X小体和PAS整理教程文件

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。X小体和PAS整理-人类X小体的检测一实验原理1.X小体的本质：哺乳动物体细胞核中，除一条X染色体外，其余的X染色体发生异固缩，功能上处于失活状态，将其称为X小体（X染色质，性染色质，巴氏小体Barrbody），通常位于间期细胞核的核膜边缘，染色深而致密如：甲苯胺蓝人类正常的男女体细胞中，22对常染色体并无区别，但其性染色体分别为XY和XX。女性的两条X染色体中，有一条在间期呈现浓缩状态，可由适当的染料显示。正常女性口腔黏膜上皮细胞中X小体阳性率10-30%。2.X小体的数目：X小体的数目=X染色体数目

2、1正常女性细胞：2条X染色体，X小体的数目为1正常男性细胞：1条X染色体，X小体的数目为0。有三个X染色体者X小体的数目为23.莱昂假说（Lyonhypothesis）（1）正常雌性哺乳动物体细胞中的两个X染色体之一在遗传性状表达上是失活的。（2）X染色体的失活是随机但恒定的。失活的X染色体可来源于雌性亲本，也可来源于雄性亲本。（3）失活现象发生在胚胎发育的早期，一旦出现则从这一细胞分裂增殖而成的体细胞克隆中失活的都是同一来源的染色体4.剂量补偿（dosagecompensationeffect）女性有两条X染色体，但所表达的绝大部分遗传物质与只有1个X染色体的男性是一样多的。这种男女X连锁基

3、因产物相等的现象在遗传学上称为剂量补偿。5.X小体的应用（1）鉴定个体的性别胎儿细胞性染色体检查：羊水细胞，绒毛细胞，用于预防性染色体遗传性疾病的发生，优生。（2）诊断性染色体异常综合征克氏（Klinefelters）综合征，先天性睾丸发育不全综合征，患者为男性但有一个巴氏小体，核型是47，XXY。特纳氏（Turners）综合征，先天性卵巢发育不全综合征，患者为女性但却无巴氏小体，核型是45，XO。超雌：XXX,XXXY有2个巴氏小体等。二实验材料取材：女性口腔粘膜上皮细胞试剂：0.85%生理盐水，低渗液0.075MKCl，Carnoy固定液（甲醇冰乙酸3l，现配），5M盐酸，0.2%甲苯胺兰

4、染液耗材：牙签、离心管、载玻片、染色缸仪器：恒温水浴箱，离心机，光学显微镜三实验方法0.075MKCl1.取材：吸取5ml生理盐水于离心管中，漱口后用牙签钝端从口腔两侧颊部刮取女性口腔粘膜上皮细胞4-5次，置入离心管的生理盐水中洗脱下来，轻轻摇匀，1000r/min离心10min，弃上清。2.低渗：加入5ml预热的低渗液，轻轻混匀，37低渗10min。甲醇冰乙酸3l，现配（低渗液的作用：低渗处理是凭借反渗透作用使细胞膨胀染色体铺展，同时可使粘附于染色体的核仁物质散开，以便能在一个平面上观察所有染色体形态）3.固定：终止KCl进一步低渗（1）加入新鲜配制的Carnoy固定液1ml，混匀，室温预固

5、定2min，1000r/min离心8min，弃上清（2）加入固定液5ml，吹打混匀，室温固定15min，1000r/min离心10min，弃上清。（3）加入固定液0.5-1ml，混匀，制成细胞悬液。（固定液的作用：固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，使蛋白凝固，终止细胞代谢过程，并保持细胞核染色体结构的完整性，并且能够增强染色体的嗜碱性，达到优良的染色效果。）4.滴片：吸取细胞悬液自1020cm高垂直向下滴在一张预冷的载玻片上（2-3滴），标记，空气风干或烘干。（目的：从高处向下滴片，让液体分散开：形成细胞单层，使染色体分散，便于观察。用冰片：是降低液体的表面张力。）课件上是细胞壁，我觉得应该是

6、细胞膜5.水解：玻片放入盐酸缸中，室温水解10min后取出，自来水细水漂洗数秒钟，洗去多余盐酸，空气风干或烘干。（水解可除去细胞间的果胶质，使细胞壁软化或部分分解，从而使细胞和染色体易于分散，同时可去除杂质。）6.染色：玻片放入甲苯胺兰染液缸中，染色3min后取出，自来水细水漂洗数秒钟，空气风干或烘干。（甲苯胺兰是一种碱性染料，与细胞核蛋白（酸性）结合，染成紫蓝）7.镜检：低倍镜高倍镜。四注意事项1.取材前需用水漱口数次，尽可能除去细菌和食物残渣；用洁净的牙签钝端从口腔两侧颊部刮取粘膜，为防止后面的离心损耗，应尽量多取一些。2.弃上清时，用吸管吸取上清，弃去，接近下方沉淀时，应小心吸取。3.加

