药物分析基础分析方法验证

1、药物分析基础分析方法验证2022/7/312一、准确度(一) 含量测定方法 (二) 杂质定量测定 加入已知量杂质进行测试 (三) 数据要求 9个测定结果3个不同浓度(80,100,120)每个浓度各3份 准确度系指用该方法测定的结果与 真实值或参考值接近的程度 一般用回收率(%)表示 定义2022/7/313二、精密度1.重复性 同一分析人员连续测定所得结果的精密度; 也称批内精密度或日内精密度 2.中间精密度 不同时间不同分析人员用不同设备测定结果之间的精密度 批/日间精密度 3.重现性 在不同实验室不同人员测定结果之间的精密度 法定标准采用的分析方法进行 同一均匀供试品多次取样测定所得 结

2、果之间的接近程度 标准偏差(s,SD);相对标准偏差(RSD)数据要求同“准确度”定义2022/7/314三、专属性(一) 鉴别反应 空白, 结构相似物或有关物质呈负反应(三) 含量与杂质测定 含杂质或降解产物的试样中各峰能获得分离 在其他成分(杂质,降解产物,辅料等)可能 存在下,方法能正确测定出被测物的特性 鉴别,杂质检查和含量测定方法 定义与应用2022/7/315四、检测限 适用于可用目视法直接评价结果的 分析方法, 非仪器分析法 鉴别的显色法;杂质检查的TLC适用于能直观显示信号与基线噪声 水平的分析方法, 如HPLC法 信噪比S/N=3(2)时的相应浓度或量 适用于不能直观比较信噪

3、比的仪器 分析方法, 如UV-Vis法 检测限(limit of detection, LOD)是指试样中被测物能被检测出的最低浓度或量LOD是一种限度检验效能指标,反映方法灵敏度 1.目视法 2.信噪比法 3.标准偏差法 2022/7/316五、定量限杂质和降解产物用定量方法研究时, 应确定LOQ LOQ的测定方法与LOD相同相应的系数(倍数)不同, 如信噪比S/N=10定量限(limit of quantitation, LOQ )是指试样中被测物能被定量测定的最低量;反映方法的灵敏度测定结果应具有一定准确度和精密度 2022/7/317六、线性与范围范围系指方法适用的高低限浓度或量的区间

4、在试验研究开始前确定验证的范围和方法在范围内应能达到一定精密度,准确度和线性线性系指在设计的“范围”内, 响应值(y)与被测物浓度(x)直接呈正比关系的程度 y = ax + b系列(n5)供试样品测定,以响应信号作为被测物浓度的函数作图用最小二乘法进行线性回归; 或经数学转换后再进行线性回归2022/7/318六、线性与范围原料药/制剂含量测定: 80%120% 制剂含量均匀度检查: 70%130% 溶出度或释放度检查: 下限-20%上限+20%特殊元素含量测定: 下限-20%上限+20%杂质测定: 限度20%如果杂质检查与含量测定同时进行, 杂质限度-20含量上限+20% 涉及定量测定的项

5、目均需对范围进行验证如: 含量测定, 含量均匀度, 溶出度或释放度, 特殊元素或特殊杂质的定量检查2022/7/319七、耐用性耐用性系指在测定条件有小的变动时, 测定结果不受影响的承受程度; 体现测定条件的允许变动范围HPLC法典型因素有: 流动相的组成和pH值及流速, 不同厂牌或不同批号的同类型色谱柱, 柱温等 GC法典型因素有: 不同厂牌或批号的色谱柱, 固定相, 不同类型的担体, 柱温, 进样口和检测器温度等 2022/7/3110八、验证内容的选择 验证内容选择的一般原则:非定量分析方法 如鉴别,杂质的限度检查法: 验证“专属性”,“检测限”和“耐用性”定量分析方法 如原料药或制剂的含量测定及含量均匀度,溶出度或释放度的测定方法: 除“检测限”和“定量限”外, 其余均验证微量定量分析方法 如杂质的定量测定方法: 除“检测限”视情况而定外, 其余均验证2022/7/3111八、验证内容的选择 验证内容分析项目鉴别试验元素或杂质检查含量测定及溶出量测定限度定量准确度+精密度重复性+中间精密度+专属性+检测限+定量