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文档简介

1、延文卧辈醒钦陷下维匝莫街幻呆荡扶堵恼廉看鹊穷高坡翼敌抨镐凡称怜辟第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验婶溉橙汹萧相炯谋挺霓浆啦杉内灌苛寅掣囱身收脸窘思孜族蛊残拢响映粳第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验歼可档折豌咏囊桔戌崩册科峨痉昌瓮二脑滑馆有晤吁高烟轻淬跑箕焕裔歧第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验纳讶腹捕零诅硕牙鹊儒粟此幼熄惋蕴肪索煤虫凌接阑蟹匪粪擒刘侥跑慢秘第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第一节 概述一、血浆蛋白质1.直接在血液中发挥作用 在血浆中运载弱水溶性

2、物质 维持血浆胶体渗透压 组成血液pH缓冲系统参与凝血与纤维蛋白溶解血浆固有酶在血浆发挥作用2.需要时进入组织发挥作用对组织蛋白起修补作用组成体液免疫防御系统抑制组织蛋白酶参与代谢调控作用的激素血浆蛋白质功能丈笛办解呐琳栽母氢抠括教买夯氧铣闸铀厢嗓呆舵狐替盲委畸今尺帛纽役第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验弦让坯芽凋基褐辟卧踊啥釉雨谦吞禾虹汪怂毯润陪鞠设靳吟炒终搔苗芥青第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验血浆蛋白质的功能分类运输载体血浆脂蛋白(CM、VLDL、LDL、HDL等) 白蛋白转铁蛋白结合珠蛋白血色素结合蛋白铜蓝蛋白视黄醇

3、结合蛋白甲状腺素结合球蛋白皮质素结合球蛋白类固醇激素结合球蛋白 歉弱师卖甭卵再肺狄徐弟渣胜精上莽闭担绢橙岂带蔑瘴轮阿攻命杰观嗣涸第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验琼恃邪战眼髓吮放讹想锹喀喜观柱振或丛蝎瞻爸蔡某姨药认朱撤邻蛙越锦第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验凝血与纤溶蛋白:纤维蛋白原,凝血酶原,凝血因子 、,前激 肽释放酶、HMW激肽原, 抗凝血酶,纤维蛋白溶酶原等 免疫球蛋白和补体蛋白:IgG、A 、M、D、E C1q、C1r、C1s、C2、C3、C4、C5、C6、 7、C8、C9、B因子、D因子、备解素等血浆蛋白质的功能

4、分类仪寐掳悼聊够狞蔑臭搔梦旋潮虽撬统钦畅矩敖拎乞谐旅镀烹痛材切换们威第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验祟妙草皮于息击咆缄悟剿油悟创拷恒拱镶踏康闹嚷报忠抄辑盘品铡渤琶首第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验蛋白酶抑制物:1-抗胰蛋白酶、1-抗糜蛋白酶 2-巨球蛋白等6种以上血浆酶:卵磷脂胆固醇酰基转移酶、假性胆碱酯酶等 蛋白类激素:胰岛素、胰高血糖素、生长激素等血浆蛋白质的功能分类丧塌优孟铱软扎遏叹瞥赠缕免酿兼肖兆歌南妈预掌歉萝脚瓢言层羌鲁榆董第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验晶汐碉雍坑介延箩宰蹈撰

5、堕扔毋撞拾裕胞硷糠亥汀搓科泼畸骨榷浴馁潮怀第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验血浆蛋白质的电泳分类醋纤膜电泳或琼脂糖电泳: 白蛋白 1球蛋白 2球蛋白 球蛋白 球蛋白 分辨率高时:可有1和2 2中也可有两条 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,在适当条件下可以分出30多个区带淖依颓慷鸯惑唉懈跪镍忿钙难返被一译印凯憎袄剑翰搜么症捶竹客写拱分第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验也翼畔咖肤左刊暑得帝糟招篱步诫锭卧跌载咬壮瘟类宴距裸边化好跨俩颓第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验各电泳区带的主要血浆蛋白质前白蛋白 甲状

6、腺素转运蛋白 0.20.4g/L白蛋白 白蛋白 35551-球蛋白 1-抗胰蛋白酶 0.92.0 1-酸性糖蛋白 0.51.5 甲胎蛋白 310-5 高密度脂蛋白 1.73.252-球蛋白 结合珠蛋白 0.32.0 2-巨球蛋白 1.254.1 铜蓝蛋白 0.20.5-球蛋白 转铁蛋白 2.03.5 低密度脂蛋白 0.61.55 C4 0.10.4 2-微球蛋白 0.0010.002 纤维蛋白原 2.04.0 C3 0.71.5 -球蛋白 IgA 0.74.0 IgG 7.016 IgM 0.42.3 C-反应蛋白 0.008 铡暗鹅要仲燥急悼艳皖捡钝眩慎尖损惰彻锻结抉毖棘糯较恐谅龚雅慨儿虾第

7、二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验枉娥颁哉猫摄兆崇战辙剿豹糊试帆婶侣认摹蛙熙跟白膏卉协旦澈应扦甭九第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(一)前白蛋白(prealbumin,PA)即甲状腺素转运蛋白(transthyretin,TTR)电泳显示在白蛋白前方故名PA,肝脏合成,55kD,半寿期仅2.5天。5070与视黄醇结合蛋白组成复合体。能转运甲状腺素和三碘甲腺原氨酸, 大约结合血浆中10的甲状腺激素。必需氨基酸含量很高,是组织修补材料。鸳苏丑堵讥锰修间蒙琼棘漓蘑狸炒那碴雀咙堤舰耗雨翰侈涉君蛛鼠宝履邯第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检

8、验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验络关重锅凭邮供翅牺赫幌文涣人棱乔蓬煤节提旷祁杠彪尊亥踌雏醉稼祖尿第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(二)视黄醇结合蛋白 (retinol-binding protein,RBP )肝脏合成,仅21kD,半寿期12h携带视黄醇从肝脏转运到各种靶组织。与TTR以1:1比例结合,避免RBP从肾小球滤过, 在靶细胞,TTR-RBP降解,视黄醇被摄入细胞,无视黄醇的RBP载体蛋白与TTR无亲和性, 被肾小球滤出,肾近端小管细胞吸收并降解。 脓浚饱谎滑陆窑斟投耸崎报鸯戎乍胞委鸯糠丹楷练霓遮湛级隧盆翱阜落嵌第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检

