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文档简介
1、赤霉素对- 淀粉酶的诱导作用实验前对下列物品灭菌干净培养皿20个(按10组计,每组同学2个培养皿,一个实验组,一个对照组)用报纸包好;蒸馏水2瓶(250ml大三角瓶,每瓶盛有150mL蒸馏水),用锡箔纸或报纸封口;大三角瓶2个,分别装有100mL蒸馏水和100mL 200ppm的赤霉素溶液(20mg赤霉素溶于少量酒精中,再溶于100ml蒸馏水),且瓶内浸有d1cm的滤纸小圆片。I 赤霉素对- 淀粉酶的诱导作用实验原理 禾谷类种子的糊粉层是一种分泌组织,它围绕着种子的胚乳。当种子吸水后,糊粉层细胞受来自胚的赤霉素的诱导,合成或激活许多水解酶类,促使胚乳或基质中的淀粉水解。如果把胚去掉,则去胚种子
2、不能或很少产生淀粉酶,所以淀粉的水解不能发生;如果把外源的赤霉素施加到去胚的种子上,则能诱导淀粉酶的产生,促进淀粉的水解。实验材料 小麦种子实验设备 培养血; 刀片; 镊子; 滤纸; 酒精灯。 实验试剂 赤霉素; 安替福民(20ml安替福民+80ml水); 可溶性淀粉; 琼脂; I-KI溶液(2g 碘化钾 + 1g 碘 +300ml水)。 实验步骤 培养基的制备 取预先剪碎的琼脂0.4g,放入盛有30mL蒸馏水的烧杯,加热搅拌,待琼脂完全溶解,加入0.3g淀粉,继续加热煮沸,直到溶液透明为止。在燃烧的酒精灯旁,趁热将溶液倒入预先灭菌的培养皿中,并立即盖好(2个培养皿:1个作对照,1个用于GA诱
3、导- 淀粉酶),待凝固后备用。如果10组同学一块配培养基,则需要8g琼脂+6g淀粉+600ml水。 放置滤纸圆片 将沾有200ppm的无菌赤霉素溶液的滤纸圆片,放在培养基表面上,每个培养基上可放4片(d1cm),另将沾有无菌水的滤纸圆片同样贴于培养基上作对照用。以上操作保证无菌操作。 种子的去胚,消毒和培养 选取10-20粒大小均一的小麦种子,用刀片横切两半,留无胚部分用20%安替福民消毒15-30分钟,用无菌水冲洗6次,放置在培养基的滤纸圆片上(1/1),盖上盖,于室温培养48 72小时。 现象观察 培养完毕后,用镊子小心除去小麦种子和滤纸圆片,用碘液染色。观察淀粉的水解情况,并分析实验现象。 注意事项赤霉素对- 淀粉酶的诱导作用实验应该注意: 1. 无菌操作 2. 将小麦的胚去彻底 3. 淀粉最好逐步加入,不要一
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