7、入低渗液后，轻轻混匀，不能太用力，以防核膜破裂。4.固定液使用前需临时配制，长时间放置影响固定效果。5.载玻片于临用前在-20度冰箱中取出，现用现取，以防温度上升。6.加热时应距离外焰一段距离（2-3cm），且来回摆动，以防过热引起断裂。五实验结果1.实验结果的观察：低倍镜：选择轮廓清楚，不重叠，染色清晰，核膜完整，核质中颗粒均匀的细胞，观察到细胞核后转到高倍镜下观察。高倍镜：观察X小体，大小约为1m，扁平状、椭圆形或三角形，浓染，紧贴于细胞核核膜边缘。2.X小体的形状：3.X小体的阳性率：正常女性口腔粘膜上皮细胞中X小体阳性率约10%30%男性偶尔可见，阳性率2%，且形态不典型。糖原的显色P

8、AS反应（PPT内容）石蜡切片法：以石蜡作包埋剂，用旋转切片机将标本切成薄片，经一系列处理制成永久切片是组织学常规制片技术中应用最广泛的一种方法制作过程：1.取材2.固定3.洗涤4.脱水5.透明6.浸蜡7.包埋8.切片9.贴片10.脱蜡复水11.染色12.脱水13.透明14.封片。（脱水的方法？透明所用的试剂？脱蜡复水的方法？HE染色原理？）取材：从人或动物体内取下所需组织或器官，材料必须新鲜，组织块不宜太大，以便固定剂穿透。固定：目的：迅速凝固蛋白质，终止细胞一切代谢过程，防止组织自溶，保持其活体时结构。固定剂：10%甲醛、80%酒精、混合固定剂（Bouin氏液、FAA液、Carnoy氏液）

9、。用量：必须充足，一般为材料块的2030倍。固定时间：数小时至24小时。洗涤：目的：除去留在组织内的固定液及其结晶沉淀，以免影响后面的染色效果。方法：多数用流水冲洗，少数用酒精。脱水：目的：固定或洗涤后的组织内充满水分，而水与石蜡不能互溶，所以必须将组织中的水分除去，才能进行石蜡包埋。脱水剂：酒精方法：从低浓度到高浓度梯度酒精脱水：30%50%70%80%90%95%100%各级酒精中放置1数小时。水酒精石蜡透明：目的：酒精与石蜡不相溶，还需用能与酒精和石蜡相溶的媒浸液，替换出组织内的酒精。组织在这类媒浸液中浸渍，出现透明状态，因此该过程称透明。透明剂：二甲苯。方法：酒精二甲苯等量混合液（1：

10、1）15分钟，二甲苯30分钟。水酒精二甲苯石蜡浸蜡：目的：除去组织中的透明剂，使石蜡渗透到组织内部，达到饱和程度以便包埋。方法：石蜡二甲苯等量混合15分钟，石蜡、石蜡各30分钟。浸蜡应在高于石蜡熔点3左右的温箱中进行，以利石蜡浸入组织内（石蜡的熔点在5060之间）。包埋：目的：将浸蜡后的组织块包埋于石蜡中。方法：取出组织块，置于盛有融化石蜡的包埋框中，迅速放入冷水中冷却，待石蜡完全凝固（约30min）后取出，即做成含有组织块的蜡块标本。切片：将蜡块装在切片机上，调整所需的切片厚度（410um），进行切片，切出一片接一片的蜡带，用刀片割开蜡带。贴片：目的：借助粘附剂将展平的蜡片粘附于载玻片上，以

11、免在以后的操作步骤中脱落。方法：在洁净的载玻片上涂抹薄层粘附剂（如多聚赖氨酸），滴两滴蒸馏水于载玻片上，把蜡片放于水滴上，略加温使蜡片铺展，将载玻片放入温箱中干燥。脱蜡复水：目的：染色液多数为水溶液，因此染色前必须将组织中的蜡脱去，才能进行染色。方法：与脱水浸蜡过程正好相反：二甲苯、30min100%酒精90%酒精80%酒精70%酒精蒸馏水各2min。石蜡二甲苯酒精水染色：目的：使细胞组织内的不同结构呈现不同的颜色以便于观察。经典的HE染色法：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）碱性染料酸性染料细胞核中的DNA、RNA等细胞质、膜性结构等嗜碱性物质（本身酸性）嗜酸性物质（本身碱性