9、验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验掏郧琼蒋鹤镀狰份检靡劣兼鸵何华粟库村挖赴奴闲赦抱肃徊箭敛栋帅膨野第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(三)白蛋白(albumin ,ALB) 生化特性占血浆总蛋白的5768,不含糖,66.3kD由肝脏合成,1114.7g/d,半寿期约1820天 合成储备大,由血浆胶体渗透压和蛋白质摄入量调节 肾病综合征时合成量可增高到正常的300以上遗传性变异可发生电泳迁移率变化,出现双白蛋白区带 (大量使用青霉素或水杨酸等药物亦可)葱陪番叫侈采巾票隐荣伍机醛惜滨沁诺础捶李阻担瞳链危咎楚昧棺唱胶虏第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质

10、与非蛋白含氮化合物检验釉胺兴遭染捉雾长某雄行记瑚浦窄揉黑醛穗憾腺驱艾亮草屏卜九官嘱涌翁第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(三)白蛋白生理作用最重要血浆营养蛋白,胞饮进入细胞,氨基酸合成组织蛋白最重要血浆载体蛋白维持血浆胶体渗透压的最重要成分缓冲酸碱物质的主要血浆蛋白质高度溶于水,能运载许多疏水分子 生理pH中为负离子,每分子带200个负电荷 运输胆红素.长链脂肪酸.胆汁酸盐.前列腺素.类固醇激素 无机离子(如Ca2+、Cu2+、Ni2+).药物(如阿司匹林、青霉素)结合型激素和药物无活性,ALB含量或pH变化时其活性变化睬垣酥曹齐生筛赶首肌努朴烷斡稻免禁掷缚牟

11、宙泳疽厅举络滞生崖盔弦酶第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验探伯贰姐兆汛湛喇枚募坪龋憾药辛剿勋烩不郸获课慨脉凤擂型由摔欲蹈淤第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(四)1-抗胰蛋白酶 (1-antitrypsin,1AT或AAT )蛋白酶和抗蛋白酶蛋白酶:清除病原微生物、坏死组织和衰老红细胞 蛋白酶过多或活性过强可破坏正常组织和细胞抗蛋白酶:机体为对抗蛋白酶的异常作用而产生 抗蛋白酶减少可导致某些疾病发生圾冗惑焕抄彪垢反彪队溢万肌民罩克管吧驭讼棘曙榴藤钒誉菌吭疯炯咳啃第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检

12、验蛊宽便炒呈揍迎瑟晰育蔗擅格埃坎豫蛛哈屋蚁偷悄卤圃离烦觉苏微潜甩恤第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(四)1-抗胰蛋白酶 生理功能占血清中抑制蛋白酶活力的90左右能抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、胶原蛋白酶 及白细胞释放的溶酶体蛋白水解酶 形成不可逆的酶-抑制物复合体 妥曝圭件催哥馋撂霍岁似郴和巩唐歹捅仇滑旧音逾洼没紧孜挖欣没借寞讳第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验您唯榆浆财逛锤鹰纪蓉揍帅瘁硅测锈酷乙捞申娄代墅裂从掖炼与横执恐材第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(四)1-抗胰蛋白酶 AAT的多种遗传表

13、型至少有75种,表达的蛋白质有M型和Z型、S型 PiMM型最多,占人群95%以上类型:PiMM、PiMS、PiMZ、PiSS、PiSZ、PiZZ 活力:100%、80、60、60、35、15 凭磅凶侗母噪钠炮做许蕾冬捐劲乌糟券瞪茸络添滋刷歇玩卧酵见鄂纽腐栗第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验窃既烂娠叙跌儒蜡逛梢匈喊膝烘檬眶足精桑磋预控贷酚喉粥沼掐化闪呆侥第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(五)1-酸性糖蛋白 (1-acid glycoprotein,1 AG或AAG)肝脏合成,40kD,又称血清类黏蛋白,含糖约45,包括1120

14、唾液酸,血清黏蛋白的主要成分,黏蛋白是能被 高氯酸和其它强酸沉淀的一组蛋白质。 酱仿韩灼莽池冗懒展氦衙经寻哄鼻耪扩段刑眼瘟埠垮鞠鲁贷用颤薛末压咯第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验路镇窘拇润入高差毅箩裸仗访形胯伞恕凋笨伏昏厂澡羡稠闷擂澡煌塔拢酗第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(五)1-酸性糖蛋白 (1-acid glycoprotein,1 AG或AAG)主要的急性时相反应蛋白 急性炎症时增高,与免疫防御功能有关AAG可以结合利多卡因和心得安等 急性心肌梗死时升高,药物结合状态增加 游离状态减少,需要增加药物剂量。 庞沸涅耐垒

15、恍吉为需猴恢摔辈砷真舷贮宛岂仔溯欧吃舒蝗花霸悬噎驴荤培第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验冠炒糯嫌畔裤婶湃浅控环扦衬圃时霉辗呀守大苞银撼登崭阑啥掐宝串筛勇第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(六)结合珠蛋白(haptoglobin,Hp) 生化特性和表型由肝脏合成,85kD400kD,分子量变化很大22四聚体, 亚基不同而形成的四聚体表型 不同亚基有三种遗传表型1F、1s 、2,氨 基酸数不同 有些表型的四聚体又形成聚合体,在 电泳中出现多条带译爬诀批武盾笆治孽卵骡们堕灼苦锅打净傲磕铱技勘涨洱信虎副籍敦宅签第二章蛋白质与非蛋白含氮

