间出现的。但是事实上因为宿主群体中各个细胞的裂解不可能是同步的，故出现较长的裂解期。平稳期指感染后的宿主细胞已经全部裂解，溶液中噬菌体的数目达到最高峰，在这个时期，每一个宿主细胞释放的

18、平均噬菌体粒子数即为裂解量。16、病毒常用的增殖培养方法有哪些？动物接种，鸡胚培养，组织培养和细胞培养。17、病毒的复制周期包括哪些步骤？从病毒进入宿主细胞开始，经过基因组复制释放出来，为一个复制周期。分四个步骤：吸附和穿入。脱壳。生物合成。18、微生物生长繁殖所需要的六大营养要素分别是什么？碳源，氮源，能源，生长因子，无机盐和水。19、制备培养基时所要遵循的原则和要求是什么？培养基须有适合微生物生长的营养物质；配制的培养基须有适合的酸碱度；配制培养基时盛装培养基的容器应该没有抑制细菌生长的有害物质；所制备的培养基应该是透明的或半透明；制备的培养基不得含有任何活的细菌。20、细菌群体生长繁殖分

19、几个时期？各个时期有何特点？细菌生长繁殖分为延滞期，指数期，稳定期和衰亡期。延滞期的主要特点有：生长速率常数为零；细胞形态变大或增长，许多杆菌长成丝状；细胞内的RNA含量增高，原生质呈嗜碱性；合成代谢十分活跃，核糖体，酶类和ATP的合成加速，易产生各种诱导酶；对外界不良条件如NaCl溶液浓度，温度和抗生素等理化因素反应敏感。指数期的特点有：生长速率R最大，因而细胞每分裂一次所需的时间-代时或原生质增加一倍所需的倍增时间最短；细胞进行平衡生长，故菌体各部分的成分十分均匀；酶系活跃，代谢旺盛。稳定期的特点是生长速率常数速率R等于零，即处于新繁殖的细胞数与衰亡的细胞数相等，或正生长与负生长相等的动态

20、平衡中。衰亡期的特点是微生物的个体死亡速度超过新生速度，整个群体呈现负生长状态。这时细胞形态发生多形化，如会发生膨大或不规则的退化形态；有的微生物因蛋白水解酶活力的增强而发生自溶；有的微生物在这期会进一步合成或释放对人类有益的抗生素等次生代谢物；而在芽孢杆菌中，往往在此期释放芽孢。21、营养物质进入微生物细胞的四种主要方式是什么？特点？四种主要方式是：单纯扩散，促进扩散，主动运送，基团移位。单纯扩散：由高浓度到低浓度，不需载体不耗能。促进扩散：高浓度到低浓度，需载体不耗能。主动运送：低浓度到高浓度，需载体耗能，运送前后溶质分子不变。基团移位：低浓度到高浓度，需载体耗能，运送前后溶质分子改变。2

21、2、培养基是如何分类的？分别从培养基的成分、物理状态和功能进行阐述。按对了解培养基成分的了解作分类，可将培养基分为天然培养基，组合培养基和半组合培养基。按培养基外观的物理状态作分类，可将培养基分为液体培养基，固体培养基（又分为固化培养基，非可逆性固化培养基，天然固态培养基和滤膜），半固体培养基和脱水培养基。按培养基对微生物的功能作分类，可将培养基分为选择性培养基和鉴别培养基。23、简单描述一下稀释涂布平板计数法是怎样对一份样本进行活菌计数的。如果有一个稀释度的平均菌落数符合30300这个范围，则以该稀释度平均菌落数除以涂布平板所用稀释液体体积（0.1ml）,乘以稀释倍数作为该样品的细菌总数。如

22、果有两个稀释度的平均菌落数符合要求，则按照两者菌落总数之比来决定，如果小于2，取平均值；如果大于2，取较小的菌落总数。24、高温灭菌的种类与方法，重点描述高压蒸汽灭菌法的灭菌步骤及应用对象。高温灭菌的种类为干热灭菌法（火焰灼烧法），湿热灭菌法分为常压（巴氏消毒法，煮沸消毒法），加压下（常规加压灭菌法，连续加压灭菌法）。高压蒸汽灭菌法，又叫加压蒸汽灭菌法。是一种利用高温进行湿热灭菌的方法，其原理是：将待灭菌的物件放置在盛有适量水的专用加压灭菌锅内，盖上锅盖，并打开排气阀，通过加热煮沸，让蒸汽驱尽锅内原有的空气，然后关闭锅盖上的阀门，再继续加热，使锅内蒸气压逐渐上升，随之温度也相应上升至100度以

23、上，为达到良好的灭菌效果，一般要求温度达到121度，时间维持15-20min。此法适合于一切微生物学实验室，医疗保健机构或发酵工厂中对培养基及多种器材或物料的灭菌。25、紫外线消毒的特点是什么？效率高，一般在一到二秒即可达到99%-99.9%的杀菌率；广谱性高，对几乎所有的细菌和病毒都能高效率杀灭；无二次污染，较为清洁便利。26、为什么湿热灭菌效果要好于干热灭菌？1、利用沸水或水蒸汽消毒灭菌，水分容易穿透物品，热传导快，能迅速提高物品内部的温度。2、蛋白质凝固是高温杀菌的主要环节，湿热灭菌时蛋白质易于吸收水分，凝固变性。3、蒸汽与物品接触凝结成水，放出潜热，提高温度，加速微生物的死亡。27、试

24、举例说明几种常见的消毒剂，分别介绍其作用机制和应用范围。碘酊（碘酒）：2%对伤口、皮肤消毒最理想。乙醇：对繁殖体细菌细胞，特别是结核杆菌有效，但不能杀死芽胞。过氧化氢：双氧水，3%浓度用于消毒伤口。高锰酸钾：强氧化剂，用于皮肤、口腔和水果蔬菜消毒，常用浓度为0.1%3%。有机物存在影响它的杀菌效力，浓度过高时对皮肤有刺激性。28、基因自发突变的特点？自发性一一指可自发地产生各种遗传性状的突变；不对应性指突变性状与引起该突变的原因间无直接对应关系；稀有性通常自发突变的概率在10-6到10-9之间；独立性某基因的突变率不受他种基因突变率的影响；可诱变性自发突变的频率可因诱变剂的影响而大为提高；稳定

25、性一一发生基因突变后产生的新遗传性状是稳定的，可遗传的；可逆性野生菌株的某一性状既可发生正向突变，也可发生相反的回复突变。29、基因重组的主要步骤是什么？常用哪种技术手段扩增外源基因？其原理？目的基因的的取得；优良载体的选择；目的基因与载体DNA的体外重组；重组载体导入受体细胞；重组受体细胞的筛选和鉴定；工程菌或工程细胞的大规模培养。扩增外源基因的途径：从适当的供体生物包括微生物，动物或植物中提取；通过逆转录酶的作用，由mRNA合成cDNA;由化学合成方法合成有特定功能的目的基因。30、常用的菌种保藏方法有哪些？常用：冷冻干燥保藏法液氮超低温保藏法31、试述内毒素与外毒素的区别。比较项目夕卜毒素内毒素产生菌革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌化学成分蛋白质脂多糖释放时间活菌随时分泌死菌溶解后释放致病类型不冋外毒素不冋不同病原菌的内毒素作用基本相同抗原性完全抗原，抗原性强不完全抗原，抗原性弱或无毒性强弱引起宿主发烧不明显明显制成类毒素能不能热稳定性60-100度半小时即破坏耐热性强存在状态细胞外，游离态结合在细胞壁上举例白喉毒素，破伤风毒素，肉毒士士毒糸沙门氏菌