物质的跨膜运输教程

1、物质的跨膜运输教程第五章 物质的跨膜运输 在污水处理时，人们设计了一种膜结构，将有毒重金属离子阻挡在膜的一侧，以降低有毒重金属对水的污染，请问这是为什么？讨论： 细胞膜是细胞与细胞外环境之间的一种选择性通透屏障，它既能保障细胞对基本营养物质的摄取、代谢废物的排除和细胞内离子浓度的调节，又能使细胞维持相对稳定的内环境。因此，物质的跨膜运输对细胞的生存和生长至关重要。第一节 物质跨膜运输 物质通过细胞膜的运转主要有三种形式： 被动运输（passive transport） 主动运输（active transport） 胞吞（endocytosis）与胞吐作用（exocytosis）一、被动运输（p

2、assive transport）概念：通过简单扩散或协助扩散实现物质由高浓度向低浓度方向的跨膜转运。转运的动力来自物质的浓度梯度，不需要细胞提供代谢能量。 类型：膜转运蛋白：简单扩散（simple diffusion）协助扩散（facilitated diffusion）载体蛋白（carrier proteins）通透酶（permease）性质；介导被动运输与主动运输。 通道蛋白（channel proteins）具有离子选择性，转运速率高；离子通道是门控的；只介导被动运输。电压门通道（voltage-gated channel）配体门通道（ligand-gated channel）压力激活

3、通道（stress-activated channel）类 型 物质（如疏水的小分子或小的不带电荷的极性分子）顺浓度梯度跨膜转运 不需要能量不需要膜蛋白1、简单扩散（simple diffusion） 不同的小分子物质跨膜转运的速率差异极大，即不同分子的通透系数不同。如O2 、N2和苯等极易通过细胞膜，水分子也比较容易通过，尿素的通透性比水分子低100倍。通透性主要取决于分子大小和分子的极性 小分子比大分子容易穿膜， 非极性分子比极性分子容易穿膜， 无蛋白的人工脂双层对带电荷的离子是高度不透的。 具有极性的水分子容易穿膜可能是因水分子非常小，可以通过自由膜脂运动而产生的间隙。 物质（各种极性分

4、子和无机离子，如糖、氨基酸、核苷酸以及细胞代谢等）顺浓度梯度或电化学梯度跨膜转运 不需要能量 需膜蛋白协助 2、协助扩散（facilitated diffusion）（1）概念 葡萄糖分子当以简单扩散方式穿越细胞膜时，其通透系数为10-7 cm/s。当以协助扩散方式穿越红细胞膜时其通透系数为10-2 cm/s，增加了5倍。 1）转运速率高。 2）存在最大转运速率（Vmax），因此，可用达到最大转运速率一半时的浓度作为Km值，用以衡量某种物质的转运速率。 3）比较不同分子的Km值，可以看出转运的特异性，如红细胞质膜，D构型的葡萄糖Km为1.5mmol/L，而L构型的葡萄糖Km值3000mmol/

5、L。 4）细胞膜上存在膜转运蛋白，负责无机离子和水溶性有机小分子的跨膜转运。（2）协助扩散特征简单扩散与协助扩散的比较图示载体蛋白通过构象改变介导溶质（葡萄糖）被动运输的假想模式 膜上的载体蛋白以两种构象状态存在：状态A时，溶质结合位点在膜外侧暴露。状态B时，同样的溶质结合位点在膜内侧暴露。该模型认为，两种构象状态的转变是随机发生而不依赖于是否有溶质结合和是否完全可逆，假如溶质浓度在膜外侧高，则状态A状态B的转换比状态B 状态A的转换更常发生，因此溶质顺浓度梯度进入细胞。（3）膜转运蛋白 载体蛋白 通道蛋白形成跨膜亲水通道，介导的被动运输不需要与溶质分子结合，允许适宜大小的分子和带电荷的离子通

6、过。 已发现100多种通道蛋白。 绝大多数通道蛋白形成有选择性开关的多次跨膜通道。 通道蛋白几乎都与离子的转运有关，故又称离子通道。 通道蛋白 离子通道对被转运的离子的大小与电荷都有高度的选择性，而且转运速率高。可达106个离子，其速率是已知任何一种载体蛋白的最快速率的1000倍以上。驱动带电荷的溶质跨膜转运的净驱动力来自两种力的合力，一种是溶质的浓度梯度，另一种是跨膜电位差，这种净驱动力构成溶质跨膜的电化学梯度，这种梯度决定溶质跨膜的被动运输方向。A. 离子选择性：通道蛋白特征 即离子通道的活性由通道开或关两种构象所调节，并通过通道开关应答于适当的信号。 多数情况下，离子通道呈关闭状态，只有