12、）染成蓝色染成红色脱水透明封片:目的：去除水分，透明组织，便于观察和长期保存标本。方法：脱水：95%酒精2分钟100%酒精2分钟透明：二甲苯I2分钟二甲苯II2分钟封片：将载玻片从二甲苯中取出放在吸水纸，迅速地在切片的中间滴一滴中性树胶，拿起盖玻片，缓慢倾斜放下，避免产生气泡。其他制片技术：涂片（血涂片）铺片（肠系膜可用）磨片（骨）石蜡切片与冷冻切片：石蜡切片的制作相对比较复杂，而冷冻切片的制作相对简单，快。但是石蜡切片可以永久保存，而冷冻切片则不能。在考虑用哪一种方法时要看取材容不容易，是否保留等问题。组织化学技术（histochemistry）应用化学反应与物理反应原理检测组织或细胞内某种

13、化学成分，并进行定位、定量及相关功能研究的一种实验技术。免疫组织化学（immunohistochemistry）利用抗原（antigen,Ag），抗体（antibody）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。（标记物为荧光素、过氧化物酶或金颗粒）过碘酸-Schiff反应（periodicacidSchiffreaction,PAS反应）原理：PAS反应是经典的组织化学方法，用来显示组织细胞中的多糖或糖蛋白。原理是含有乙二醇基的糖类，在过碘酸的作用下，经氧化而产生双醛基，醛基进而与亚硫酸品红（Schiff试剂）结合，使无色液体变成紫红色染料，并沉着于含有多糖或糖蛋白的细胞或组织结构上

14、。PA（过碘酸）Schiff试剂（亚硫酸品红）乙二醇醛基紫红色沉淀（PAS阳性反应）氧化应用：可根据紫红色的位置及深浅鉴定糖成分的分布及相对含量，用于心血管疾病、糖尿病以及某些肿瘤的诊断和研究PAS染色的方法1.脱蜡，石蜡切片于染色前经二甲苯脱蜡30min2.复水，在浓度逐级降低的酒精内分别停留数分钟（100%90%80%70%）3.过碘酸氧化10分钟4.蒸馏水洗3分钟5.Schiff试剂避光染色10分钟6.0.5%偏重亚硫酸钠溶液浸洗3次（I、II、III），每次2分钟7.自来水洗3次，每次1分钟，蒸馏水洗1分钟8.苏木精染色1分30秒9.自来水洗3次，每次1分钟，蒸馏水洗1分钟10.梯度脱

15、水：95%酒精2分钟100%酒精2分钟，透明：二甲苯I2分钟二甲苯II2分钟11.中性树胶封片，显微镜下观察（低倍镜高倍镜）（结果：糖原颗粒被Schiff试剂染色呈紫红色，细胞核被苏木精染色呈蓝色，其他背景呈淡粉红色）观察的标本：肝和肺：脾+，肝+（PAS染色不仅对多糖染色，而且对糖蛋白也染色，脾有少量糖蛋白，呈弱阳性。而肝是糖类合成的部位，因此阳性强，且在肝血管周围呈放射状分布）肠道杆菌、霍乱弧菌、3种厌氧菌一.肥达反应原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型、乙型副伤寒沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应的抗体及其效价的试验。用于辅助诊断伤寒

16、和副伤寒（H抗原：鞭毛蛋白，不稳定。O抗原：LPS成分，稳定）方法：倍比稀释法：123456生理盐水0.50.50.50.50.50.5血清0.5（吹打）0.50.50.50.50.5（弃）菌液0.5ml/管，从第6管到第1管加，振匀水浴43度，2h最终血清1：401：801：1601：3201：640对照稀释度凝集强弱效价*吸管桶，试管锅,标签贴在试管上。结果判断：以出现+凝集的血清最高稀释倍数为该血清抗体效价O达到1：80，H达到1：160，H甲（PA）或H乙（PB）达到1：80或以上有诊断意义结合当地流行病学史、病程和抗体消长的意义进行判断。第6管均匀混浊少量凝集细菌部分沉于管底液体半澄

17、清凝集呈颗粒状大部分凝集，液体轻度混浊，凝集块较大全部凝集，液体澄清，大片凝集块针对O的抗体IgM,出现早，维持时间短，特异性差针对H的抗体IgG,出现迟，维持时间长，特异性强O高H高肠热症可能性大O低H低排除（也可能才感染23天）O高H低早期或有交叉反应的其它沙门菌感染O低H高预防接种或曾患过伤寒二.肠道杆菌的鉴定（形态相似，主要用生化反应和血清学反应进行鉴别）1.SS培养基成分：胆盐枸橼酸盐煌绿：可以抑制杂菌的生长乳糖：被非致病菌分解产酸蛋白胨：被致病菌分解产碱中性红：酸性环境下为红色，碱性环境下为黄色（作为SS培养基的指示剂）菌落红色乳糖发酵阳性，非致病菌菌落黄色乳糖发酵阴性，致病菌2.