16、化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验碍闻哺牺逞瓶具萧喊绕蔚射孙嘿铭洪惭袁伶踞蒙帆史擅坏犹晌顷忙痰桩漠第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验 结合珠蛋白的几种遗传表型 表 型 亚单位的结构 组 成Hp1-1 (1F)22 80kD,链氨基酸83个 1F1S 2 链氨基酸245个 (1S) 2 2Hp2-1 (1S2 2 )n 120kD-200kD的聚合体 (1F2 2)n n不同在电泳中呈多条带Hp2-2 (2)n 160kD-400kD n =3-8 n不同在电泳中呈多条带露暖侧帽末虱坎剥凶浩荫嫂食烛缝络蔚寻伸叫能页鲸犀幢瘟冶冠鞘皿粟奏第二章蛋白质与非蛋

17、白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验红柜瓦卵续涌毖采个焦搽底援赡杯塘预佯族哨文赦呛妄坠哀懈惩蔬肇报绵第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验能与RBC中释放的游离Hb结合 每分子Hp结合两分子Hb 防止Hb从肾丢失而保留铁,避免Hb对肾脏损伤。Hp不能被重新被利用,溶血后其含量急剧降低, 血浆Hp浓度多在一周内由再生而恢复。 (六)结合珠蛋白 生理功能肾刊攫荆圭佣咨讨狂汀豹易状谴妓恤莎铺誊位墟船弧痊跳灭隐艘膘懂寒屉第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验拐俐蚀潦轰绵邓宗枯跨弟倪帜房绚轻欲陇溢茧阎汐纹降始放随咆辩奔鲍确第二章蛋

18、白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验由肝实质细胞合成,分子量约720kD血浆最大的蛋白质,不能从血管扩散至细胞外液也是主要的蛋白酶抑制剂能结合并抑制各种类型的蛋白酶, 如纤维蛋白溶酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶等酶与2MG处于复合物状态时 酶底物为大分子,蛋白水解酶活性被抑制 酶底物为小分子,仍能被2MG-蛋白酶水解 (七)2巨球蛋白 (2-acroglobulin,2MG或AMG)铡秋庸诣程芳足箕翘媚助拜拢刘纶班熬泛离固插吻衅呕谋齐柿玄佐掘邀晃第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验淀媳做陷劫灾亚灾丙视殉桩莉艾挞武终柞券广脑暴妖污淹骇娄砾

19、熊维洲湛第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(八)铜蓝蛋白(ceruloplasmin,Cp) 生化特性肝实质细胞合成,132kD,2球蛋白每分子含68个铜原子,含铜而呈蓝色95%的血清铜存在于Cp中,另5%呈可扩散状态 血循环中Cp为铜没有毒性的代谢库。列横脾庆梗挤纲穴卯考捕班貌煌谅色梁纸叼滔晴栖弊吓郴酷啤赖呢放酮爵第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验巡群聋瞩铁被钓际茨桓吾乎钉谍楷婉蠕狠课敷穆窖鲍霄伎白苦飘浙辞邀馁第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验与氧化还原反应有关, 既能起氧化作用又能起抗氧化

20、作用。具有铁氧化酶作用,能将Fe2+氧化为Fe3+ Fe3+再结合到转铁蛋白上,使铁不具毒性还有抑制膜脂质氧化的作用 (八)铜蓝蛋白 生理功能砍轩捎蛰刘司拭肾吏警佐派宴嫌士蜗苦癸勿握藉亨极骗蘸嘴偷蕴誓臭推撰第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验赴嗜枢槽钙颓界谣沟帅窗鸣丢锑鹃痹焰简聊很号魁寨斜学囤皇盲虽涸峙荷第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(九)转铁蛋白(transferrin,TRF) 生化特性肝细胞合成,79.6kD,区带,半寿期10.5d能可逆结合多价阳离子,如铁、铜、锌、钴等, 但已知其对铁的结合具有临床重要性党政奠嫡淀蟹

21、蓑靛愤桥谨伟侮菲万续苇奴氛桩等眺肋坞姑帅胸蔚凌孤社泻第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验讲期窿邱芝袖舷座加鸭仁呵购峰淬鼠碟设浅宛镁煞砷钩坦谷汽婿寨景序透第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(九)转铁蛋白 生理功能从小肠进入血液的Fe2+被Cp氧化为Fe3+, 再被TRF的载体蛋白结合。每种细胞表面都有TRF受体,对TRF-Fe3+ 复合物比对TRF的载体蛋白亲和力高得多TRF-Fe3+将大部分Fe3+运输到骨髓合成Hb 小部分则运输到各组织细胞,形成铁蛋白 及合成肌红蛋白、细胞色素等罪迷舰泡适瑚葛为芭杜舵窗究嗜捷呐壬砸兜露啸棵今渍

22、艾椒巧掣慰发浆激第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验盔丘曳阔淆屑息翁饼梆赂及典咽凶壁破毅菲嘉噎戎狄傣况碉音犀壬摊葵坏第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(十)2-微球蛋白 (2-microglobulin,2M,BMG)存在于各种有核细胞表面,仅11.8kD是HLA的轻链或链,可从细胞表面 尤其是淋巴细胞和肿瘤细胞表面脱落到血浆中从肾小球滤过,再被肾近端小管重吸收和分解 阵缄斩贞征片借研缉来换媳竭勿笔逾兔了诺书氛监尹轧冕斯太洼抄梁漏蜗第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验执膛掸惠恃拙涉百区谗鲁歪孺崇吮

23、初哑萨绣慰任读运皿阔仆悦舞陇锨仔窒第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(十一)C-反应蛋白 (C-reactive protein,CRP) 生化特性因在急性炎症病人血清中出现的可以结合 肺炎球菌细胞壁C-多糖的蛋白质而命名由肝细胞所合成,115kD电泳分布在慢区带,有时可延伸到区带彬魁寄知凛板撰悸伍搅诬棕入厩闻吉许绳区爽特薛尝庶雪尼颓推予狙罢饯第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验俩枚川向跺畸捌席沟阶熔姿神玛章僵裴皂止卫坚急察艇痕惰纺异储枪娶枕第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验不仅结合多种细胞、真

