吸光光度法的灵敏度与准确度概述及表现方法

1、吸光光度法的灵敏度与准确度概述及表现方法122.3.1 灵敏度的表示方法 摩尔吸光系数 () A= b c =A/bc (Lmol-1cm-1) 越大, 灵敏度越高: 105为高灵敏度.3 2. Sandell(桑德尔)灵敏度 (S)定义：截面积为1cm2的液层在一定波长或波段处，测得吸光度为时所含物质的量。用S表示，单位：gcm-2A= bc= bc S小灵敏度高; 相同的物质, M小则灵敏度高.变换单位:bcmcmol/L=bcM106 g/1000cm24例1 邻二氮菲光度法测铁(Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38 计算 、S 和解： c(Fe)=1.0 mg/L=1

2、.010-3/55.85 =1.810-5(molL-1)S=M/ =55.85/1.1104=0.0051 (g/cm2)或5 c =1.0mg/L=1.010-3 g /1000mL = 1.010-4 g/100mL6例2 比较用以下两种方法测Fe的灵敏度.B. 用4,7-二苯基邻二氮菲光度法测定铁5332.2104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(2.2104)0.0025 (gcm-2)B方法比A方法的灵敏度高.A. 用邻二氮菲光度法测定铁时，5081.1104 Lmol-1cm-1S = 55.85/(1.1104)0.0051 (gcm-2)72.3.2 准确度仪器测量

3、误差100806040200T/% c1 c2 c3 T T T-透光率读数误差 cc1c1c2c2c3c310 4;选择性好;显色剂在测定波长处无明显吸收, 对照性好, max 60 nm;反应生成的有色化合物组成恒定，稳定;显色条件易于控制，重现性好.142.4.2 显色条件的确定c(R)c(R)c(R)1. 显色剂用量（c(M)、pH一定）Mo(SCN)32+ 浅红Mo(SCN)5 橙红Mo(SCN)6- 浅红Fe(SCN)n3-n152. 显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定）pH1pH * *n * * n *38跃迁 max(nm) *150(200)n *200100300n

4、*20080010100 *200104190CH2CH2 CH2135 （CC）CH3CH2CH3135 （CC）CH3CH3125 （CH）CH4max（nm）饱和烃类 *跃迁(饱和烃类)（作溶剂）39max(nm) max(nm)H2O1671480CH3OCH31842520CH3OH183150CH3NH2215600CH3Cl173200(CH3)2NH220100CH3Br204200(CH3)3N227900CH3I258365 n * 跃迁（含具n电子的杂原子）40n* 跃迁（带孤对电子的杂原子与其他键共轭）280300饱和醛酮1000( n*)16( n*)186280CH

5、3COCH3异辛烷22280CH3NO2EtOH5339CH3NNCH3H2O60214CH3CONH2EtOH41204CH3COOHmax(nm）介质41* 跃迁（不饱和烃类)6000173CH三CH14000175CH2CH2max(nm）* 跃迁的max短， 大, n* 跃迁的max长， 小.42电荷迁移跃迁（荷移光谱）特点：谱带宽,吸收强度大,max处的可大于104 。Fe3SCN- Fe2SCN （分子内氧化还原）hRN1R2RhDADA-e给予体e接受体e给予体e接受体N1R2-+hCROCRO-+h432.6.2 有机分子中的生色团与助色团严格地说，只有含有不饱和基团或孤对电子

6、的基团，才是生色团（ n*， *）CC，CH ， * 150nmn*， *:CO CCO:n*， *CO，CSn* ,* 200nm:CN，CCl：:CC ,C C * ,* 200nm （孤立双键 200nm）生色团类 型44生色团举例-1221000275190(CH3)2C=O12.51000289182蒸气H3CCHO CO4500172蒸气C2H2 C三C15530171气态C2H4 CC125CH4CH135C2H6CCmax溶剂例生色团45生色团举例-2max溶剂例生色团15.84400279202己烷CH3NO2NO2160295MeOH乙酰胺CONH260204水乙酸乙酯CO

7、OR34240庚烷CH3COClCOCl41200EtOHCH3COOHCOOH200COH， CSHCN，CCl46生色团举例-3max溶剂例生色团2257000261206.5水甲苯2057400254203.5水苯200238异辛烷C2H5CHNC5H6 CN25343水反式偶氮甲烷NN7417乙醚重氮甲烷NNCH347不饱和基团助色效应大256 261 264 282 320 276(K带) 苯环B带max(nm)CH3ClCH=CH2CCH3O常见助色团及其助色效应(红移max增大):FCH3ClBrOHOCH3NH2NHCH3 N(CH3)2 NHC6H5O例： CH3Cl CH3Br CH3Imax(nm) 172 204 25848反助色团大多是吸电子基团（蓝移）NH3SO2NH2COOCNCOOHCOOCH3 COCH3 max蓝移水乙醇己烷A59溶剂极性增大， * 吸收红移CH3溶剂效应无溶剂效应E1E2E2E1max红移异亚丙基丙酮例： 异亚丙基丙酮305309315329n *243237238230 *水甲醇