18、双糖铁培养基成分：上层：酚红，乳糖，硫酸亚铁下层：酚红，葡萄糖，半固体（酚红为指示剂，在酸性的环境下为黄色）下层为半固体，若有气体产生，下层就会有空泡产生（固体难被压缩，气体产生不会有空泡）。上层为斜面，是固体培养基，可以使气体不被排出，起封闭作用。可用于观察葡萄糖发酵试验：若产酸，则下层为黄色，若产气，下层则有空泡出现乳糖发酵试验：若乳糖发酵试验阳性，则上层为黄色，反之则为红色硫化氢试验：若阳性，则产生的硫化氢与亚硫酸铁反应产生硫化铁而呈黑色(1).葡萄糖发酵试验：产酸不产气，乳糖发酵试验：阴性，硫化氢试验：阴性（双糖铁培养基有一定的局限性：沙门菌属和志贺菌属表现相似，不能区分，需用生化反应

19、管或肥达反应来进行鉴别）(2).葡萄糖发酵试验：产酸产气，乳糖发酵试验：阳性，硫化氢试验：阴性（大肠杆菌）(3).葡萄糖发酵试验：产酸产气，乳糖发酵试验：阴性，硫化氢试验：阳性（变形杆菌）3.生化反应管重要的生化反应与鉴别：蔗糖发酵试验：伤寒沙门菌属阳性葡萄糖试验：伤寒沙门菌属产酸产气，志贺菌属产酸不产气硫化氢试验阳性（黑色）和尿素酶试验阳性（大红色）：变形杆菌吲哚试验阳性（下层水溶，不红；上层脂溶，玫瑰红）：大肠杆菌生化反应表（+为产酸，0为产气）4.霍乱弧菌霍乱弧菌的形态：G-，弧形或逗点状，有菌毛，一端有单鞭毛（一般见不到，要在电镜或特殊染色的情况下才能看见）作活菌悬滴法置暗视野显微镜下

20、观察，可见细菌流星穿梭运动5.炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌的形态：致病菌中最大的G粗大杆菌,两端平切、排列呈竹节状；有荚膜，芽胞在有氧条件下形成，呈椭圆形，位于菌体中央（在实际的观察中，有的有芽胞，有的没有，而且芽胞的位置也各不相同）炭疽芽胞杆菌菌落形态：3035，在普通琼脂培养基上形成灰白色粗糙型菌落，边缘不整齐，在低倍镜下观察边缘呈卷发状6.厌氧菌（1）破伤风梭菌破伤风梭菌的形态：G；芽胞位于菌体顶端，大于菌体，使细菌呈鼓槌状；菌体细长，有周身鞭毛菌落：厌氧血平板上的羽毛状菌落培养基：疱肉培养基（牛肉）致病物质：破伤风痉挛毒素（2）产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌的形态：两端几乎平切的G粗大杆菌；芽胞

21、位于次极端，呈椭圆形，不大于菌体；在体内有明显的荚膜；无鞭毛生化反应：血琼脂平板上，双层溶血环（、毒素），“靶样溶血”两种毒素分别引起内环（完全）和外环（不完全）代谢活跃：高层琼脂断裂试验：半固体培养基，产气荚膜梭菌产生气体将琼脂网上冲，将塞子上顶疱肉培养基：分解肉渣中的糖类，产酸产气，肉渣淡红色（与破伤风梭菌相比，更活泼）牛乳培养基：汹涌发酵（分解乳糖产酸，牛奶中的酪蛋白凝固，同时产生大量的气体，冲散凝固的酪蛋白）（3）肉毒梭菌肉毒梭菌的形态：G；芽胞呈椭圆形，粗于菌体，位于次极端，使细胞呈汤匙状或网球拍状；有鞭毛，无荚膜支原体、衣原体、立克次体、螺旋体、病毒1.支原体：“油煎蛋样”菌落2.

22、沙眼衣原体：G-，专性细胞内寄生细胞外：原体（感染型）细胞内：始体（无感染型）发育周期：原体中间体始体原体包涵体：在易感细胞内含繁殖的始体和子代原体的空泡（镜下为大小不等的颗粒）3.立克次体：专性活细胞内寄生，在胞浆中分散存在4.螺旋体：（1）梅毒螺旋体：镀银染色，末端平直，尚不能在无生命的人工培养基上生长繁殖（密螺旋体，8到14个螺旋）（2）钩端螺旋体：镀银染色，末端钩状（3）回归热螺旋体：外周血涂片Giemsa染色，疏螺旋体（疏螺旋体，3到10个稀疏螺旋）5.病毒培养的方法：病毒动物接种法病毒鸡胚尿囊腔接种法病毒组织培养法病毒细胞培养6.CPE（致细胞病变作用）许多病毒在细胞内复制增殖中，