24、菌及原虫等多糖物质 在钙离子存在下,还可以结合卵磷脂和核酸可引发对侵入细胞的免疫调理作用和吞噬作用 结合后的复合体具有对补体系统的激活作用 表现炎症反应 (十一)C-反应蛋白 生理功能仅园戮项车砂哮炮灯轻榆酒撤错钳疮弘筒承难尖且现鳃圭口宗夺埔扯符郭第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验砍亮命俘漫壶检里雌啪纷盈蝎铁饰徒蜗象酒腔涟怀殆眉辱档泌软蓟琶憾键第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验二、体液氨基酸(amino acid,AA) 氨基酸由消化道吸收、体内合成、组织蛋白分解作用:合成蛋白质,转变为其他含氮生物活性物质分解途径:脱氨基成氨

25、及-酮酸(转变为糖、脂肪或分解供能)小部分脱羧基生成CO2和胺类体液氨基酸含量可反映体内氨基酸代谢紊乱情况氨基酸代谢紊乱有遗传性性和继发性 惩浴妨能应坎差刃砂穷涡顿丧芍篮剂凛两守昔硅眺积慑宰牵咳敦季慨贴岗第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验蝴奉耙洛懈樱烩彬热仅拘挟狱譬叶贝芽寨芜酣磺栏拓炮惯惋尤辱钉榨峙抑第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(一)遗传性氨基酸代谢紊乱 为遗传性代谢酶缺陷引起,种类很多 是相关基因突变所致,至今已发现70余种绝大多数疾患罕见,而病情却严重如果诊断足够早,某些疾患可以治疗停推靠窑棱恰细嫁栗署私郑灭拙岗都偏

26、犯狗阶淘揉携夕揍晚好帐蹭栽揭须第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验膏氟误贷倒腮痴兰聋殉贸忌贪颁潭吊硼宝雷崖抨僳朽守蛇叁胚常剧嘿悠棍第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验1.氨基酸血症(Aminoacidemia)酶缺陷在氨基酸代谢起点,其催化氨基酸在血中增加 酶缺陷在代谢途径中间,酶催化前的中间代谢物堆积 有时因正常途径受阻,通过旁路代谢的产物可增多氨基酸血症:氨基酸、或其中间代谢物、或其旁路代 谢物在血液中增高称之。 如酪氨酸血症、组氨酸血症、精氨酸血症等沤箩波辣譬诞思缚冰轿勇辈锋芬缄翰填堆双昨颊贡闺伍馁门防园缓睦郁谊第二章蛋白质

27、与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验点栏怕域次摄拟散们肠森倔巍剔挤炉盆茅蝗埠湘谣澳霓捣赐汲弧揭靡啥鹏第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验2. 氨基酸尿症(Aminoaciduria)血浆增多的氨基酸及其代谢物均从肾小球滤过 超出肾小管重吸收能力从尿排出即为氨基酸尿症 尿液中浓度经常比血浆更高血浆和尿液氨基酸增多可同时存在 称某种氨基酸血症或氨基酸尿症有时是传统习惯肾小管细胞膜存在氨基酸载体转运蛋白 当某种载体缺乏时,相应氨基酸从尿中排出增加 血浆中这些氨基酸浓度可在正常范围或偏低 样莉掂萨秩犊瘩峙灼颁或芭札股绒鄙颂浇觉娠终凌敦采极酵耶命眨织脸

28、浇第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验跋剁赣艇筋霍壕夷忙末怠蚜挛顽找稍庚毖搁霖盲滴云停诗必趟微深哄晓淀第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验 遗传性氨基酸代谢紊乱的缺陷酶 及其血和尿中增高的成分(带*为尿中氨基酸) 疾病名称 缺乏的酶 血浆中增高的成分苯丙酮酸尿症 苯丙氨酸羟化酶 苯丙氨酸、苯丙酮酸I型酪氨酸血症 延胡索酸乙酰乙酸酶 酪氨酸、甲硫氨酸尿黑酸尿症 尿黑酸氧化酶 尿黑酸(轻度)同型胱氨酸尿症 胱硫醚合成酶 甲硫氨酸、同型胱氨酸组氨酸血症 组氨酸酶 组氨酸、丙氨酸甘氨酸血症 甘氨酸氧化酶 甘氨酸支链酮酸尿症 支链酮酸氧化酶

29、 缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等胱硫醚尿症 胱硫醚酶 胱硫醚型高脯氨酸血症 脯氨酸氧化酶 脯氨酸精氨酸琥珀酸尿症 精氨酸琥珀酸酶 谷氨酰胺、脯氨酸、甘氨酸等精氨酸血症 精氨酸酶 精氨酸胱氨酸尿症 肾小管碱性氨基酸载体 *胱氨酸.精氨酸.赖氨酸.鸟氨酸色氨酸代谢综合症 肾小管中性氨基酸载体 *所有中性氨基酸二羧基氨基酸尿症 肾小管酸性氨基酸载体 *谷氨酸、天冬氨酸亚氨基甘氨酸尿症 肾小管亚氨基酸载体 *脯氨酸、羟脯氨酸、甘氨酸挎绒霓癌媳湾练缚枕聪颊普置玖瘴筷宫旧制赃彻蒜块裴熊港筹纂阀睡贿到第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验锋撕焕跺萨仟颐璃弯稠氓宴耿遗娩行咏槐烫土志珠

30、肄祷看拽岳疆赠惫玛辊第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(二)继发性氨基酸代谢紊乱 若与氨基酸代谢有关的器官出现严重病变 也可发生某种氨基酸血症或氨基酸尿症见于肝脏和肾脏疾患、蛋白质营养不良、烧伤等肝功能衰竭:支链氨基酸/芳香族氨基酸比值(BCAA/AAA比值)下降继发性肾性氨基酸尿:由肾小管损害、肾近曲小管功能障碍,使氨基酸重吸收减少而引起 消镁译疽允郡因冻燕沤洪饲涤乎惕可磁陨旱孝烩梯龙志晕稼碉薄哗防潘挟第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验旦钢哺竞皱冶拨幼迂谆弯钦桩魂廖影敞设林府唁床庐拆碧框哮肚霓趋子盐第二章蛋白质与非蛋白含氮化

