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文档简介
1、关于实验酵母细胞的固定化第一张,PPT共十页,创作于2022年6月一、 实验目的和要求了解固定化细胞的原理。掌握用海藻酸钠制备固定化酵母细胞的方法。第二张,PPT共十页,创作于2022年6月二、 实验原理工业上常用包埋法固定微生物细胞。根据包埋剂的特性,海藻酸钠在水相中加热溶解呈溶液状。将细胞加入混匀,滴入氯化钙溶液中,由于离子的转移作用而凝固,形成凝胶颗粒,凝胶颗粒中的微小空格将细胞固定。海藻酸钙凝固的颗粒能反复使用,细胞在空格中可新陈代谢(固定活细胞),也可以利用细胞中的酶进行酶促反应(固定死细胞)。本实验利用海藻酸钙凝胶包埋酵母生长细胞。第三张,PPT共十页,创作于2022年6月 固定化
2、细胞材料2.5海藻酸钠溶液20mL,加热助溶,冷至45备用。 配制50mL 1.5CaCl2。 20毫升注射器,150ml烧杯和50ml烧杯各一个、三角瓶、玻璃棒、温度计、镊子三、 实验材料和仪器第四张,PPT共十页,创作于2022年6月酵母细胞的活化取市售干酵母按1g投入到20ml 3638的温水中活化1520分钟,酵母细胞活化时体积会变大,活化前应该选择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。四、 实验方法和步骤第五张,PPT共十页,创作于2022年6月酵母细胞的固定化在冷却至4550左右海藻酸钠溶液中,加入5mL预热至35的酵母培养液,混合均匀。将混合液装入注射器中,装上大好
3、针头,以缓慢而稳定的速度将其滴入1.5CaCl2溶液中,边滴边摇动三角瓶,即可制得直径为3mm左右的凝胶珠。在CaCl2溶液中钙化30min,即可使用。四、 实验方法和步骤第六张,PPT共十页,创作于2022年6月 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环一定要溶解彻底,在溶解过程中不断搅拌,在降温过程中不能低于45 ,否则会凝固。 五、注意事项第七张,PPT共十页,创作于2022年6月 海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。 五、注意事项第八张,PPT共十页,创作于2022年6月 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形 成稳定的结构 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。
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