23、由于干扰细胞的正常代谢和损伤细胞结构，引起细胞形态的变化，如细胞皱缩，出现空泡、斑块、融合、变圆或坏死等现象，在光镜下可见。7.内基小体（Negribody）狂犬病毒在易感动物或人的中枢神经细胞中增殖时，可在细胞质内形成嗜酸性，圆形或椭圆形的包涵体。镜下观察：Giemsa染色，在神经元细胞核附近有均匀一致的红色团块（看不到颗粒），是病毒复制的证据，是病毒与神经元相互作用的结果。8.小鼠脑内接种脑炎病毒，乙肝病毒：鸭。HIV：猴9.病毒的鸡胚接种：不能注射入胚点（头部）与大血管，可注入卵黄囊，羊膜腔，尿囊10.病毒鸡胚尿囊腔接种培养法材料：910日龄鸡胚，新城鸡瘟病毒方法：接种（1）照蛋灯下划出

24、气室、接种点（避开大血管）（2）碘酒、酒精标记处消毒（3）打孔器打孔：先气室后接种部位（防止疝的发生）（4）注射器60度角插入鸡胚尿囊23毫米，注入病毒0.2毫升（5）石蜡封口：先接种部位后气室（6）鸡胚上标记：周，上/下午，室，姓名（7）37度孵箱培养，72小时收获消化道寄生吸虫和线虫线虫：似蚓蛔线虫（蛔虫）十二指肠钩口线虫，美洲板口线虫（钩虫）都不需要中间宿主，为土源性线虫毛首鞭形线虫（鞭虫）蠕形住肠线虫（蛲虫）吸虫：布氏姜片吸虫1.线虫概述：形态：雌雄异体（雌大雄小）圆柱长条形，不分节有原体腔或假体腔，内有体液消化系统和生殖系统发达（管状结构），雌性为双管型，雄性为单管型生活史：虫卵幼虫

25、成虫（蜕皮为幼虫最重要特征，一般4次）直接发育型（肠道线虫）和间接发育型（组织内寄生线虫）2.蛔虫生活史：受精卵排出后发育成感染期卵，经口进入小肠，移行至肺后再到小肠发育为成虫（1）成虫：活：淡红色或微黄色。死：灰白色雌虫雄虫大小尾端钝圆尾部向腹面卷曲有交合刺1对，镰刀状特点：头顶端有三叉形口孔，周围为3个唇瓣，呈品字形（2）受精卵与未受精卵的比较鉴别点受精卵未受精卵形状宽椭圆形长椭圆形大小稍小（高倍镜）稍大（高倍镜）颜色通常被胆汁染成棕黄色卵壳受精膜壳质层蛔甙层表面为一层凹凸不平的蛋白质膜（脱去蛋白膜后，卵壳无色透明）薄无薄内容受精卵细胞两端与卵壳间形成新月形空隙大小不等的屈光颗粒生活史：（

26、1）感染阶段：感染性蛔虫卵（含二期幼虫的虫卵）（2）感染途径与方式：通过污染食物、饮水，经手-口途径感染（3）寄生部位（成虫）：小肠（4）致病阶段：成虫、幼虫（5）体外发育：虫卵含幼虫虫卵卵内幼虫蜕皮1次含二期幼虫的虫卵（6）体内移行：口小肠门静脉肝脏右心肺脏（蜕皮2次）气管咽食管胃小肠（第4次蜕皮）2.钩虫生活史：虫卵第一期杆状蚴第二期杆状蚴感染期丝状蚴（向温向湿性）主要的感染途径：经皮肤移行过程：先经毛细血管或淋巴管到右心肺，再到小肠两种成虫的鉴别（由于两种钩虫的结构相似，因此不能根据虫卵鉴定虫种）鉴别点十二指肠钩虫美洲钩虫大小较大较小体形呈C形呈S形口囊2对钩齿1对板齿交合伞略圆，背辐肋

27、2、3分支略呈扇形，背辐肋2、2分支交合刺2根，末端分开一根末端形成倒钩，与另一根末端合并钩虫虫卵椭圆形；壳薄，无色透明；内含24个卵细胞；卵壳与卵细胞之间有明显的空隙（与脱去蛋白质膜的蛔虫卵进行鉴别）3.蛲虫蛲虫特殊的地方：多盲肠寄生；雌雄虫交配后，雄虫会死亡产卵部位：在肠外，肛周产卵蛲虫卵不需要在土壤中孵化，而是在肛周，且孵化时间短（6h）儿童聚集处易发可以通过呼吸道吸入感染（蛲虫卵轻，可以在空气中漂浮）成虫：细小，乳白色，线头状虫卵：略呈椭圆形，一侧较平，一侧稍凸，柿核状；无色透明；卵壳厚；卵内含有一个发育至蝌蚪期的胚4.鞭虫（简单）雌虫：尾钝圆雄虫：尾卷曲成虫的虫体都是前细后粗，似马鞭