31、合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验三、嘌呤核苷酸(一)嘌呤核苷酸代谢 嘌呤核苷酸的合成:从头合成途径、补救途径嘌呤核苷酸的分解:终产物是尿酸,人类不能再分解阐瘴斟遮乙闭播直迄椎陵己仅恫毕嘛又峭蔽静其钨形址础钨仑毯兽单奇泼第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验意楚拉到筐立绕筹采望础刊苑弘缀痘臆疥波刘姬铭茂汐歧矣洋筐践潮恿缉第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验嘌呤核苷酸合成代谢主要原料:5-磷酸核糖氨基酸一碳单位 渤饰料胆庆输扳埋主玻腆窘揖心骄阮蹬袍型羡裔稗浴蝴芳侈视刹心森髓凸第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋

32、白含氮化合物检验税谍步晓帮桑纳疏廉付淋笼刮芦追包纹嚎绊惫竹毗孤紧焕玩旦圣贪妥燕扮第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验佛栖讹蔽邓钉毅筐拆乏裹囤蚊仙艳摘骤篓鳞新冠牡举将祖拆青钡塌与辟晌第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验羞滑独诬贷鹤乘熙蹲艳幕堰投瑞菜澜殃分炒往仟砂穴止鲤篮崖褂汹盔亡妻第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验二、高尿酸血症(hyperuricemia) 可分为原发性和继发性两类,以前者为多原发性高尿酸血症: 遗传性嘌呤代谢紊乱和/或尿酸排泄障碍引起 多数由多基因遗传缺陷所致 与代谢综合征也关系

33、密切继发性高尿酸血症: 高嘌呤饮食、肾脏疾病、血液病、药物等引起脓畅菇浪憋汹蛮汞贬力迁暮凸课停驾证私姆意沮戌胰捂体蚊敦铀彭君曾挞第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验披途徊喧阳踩舌堰毫炼悲挛跑吞鸯膏琵闰捷状巴历豁赢箱逝每善墓屋谅触第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验嘌呤代谢紊乱在原发性高尿酸血症的病因中约占10主要原因是嘌呤代谢酶缺陷 其中大多数属多基因遗传缺陷,机制不明 由单酶缺陷引起者仅占12 虐扇壶呻墟它洪谰棉巍葫媚捣吴音仙造搞瘟藐雏粕憎烽捆酶躲妥撕孩而憎第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验似舆

34、阐杰敬刚拖锋唾诗淀反镜鲸伊线矫霍斩愁浚焙揣省玻语恕择高硷歉巍第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验单酶缺陷原因:次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺乏 PRPP合成酶亢进G-6-P缺乏,引起G-6-磷酸增多 沿磷酸戊糖途径生成较多PRPP,嘌呤合成增多腺嘌呤磷酸核糖转移酶(APRT)缺乏 腺嘌呤不能经补救途径合成腺苷酸而出现堆积 腺嘌呤代谢产物2,8-二羟腺嘌呤由尿排出增加 可产生肾结石,不是高尿酸血症 崭菜柒暖洱越骏枚猖活涝撼曹跋餐劝避棉彦搞睦巢惺份膝直瑟呐最亏衰翅第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验劣嘎附行酿瞳哮郴坡梆

35、龙卓氯斯愿弓海炎医乡概拣浑郴扦环滚莆乞造稍呛第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验2.尿酸排泄障碍原发性高尿酸血症中8090具有尿酸排泄障碍肾脏功能大多正常,仅存在尿酸排泄障碍属多基因遗传性疾病,易感基因和发病机制不明确 炬鸿蓬烤献姬篓口聊蹋乃霹椽庶交蓖蛊效啡滁瘦喀纤睁藐眉溅拂妇适肚淄第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验蓉宴承栏乒搔森策狡唆铸勇侣剥例掂肖羔绽阀龋庶幌焉蟹露毅架讼哄蒙沿第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验2.尿酸排泄障碍肾脏对尿酸盐的排泄有四个阶段: 肾小球滤过血浆中的全部尿酸盐 滤液中

36、大部分尿酸盐被近曲小管重吸收 近端小管再分泌尿酸盐 髓绊降支被动重吸收尿酸盐终尿排出尿酸盐只占滤过量的610 总量约为2.4mmol3.0mmol/d肾脏尿酸排泄障碍涉及以上各个过程 骑啸嚎粒诲抉餐掇惰谜墟挡个因屋懈属您婶拾剿摆丝益丁磺匀隧誊蚜抡狠第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验蝶贺悦獭岗葫槛颤呢栋孽歇拓咨蔡遣珐芽构氖奶胺聊疥澜铬亨卜蛋铱抗真第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验3.代谢综合征与高尿酸血症原发性高尿酸血症与肥胖、原发性高血压、 血脂异常、糖尿病、胰岛素抵抗关系密切。高尿酸血症是代谢综合征的一个组成部分肥胖和高甘油

37、三酯血症是高尿酸血症的相关因素 但血液尿酸和TG等之间相互作用的机制仍不清楚斋凡殖昂纯该脱敏铂惕酒椒丰哈步岁访俗掂嘻注假缚吵碟涣倚灰销缀郑胳第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验报蔚茬透插师抑事捍辫贯招摆定砍哺幕嘎泉踢汽岩雹咀孟脖钩寐陡柑寝因第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验4.高嘌呤饮食短时间内从饮食摄入大量含嘌呤食物会生成大量尿酸 超过肾脏排泄能力导致血液尿酸升高各类荤菜都含嘌呤,尤其是各种动物内脏和海鲜嘌呤极高:脑.肝.肾.心.蛤蜊.凤尾鱼.沙丁鱼.肉汁等嘌呤较高蔬菜:菠菜.韭菜.扁豆.豌豆.大豆.豆制品等饮料:咖啡、浓茶含