28、虫卵的形态：腰鼓状，黄褐色，两端各有一个透明栓，内含一个卵细胞5.布氏姜片吸虫布氏姜片吸虫：雌雄同体生活史：成虫寄生于小肠，虫卵（在水中发育），毛蚴，经中间宿主扁卷螺发育为胞蚴，母雷蚴，子雷蚴，尾蚴，在水生植物媒介（菱角，荸荠）上形成囊蚴（感染阶段）成虫不需要在镜下观察，肉眼观察即可（最大吸虫）主要观察的结构有：口吸盘，腹吸盘，肠支，子宫卵巢，睾丸（前后排列高度分支状）虫卵：最大的蠕虫卵；椭圆形；淡黄色；卵壳薄而均匀，卵盖小，不明显；饱满，内含卵细胞1个，卵黄细胞2030个消化道寄生原虫和绦虫1.溶组织内阿米巴致病：在结肠内会导致阿米巴结肠炎（阿米巴痢疾），在结肠外会导致肠外脓肿（肝，肺脑）生

29、活史：好发部位：常见盲肠、升结肠，次为乙状结肠和直肠感染期：四核包囊（成熟包囊）感染方式：经口感染，吃入四核包囊污染的食物、水致病阶段：滋养体滋养体和包囊未成熟包囊：存在成熟包囊没有的结构，糖原泡和拟染色体成熟包囊：有4个圆形核，囊壁厚病原学诊断成形便碘液染色法查包囊，确定带虫者脓血便生理盐水涂片法查滋养体，注意保温，确诊患者铁苏木素染色法查滋养体和包囊体外培养查滋养体（溶组织内阿米巴和迪斯帕内阿米巴的包囊极其相似，在镜下难以区分）2.结肠内阿米巴为腔道共栖原虫，一般不侵入人体组织，没有临床症状结肠内阿米巴与溶组织内阿米巴的区别比较溶组织内阿米巴结肠内阿米巴外形圆球形圆球形大小小大核数14个1

30、8个拟染色体棍棒状，两端钝圆草束状或碎片状3.蓝氏贾第鞭毛虫病致病：会导致“旅行者腹泻”生活史：演变过程：包囊（四核），滋养体，包囊感染期：包囊寄生部位：十二指肠或上端小肠滋养体和包囊的形态滋养体：好辨认包囊：有4个细胞核和轴丝病原学诊断：粪便检查：生理盐水涂片法查滋养体碘液涂片法查包囊（包囊形成有间歇性特点，需隔日检查一次，连续3次以上）4.隐孢子虫生活史：3个阶段：裂体增殖（无性繁殖）、配子增殖、孢子增殖（有性繁殖）经过的阶段：卵囊，子孢子，滋养体，裂殖体，配子体，配子，合子寄生部位：小肠上皮细胞的刷状缘纳虫空泡内感染阶段：卵囊厚壁卵囊和薄壁卵囊：厚壁卵囊：随宿主粪便排出体外薄壁卵囊：子孢

31、子逸出，造成宿主自身体内重复感染形态：卵囊呈圆形或椭圆形，直径4-6m成熟卵囊含4个裸露的子孢子和一团由颗粒组成的残留体，子孢子月芽形，含1个核（抗酸染色）5.猪肉绦虫和牛肉绦虫猪帯绦虫牛帯绦虫寄生部位成虫：小肠上端囊尾蚴：脑，眼，皮下及肌肉小肠终宿主人人中间宿主猪，人牛，羊感染阶段囊尾蚴，虫卵（成虫和囊尾蚴致病）囊尾蚴（成虫致病，囊尾蚴不致病）囊尾蚴感染方式人吃进生的或半生的含囊尾蚴的猪肉人吃进生的或半生的含囊尾蚴的牛肉虫卵感染方式异体感染自体外感染自体内感染不感染人体形态：成虫：乳白色、长而扁、带状、分节，雌雄同体由头节、颈节和体节（幼节、成节、孕节）三部分组成虫卵：六钩蚴囊尾蚴两种绦虫形

32、态的鉴别猪帯绦虫牛帯绦虫体长长更长节片数目多更多头节有顶突和小钩无顶突和小钩成节卵巢3叶卵巢2叶孕节子宫分支每侧7-13支每侧约15-30支囊尾蚴寄生人体,引起囊虫病不寄生人体消化道（胃和肠）及肝的组织学和病理学一胃胃的四层结构：粘膜（上皮层，固有层，黏膜肌层）粘膜下层肌层外膜（1）粘膜：纵行的皱襞胃小区胃小凹上皮：单层柱状上皮（表面粘液细胞为主）功能：细胞间紧密连接，分泌含高浓度的HCO3的不可溶性粘液固有层：胃底腺（最重要）贲门腺幽门腺胃底腺的主要细胞：主细胞壁细胞颈粘液细胞内分泌细胞（主细胞与壁细胞的区分）主细胞壁细胞形状柱状大，圆或圆锥形染色性弱嗜碱性明显的嗜酸性功能分泌胃蛋白酶原分泌

33、胃酸，内因子壁细胞：分泌小管，微管泡系统，丰富的线粒体幽门腺：还有G细胞，产生胃泌素粘膜肌层（2）粘膜下层：血管和结缔组织（3）肌层：内斜，中环，外纵环形肌在贲门和幽门部增厚，形成贲门、幽门括约肌（4）外膜：浆膜二小肠小肠的四层结构：粘膜粘膜下层肌层外膜（1）粘膜：环形的皱襞肠绒毛微绒毛（形成纹状缘）肠绒毛（十二指肠：叶状空肠：长指状回肠：锥体形）上皮：单层柱状上皮：主要有吸收细胞、杯状细胞、少量的内分泌细胞（小肠腺上皮还有Paneth细胞干细胞）吸收细胞：高柱状消化吸收分泌IgA和肠致活酶（十二指肠和空肠的上端）杯状细胞：分泌粘液，从十二指肠至回肠末端逐渐增多Paneth细胞：分泌防御素（隐

34、窝素）、溶菌酶形态特点：位于小肠腺的底部，三五成群，嗜酸性内分泌细胞固有层：大量的小肠腺丰富的淋巴细胞，浆细胞，巨噬细胞，嗜酸性粒细胞，肥大细胞，平滑肌细胞中央乳糜管淋巴小结（十二指肠和空肠：孤立。回肠：集合）M细胞：位置：在肠集合淋巴小结处，局部粘膜向肠腔呈圆顶状突起，无绒毛和小肠腺，此部位上皮内有散在的微褶皱细胞即M细胞形态：基底面质膜内陷形成较大的穹窿状凹腔，内含多个淋巴细胞功能：摄取肠腔抗原，发挥免疫功能粘膜肌层：内环外纵（2）粘膜下层：较多的血管和淋巴管（十二指肠的粘膜下层还有十二指肠腺，可以分泌粘稠的碱性粘液和表皮生长因子）（3）肌层：内环外纵（4）外膜：部分十二指肠为纤维膜（腹膜

35、外位器官），余均为浆膜（腹膜内位器官）三大肠（盲肠、结肠、直肠）（与小肠相比较）（1）粘膜（与大肠相比较）小肠大肠粘膜有皱襞有绒毛形成纹状缘有皱襞无绒毛不形成纹状缘上皮单层柱状上皮主要是吸收细胞，杯状细胞单层柱状上皮主要是吸收细胞，杯状细胞固有层小肠腺有Paneth细胞没有Paneth细胞大肠腺的特点：长、直、多，粗大量的杯状细胞（分泌粘液，保护粘膜）粘膜肌层相同（2）粘膜下层（3）肌层：内环外纵（增厚分别形成结肠袋和结肠带）（4）外膜：浆膜：盲肠、横结肠、乙状结肠升降结肠前壁直肠上1/3段大部，中1/3段的前壁其余都为纤维膜四肝1.肝小叶（人的肝小叶分界不清）中央静脉+肝细胞（肝板，肝索）+

36、肝血窦+胆小管2.门管区小叶间动脉+小叶间静脉+小叶间胆管小叶间胆管与血管的区别：胆管：内皮细胞为单层柱状或立方形血管：静脉腔大壁薄，动脉壁厚（多层）血流的方向：从小叶的周边到中央静脉五病理切片1.胃溃疡分为四层：渗出层坏死层肉芽组织瘢痕层渗出层在切片上不易见到；坏死层没有特定的结构；肉芽组织有新生血管，炎细胞，纤维母细胞2.慢性萎缩性胃炎：粘膜萎缩腺体减少，化生淋巴组织3.慢性肝炎：（可见肝细胞变性坏死的多种表现）（1）肝细胞水肿：胞浆疏松化（2）气球样变：胞浆几乎完全透明（3）毛玻璃样肝细胞（4）嗜酸性变、嗜酸性坏死（嗜酸性小体）（5）炎细胞浸润（单核细胞，Kupffer细胞，浆细胞等）（

37、6）坏死带4.肝硬化（1）假小叶的形成，肝细胞团（2）中央静脉偏位或缺如（3）炎症细胞5.急性重型肝炎（发病快，死亡快）（1）肝体积迅速减小（2）大面积坏死（大块坏死），但网状结构还好（3）再生肝结节的特点：肝细胞有双核，但很少不足以代偿坏死的肝细胞（残留的活的肝细胞很少有双核）（4）有胆汁的淤积以及血窦的扩张和充血（急性黄色肝萎缩、急性红色肝萎缩）6.亚急性重型肝炎（1）有明显的坏死（亚大块坏死）（2）有明显的结节状再生，有一定的代偿能力。（与急性重型肝炎相区分）（3）有胆汁的淤积7.肝癌肝小叶的特征：形态不一，存在瘤巨细胞（双核或四核）六大体标本1.食管癌（蕈伞状食管癌、溃疡型癌）2.胃溃