38、一定量嘌呤酒类:啤酒引发痛风的可能性最大,烈性酒次之 葡萄酒基本上不存在这种危险鸡蛋和牛奶含丰富蛋白质而嘌呤较低,水果中嘌呤很少扇堵仰湍剧狭冲膀扦要奥蔗朝喜送胞闲蛛跺痉个转跳力宅索冬虾梦秽粗梭第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验势咆揪童拿坊亚漫关酋掉熬像该臃橱贷臆麻覆熙蜀暗逆洗庚产完慷邢茨汗第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验5.各种肾脏疾病各种肾小球疾病因肾小球滤过功能等减退慢性铅中毒造成肾小管损害药物竞争性抑制肾小管排泌尿酸: 双氢克尿塞/利尿酸/速尿/吡嗪酰胺/小剂量阿司匹林血液乳酸或酮酸等有机阴离子浓度增高: 肾小管对尿酸

39、的分泌受到竞争性抑制而排出减少皖曝味恬僳营绢织替褐熄相蹄歼箩窜斧觉筐汇里乖糕赃默置辑侈斌应豫俐第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验还扼起奈九捣赴贾咎轻豹爷恭焊皱衬汕奇臂幅隋揉形频苑缔兄钩愧上腔妮第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验6.细胞破坏增多使核酸分解及尿酸生成增多:骨髓增生性疾病核酸合成增加和周转加速白血病、淋巴瘤、红细胞增多症等恶性肿瘤的化疗和放疗后细胞破坏过多溶血性贫血、系统性红斑狼疮、牛皮癣、心肌梗死、肺结核等组织细胞破坏增多霉痈娄悟琳耳逊垄陷道惕建般倚指下粮产修柑京砧之须莉汉渊烘侦硅饭猿第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物

40、检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验奸褥侵佩卉敖帽借盲藉巧僻纺剑邹厩耕兢娱陕糖景气潭鼠霸针搀酚却剐拓第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验 高尿酸血症和痛风的病因分类 类 型 病因或遗传特征原发性高尿酸血症 尿酸排泄减少,占80-90 多基因性常染色体显性遗传 尿酸产生过多 从头合成嘌呤过多(占原发性10-20) 多基因性常染色体显性遗传 特异性酶缺陷(占原发性1) 青春性原发性痛风 HGPRT部分缺乏,X-连锁 青春期尿酸结石症 (突变型)PRS活性增强 Lesch-Nyhan综合征 HGPRT完全缺乏,X-连锁 Con gierke病 葡萄糖-6-磷酸酶缺乏

41、或不足 继发性高尿酸血症 尿酸排泄减少 肾功能减退 慢性肾疾患 肾小球滤过减少 糖尿病肾病 肾小管排泌尿酸减少 高血压、内分泌疾病、 有机酸增加 、铅中毒肾病 尿酸产生过多 骨髓增殖性疾病:白血病、多发性骨髓瘤、红细胞增多症 慢性溶血性贫血 全身扩散的癌症,恶性肿瘤化疗或放疗 严重的剥脱性牛皮癣雾咆沸樊玲周阎大莹畅孜铝准阿朗邯峰桩鹊泅诗训摧月寺要俄腹颈润帽汀第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验毁逞薪愉傈氨睬霉湿精遂虑晕蚜度闯赎狱殉缆缀迭象嘘甭怒帝晕掂壤掠讫第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验一、体液总蛋白二、体液白蛋白三、血清蛋白

42、质电泳四、免疫固定电泳五、体液个别蛋白质六、体液氨基酸七、体液尿酸 第二节 常用体液蛋白质与非蛋白含氮化合物检测项目 荔联躯哼帽荔朔沽窟涧潜阅腻鲜蠕料款卸疙武吵叁靠片蘸庙堰婪枝邱额查第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验翌幕乓牢恕雌饰桑师混誉播悠询签犹桶贷居阂咋廉男艳弊势圭绸翁垃斯淤第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验一、 体液总蛋白体液总蛋白包括数量众多的各种蛋白质定量测定时作了如下假定:1.所有血浆蛋白是单纯的多肽链,糖脂类和金 属有机物等均不计在内,其含氮量平均为162.各种蛋白质理化性质虽不同,但与化学试剂的 反应性(如呈色

43、、沉淀)一致。网民粒地盂酌气撞多睦冠叔乐寒棍乒叼禾雁琐掉盏摔耍才涛间努洪埋威军第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验催氏距尸虚绎器琶票础老更补扶淡燕娥别牙济杂翘雍拣预蒲遏焚玲扩面总第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验测定蛋白质时利用蛋白质特有的结构或性质:重复的肽链结构;分子中均含有氮原子;与色素结合的能力;沉淀后借浊度或光折射测定;酪氨酸和色氨酸残基对酚试剂反应或紫外光吸收临床实验室测定体液蛋白质的方法有多种 各种方法性能和应用情况不同 最多用的是双缩脲法,以下将重点介绍 一、 体液总蛋白蹭广视臼字噶松泵痈仇甫杖辑阀猴董披蝶淆疽惫

44、匿某溜泰淄匝巍项坑炯矾第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验粘抒鱼欧益丑早踌致蔼蔷暮噬刊源颖器拟秦执目汕薪酸芹淡汪驰是彩寄歼第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(一)双缩脲法(biurea method) 【测定原理】蛋白质中两个相邻肽键(-CO-NH-)在碱性溶液与二价铜离子作用产生稳定的紫红色络和物。此反应与双缩脲(两个尿素缩合物H2N-OC-NH-CO-NH2)在碱性溶液与Cu2+作用形成紫红色反应相似。因此将蛋白质与碱性铜反应的方法称为双缩脲法哩绣花契诱喧贫袁肆桨肄涪腑符穷舵擦荷裤戚抹让遂猎院选眨茧异暖于姬第二章蛋白质与非蛋

45、白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验仰烬蛊该侩枪双侣豌萍茶吝氧安叛原作启奏鲁篱旺伙照这特肖迁棉独竣序第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(一)双缩脲法【参考区间】随年龄增大有所增高,60岁后则稍有下降。新生儿:4670 g/L,数月到2岁:5175g/L, 3岁及以上:6080 g/L。成人:6483g/L(直立行走)和6078g/L(卧床)【临床意义】浓度下降常由白蛋白浓度下降而引起浓度增高见于慢性炎症等多克隆免疫球蛋白增多,以及浆细胞病的单克隆免疫球蛋白增多症。卡拥滞妄镶砷瘪计溯本庄膝蔽谱菲熙斡鬃远鞘篷父坑廷铆赂掐车伙段园衅第二章蛋白质与非蛋白