38、疡（胃溃疡良恶性的区分即溃疡型胃癌与胃溃疡的区分，病理书P244）十二指肠溃疡小于1cm3.溃疡型胃癌革囊胃（胃腔小，会导致反复呕吐）4.直肠癌，与结肠癌相似，菜花状恶性高溃疡型结肠癌缩窄型结肠癌（常会导致肠梗阻）5.急性重型肝炎（体积明显缩小，尤其是在左叶，有急性黄色肝萎缩和急性红色肝萎缩，若存活，可恢复正常）6.亚急性重型肝炎（表面不光滑，有许多的结节，不能恢复正常，可能发展为坏死后肝硬化）7.小结节型肝硬化不完全分隔型肝硬化8.食管静脉曲张（肝硬化的并发症之一）9.小肝癌（注意小肝癌的定义，病理书P261，通常伴有肝硬化）巨块型肝癌弥漫型肝癌（难与肝硬化区分，可见瘤栓，是肝内转移的表现）

39、泌尿生殖系统的组织学和病理学一.肾脏实质性脏器：被膜+皮质+髓质被膜：红染，薄皮质：线条样的结构为髓放线，髓放线之间为皮质迷路，之中有肾单位髓质：有许多管血管球：细胞聚集成团，包括内皮细胞，系膜细胞，足细胞肾小体（入球微动脉粗，出球微动脉细）肾单位：肾小囊：囊腔中有原尿，分脏层（足细胞）和壁层（单层扁平）肾小管如何在切片上区分近端小管和远端小管？近端小管：细胞的胞质嗜酸性，染色较深，界限不清，内表面的刷状缘在制片时被破坏，比较毛糙远端小管：胞浆的染色较近端小管淡，界限较清，管腔大球旁细胞（由入球微动脉管壁中膜的平滑肌细胞转变而成）球旁复合体致密斑（远端小管靠近肾小体一侧，细胞高柱状，核椭圆，排

40、列紧密）球外系膜细胞（位于入球微动脉、出球微动脉和致密斑三者之间）二.睾丸实质性脏器：被膜（白膜，厚）生精小管的各个不同的切面生精上皮：生精细胞+支持细胞生精小管界膜，生精小管之间为间质（间质中有间质细胞，分泌雄激素）生精细胞：精原细胞+初级精母细胞+次级精母细胞+精子细胞+精子（由于次级精母细胞存在的时间比较短，因此在切片上一般是看不见的）精原细胞：紧靠界膜初级精母细胞：存在的时间比较长，粗线期常见，细胞体积最大（核大）染色质缠绕形成毛球状精子细胞：核最小，圆形，致密，染色深精子：变形中的精子：长形，延伸拉长，核高度浓缩完成变形的精子：小，呈梭形，头部在支持细胞的胞质中（残余体被支持细胞所吞

41、噬）精子的尾部在管腔内缠绕成絮状支持细胞：高，但是在由于制片的原因，在切片中不见其胞质，根据细胞核来进行判断染色与生精细胞相比稍淡，并非规则的圆形，核仁明显（能合成蛋白的细胞核仁明显）支持细胞内镶嵌着各级生精细胞间质细胞：核正圆，属于内分泌细胞，分泌类固醇激素，因此胞质嗜酸性在电镜下可以看见脂滴和线粒体三.卵巢实质性脏器：被膜（薄）+皮质（不同时期的卵泡）+髓质（结缔组织和血管神经）切片中成熟的卵泡不易见到卵泡的共同结构：卵母细胞（一个）+卵泡细胞（很多）原始卵泡：靠被膜的下方，体积小。初级卵母细胞占了绝大部分，卵泡细胞小，单层扁平初级卵泡：在较深层，卵母细胞的体积增大卵泡细胞由扁平变为柱状，单层变为多层，并出现透明带次级卵泡：出现了卵泡腔（腔中为卵泡液）形成卵丘（透明带周围为放射冠，高柱状，其余为颗粒层）由于切片时可能没有切到卵丘而呈现空泡状闭锁卵泡：卵泡在较早阶段退化：卵母细胞和卵泡细胞都退化引起透明带塌陷，皱缩在一起，染色红卵泡在较晚阶段退化：卵母细胞退化，卵泡细胞层数多，卵泡性状可维持一段时间与黄体类似，称为假黄体（有透明带，黄体则没有）也有可能没有切到透明带而类似黄体四.子宫管腔样脏