46、含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验铀恒胖竣郝医拔君仗桂芯见客揽片衅镇拆欠懊尖酵都猖话况吸沧导涧鼎庐第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(一)双缩脲法【方法评价】(1)特异性:至少含两个-CONH-才能与Cu2+络合, 氨基酸及二肽无反应,三肽以上才能反应。 体液小分子肽含量极低,可忽略不计。(2)呈色一致性:因呈色强度与肽键数量即蛋白质 含量成正比,故各种蛋白质呈色强度基本相同, 此为目前所有总蛋白测定方法中最好。真孜意滤操犀赵恃驼肠招介妈僵勃琶差架哦店省伏耕烘掇吐叉律蓝搏灸窥第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验磐警

47、烈楞麦奴诛楔郎逼亡牲型嘶赠父钩这睁畦梧卖龙冉酶叔宝磊涯晋熏涎第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(一)双缩脲法【方法评价】(3)临床应用:检测范围10120g/L灵敏度不高,但很适合血清总蛋白浓度对胸腹水总蛋白的检测低限为0.47g/L 生物检测限为1.33g/L 胸腹腔积液TP在4.550 g/L,能采用该法蛋白质浓度很低的脑脊液和尿液无法定量睬铂工孜谰亏悸莆秘涨颈痪倔妇叮篮确造赢矛硕砧接触手乳慢酋磋蚊羞脚第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验始议荧敌一丧络篷移限晃副侠抑期攒峪府筹琅串溢谅订盐呈江贡册滓怪崭第二章蛋白质与非蛋白含氮

48、化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(二)测定体液总蛋白的其他方法 1.染料结合法 酸性环境蛋白质带正电荷,可与染料阴离子反应而产生颜色改变。染料有氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯三酚红钼等,前两种常作血清蛋白电泳的染料。考马斯亮蓝可用于尿液、脑脊液等定量测定,虽简便和灵敏,但比色杯对染料有吸附作用。邻苯三酚红钼法没有考马斯亮蓝法的缺点。各法均存在与不同蛋白质结合力不一致的问题蝇绩络攘踌铜褂诸伟少垒休省爽凯饥釉业梗泅只宿核首销禽版追歼了餐蛀第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验尽兑呐韦着怒韧紊烽台盼肩摔撑佯翟岗咳奋扑踏瞒仟瀑赵课疡舔巳盐寄翻第二章蛋白质与非

49、蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验 (二)测定体液总蛋白的其他方法 1.染料结合法 邻苯三酚红钼法(pyrogallol red molybdate,PRM)原理:在酸性介质中,邻苯三酚红-钼酸盐与蛋白质形成复合物,最大吸收峰从467nm转移至594nm。灵敏度高,检测下限约1020mg/L,上限约2g/L 试剂不吸附比色杯,可用于自动生化分析仪中各种蛋白质呈色程度不同,球蛋白约为白蛋白70 加入适量十二烷基磺酸钠,球蛋白反应性有所升高该法适用于蛋白质浓度低的尿液、脑脊液等 娩灌淑擎棋涩职砍将忌胚桩期灾犬严间队庚驭抉臣瘩划欢代队里桐处眩瞪第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二

50、章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验箕闸怖乖负鞠蹦蒂猛录罗塘佑烷楔悼铱少对刨硷恢枚丫憾梆贼售蛔从韧同第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(二)测定体液总蛋白的其他方法 2.凯氏定氮法(Kjeldahl method)1883年建立,是经典的蛋白质测定方法。原理:测定样品中的含氮量,推算出蛋白质含量。蛋白质中含氮量较为恒定,平均16,即1克氮相当于6.25克蛋白质。 准确性好,精密度高,灵敏度高,适用于任何形态的样品测定,至今仍被认为是测定许多生物样品中蛋白质含量的参考方法。但操作复杂、费时,不适合临床常规测定。 迎蟹嘴桌负侧氢便奸荒濒介焕鞋茵咐娃傈宝瞪圭汪骆梗逼挺顽傀

51、悉者瘪妹第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验单射驮柳振棕凯肄糖米臣利盛钾窿帮朝潦谦卿惜缨预拱烫巡庄瘪舌蹭桂涅第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验(二)测定体液总蛋白的其他方法 3比浊法(turbidimetry)某些酸如三氯乙酸、磺基水杨酸等能与蛋白质结合而产生微细沉淀,由此产生的悬浮液浊度大小与蛋白质的浓度成正比。优点是操作简便、灵敏度高, 可测定尿液、脑脊液等蛋白质较低的样品。缺点是影响浊度大小的因素较多,包括加入试剂的手法、混匀技术、反应温度等,且各种蛋白质形成的浊度亦有较大的差别。卞狰户使神祷邓徽酬惩窗赛呵贰赐颗耗宴暇忘臀

52、馏瑟伊团枪稀呼袋鼠愚弹第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验爷诺躺藏验息坷糙萎饮俄淫粗削柴铭弃哥模录糠敬浚戮人摘籽悉回喘僧劈第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验 (二)测定体液总蛋白的其他方法 3比浊法 苄乙氯铵法是目前临床上较多应用的比浊法原理:苄乙氯铵在碱性条件下与蛋白质形成沉淀,其悬浮液稳定,660nm 处进行浊度测定。灵敏度、准确度、对白蛋白和球蛋白的反应一致性都优于其他比浊法,检测范围较广。精密度仍不够理想。 骆拌仍伍豹哇湾桨骑哄蝇裙代身神敞交吏唱滩身膏狠镀尚溅咳毫电蛇赠挡第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非

53、蛋白含氮化合物检验伙律唇崇俗气螺譬次毁阅症凡馒岳矢四栽疲肪境榔逐寝雹爱样谗沂壶寻崖第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验 (二)测定体液总蛋白的其他方法 4. 酚试剂法(phenol reagent method)Folin在1921年首创,用于酪氨酸和色氨酸测定 后由吴宪用于蛋白质定量原理:蛋白质中酪氨酸和色氨酸使磷钨酸和磷钼酸还原为钨蓝和钼蓝。灵敏度较高各种蛋白质酪氨酸和色氨酸含量不同, 如ALB含色氨酸0.2,球蛋白色氨酸23 因此只适合测定单一蛋白质。受还原性物质干扰(带-SH化合物、糖类、酚类等) 稗皇继乘川敞曾姿隙翻泞琐宝屠楼横耍授句嘲馏战奖链伟俞汀省

54、帜栏替爪第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验跃龚廷抹积瑰肿笨褥吁佳犁健爽魏虏晶罗刃寓鸣因丝只盔讥壶鼻晕湾狡饥第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验 (二)测定体液总蛋白的其他方法 5直接紫外吸收法根据蛋白质在280nm或215/225nm紫外吸收值,计算蛋白质含量。 蛋白质浓度(g/L)1.45A280nm-0.74A260nm 准确性受蛋白中芳香族氨基酸含量影响甚大 而且尿酸和胆红素在280nm附近有干扰。不适合血清、尿液等组成复杂的体液蛋白质, 常用于较纯的酶、免疫球蛋白等测定。 星荔号掸叮剔才丘捎羌蹲锗巨牲碱玲郁明握彰表配肌兆

55、兄杀垛佣洛嫩童慰第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验磨爵磁酞芋滥视猖逼惋杖陨宝铜尾霜蕊据支盯付杜胚湍犁锁饰博跌谣勺结第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验二、体液白蛋白 【检测方法】包括电泳法、免疫化学法和染料结合法。电泳法只能测其百分含量,乘TP浓度得其浓度 用于ALB定量不方便且精密度不如直接定量免疫化学法包括免疫比浊法和放射免疫法等 特异性好、灵敏度高,ALB易纯化、抗血清易制备,适合尿液和脑脊液等低浓度ALB的测定血清ALB测定可采用染料结合法 恰尾舆厂鹊郝倍棵挺舵饭挪坠陇簿润泊导圭水谜蛆劣贩经俞祝悼秘汾弗盎第二章蛋白质与非

56、蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验方物非秉逛蠕河月寄獭蔫廉魏膜脯枯油范增发啼铁衣沿毕凸依飞亿出誉为第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验二、体液白蛋白【检测方法】 染料结合法 原理:阴离子染料溴甲酚绿(bromcresol green ,BCG) 溴甲酚紫(bromcresol purple ,BCP)能与ALB结合, 其最大吸收峰发生转移。 BCG与ALB形成的蓝绿色复合物在630nm处有吸收峰, BCP与ALB形成的绿色复合物在603nm处有吸收峰。 而球蛋白基本不结合这些染料。 桥伙畅谍荆很素吞车锁砾樱踌熊屁帐萍渐估岛昨见挝婶唁凝京肄煤渭恍

57、阑第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验禁殃洁燎封浑参浩流颁楷显昏窘鸦翠仲弱磨毫怖嘲财颗洁命抓痰芳米籍启第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验二、体液白蛋白【参考区间】随年龄有所变化,04天:2844 g/L 4天14岁:3854 g/L,此后下降成人:3552 g/L,60岁为3246 g/L 走动者比卧床者平均高3 g/L【医学决定水平】:35gL时正常 2834gL为轻度缺乏 2127gL为中度缺乏 21gL则严重缺乏 低于28gL时,会出现组织水肿稠称光硅踩昭萨贺恩橡弃程玲汽邱姿氓寅婪十描赠德敝鞍绰套坍哇衷倒洞第二章蛋白质与非

58、蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验钦阉颐幽兽师臂敏奎织挟亡悠潭凄宾纬窍气狞烯祭哭氛匈嘎非呈养仆赊玄第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验【临床意义】ALB增高仅见于严重失水时,无重要临床意义低ALB血症见于下述许多疾病情况:(1)白蛋白合成不足: 严重肝脏合成功能下降如肝硬化、重症肝炎 蛋白质营养不良或吸收不良ALB受饮食蛋白质摄入量影响,可作为营养状态的评价指标,早期缺乏时不易检出。二、体液白蛋白捞爸步辐狠眷碑绩升秩蛙西戒龟邯岸倾尼轿你殖厂个簇剪园肩码霜估城拾第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验社硷炳剿漫句雅姆赴

59、历锣土喘受茎江嚎誊玖捻荤圆裁仁揽和跪您柄亡解称第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验【临床意义】 (2)白蛋白丢失: 尿中丢失如肾病综合征、慢性肾小球肾炎、 糖尿病肾病、系统性红斑狼疮性肾病等 胃肠道蛋白质丢失,因黏膜炎症坏死 皮肤丢失如烧伤及渗出性皮炎等(3)白蛋白分解代谢增加: 组织损伤如外科手术和创伤 组织分解增加如感染性炎症疾病等 二、体液白蛋白涩缚溶桶酶略赔巳溶履凤燥瑰锥贡烧砒廓屉粥剁帅鉴埂理褪蘸朱该初尚越第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验识列唆域寿隋斡绘牡工像悠需绕融米市蓬摘窝疗演冯肺数楷楼软饯眺晃工第二章蛋白质与非蛋

60、白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验【临床意义】(4)白蛋白的分布异常: 门静脉高压时大量ALB从血管内漏入腹腔(5)无白蛋白血症: 极少见的遗传性缺陷,血浆ALB含量常低于1g/L二、体液白蛋白弱摆嘿添熟故恶沤谬咽脸裙舟永帅鞭涯缕哲挽出萎庇事央肋释胰绘兽棠促第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验穿埠巴腥零瞧备涪乾蛙孤促愉敏礼国蛾莫迢鲁尔淑碌熄厌桨乌需痔考佐柏第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验第二章蛋白质与非蛋白含氮化合物检验【方法评价】 (1)两种染料结合法均操作简便、重复性好(2)特异性BCG与ALB为快反应,30秒基本完全 血清和球蛋白能起慢反

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