7、在膜电位变化、化学信号或压力刺激后才开启形成跨膜的离子通道。因此离子通道又可区分为电压门通道、配体门通道、压力门激活通道。B. 离子通道是门控的离子通道典型定位功 能K+ 渗漏通道大多数动物细胞的质膜维持静息电位电压门Na+通道神经细胞轴突的质膜介导产生动作电位电压门K+通道神经细胞轴突的质膜起始动作电位后使膜恢复静息电位电压门Ca2+通道神经终末的质膜刺激神经递质释放，将电信号转换为化学信号乙酰胆碱受体（乙酰胆碱门Na+和Ca2+通道）肌肉细胞的质膜（神经-肌肉接头处）兴奋性突轴信号传递（在靶细胞将化学信号转换为电信号）GABA受体（GABA门Cl-通道）许多神经元的质膜抑制性突触信号传递压

8、力激活的阳离子通道内耳听觉毛细胞检测声音震动 离子通道举例三种基本类型 ATP直接供能的主动运输 间接提供能量的主动运输 光能驱动的主动运输二、主动运输（active transport） 1、概念： 2、类型： 由载体蛋白所介导的物质逆浓度梯度或电化学梯度由浓度低的一侧向高浓度的一侧进行跨膜转运的方式。转运分子的自由能变化为正值，因此需要与某种释放能量的过程相偶联。 钠钾泵 （结构与机制） 钙泵（Ca2+-ATP酶） 质子泵：P-型质子泵、V-型质子泵、H+-ATP酶 Na+-K+ 泵由和二个亚基组成， 亚基的Mr为120 x103，是一个跨膜多次的整合膜蛋白，具ATP酶活性。 亚基Mr为5

9、0 x103，是具组织特异性的糖蛋白。（1）由ATP直接提供能量的主动运输1）钠钾泵（又称Na+-K+ ATP酶）（结构与机制） 结构： 在细胞内侧， Na+与亚基相结合促进ATP水解， 亚基上的一个天门冬氨酸残基磷酸化引起亚基构象发生变化，将Na+泵出细胞，同时细胞外的K+与亚基的另一位点结合，使其去磷酸化，亚基构象再度发生变化将K+泵进细胞，完成整个循环。 Na+ 依赖的磷酸化和K+依赖的去磷酸化引起构象变化有序交替发生，每秒钟可发生1000次左右构象变化。每个循环消耗一个ATP分子，泵出3个Na+ 和泵进2个K+ 。 极少量的乌本苷可抑制Na+-K+ 泵活性，而Mg2+和少量的膜脂有助于

10、Na+-K+ 泵活性的提高。生物氧化抑制剂如氰化物使ATP供应中断，可使Na+-K+ 泵因失去能源而停止工作。 工作机制： Na+-K+泵存在于一切动物细胞的细胞膜上。红细胞表面约有250个Na+-K+泵单位，密度为1-2个/um2，其他细胞中，Na+-K+泵为103个/um2左右，动物细胞靠ATP水解供能驱动Na+-K+泵工作，结果造成质膜两侧的Na+、K+不均匀分布，有助于维持动物细胞的渗透平衡（胞外水分可向细胞渗透而使细胞膨胀甚至破裂，动物细胞借助于Na+-K+ 泵维持渗透平衡）。 植物细胞以其坚韧的细胞壁防止膨胀和破裂。 Na+-K+泵工作意义：动物细胞通过泵出离子维持细胞内低浓度溶质

11、。植物细胞依靠细胞壁避免膨胀和破裂。C. 原生动物通过收缩胞定时排出进入细胞过量的水而避免膨胀。细胞以三种不同的机制避免渗透膨胀 Ca2+泵是由1000个氨基酸残基组成的多肽构成的跨膜蛋白。Mr100 x103,与Na+-K+泵的亚基同源，每一泵单位中有约10个跨膜螺旋。 细胞内钙调蛋白与Ca2+泵结合调节Ca2+泵活性。 Ca2+泵工作与ATP水解相偶联，每消耗一个ATP分子转运出2个Ca2+。2）钙泵（Ca2+-ATP酶） Ca2+泵主要存在于细胞膜和内质网膜上，它将Ca2+输出细胞或泵进内质网腔中储存起来，以维持细胞内低浓度的游离Ca2+（一般细胞内约10-7mmol/L，细胞外为10-

12、3mol/L ）。 Ca2+泵在肌质网内储存Ca2+，对调节肌细胞的收缩与舒张至关重要。分类： P-型质子泵、V-型质子泵、H+-ATP酶。3）质子泵 P-型质子泵结构与Na+-K+泵和Ca2+泵类似，在转运H+的过程中涉及磷酸化和去磷酸化，存在于真核细胞的细胞膜上。存在于线粒体内膜、植物类囊体膜和多数细菌质膜上，以相反方式发挥其生理作用，即H+顺浓度梯度运动，将所释放的能量与ATP合成偶联起来，如线粒体氧化磷酸化和叶绿体的光和磷酸化作用，称H+ -ATP酶更为合适。V-型质子泵H+泵存在于动物细胞溶酶体膜和植物细胞液泡膜上，转运H+过程中不形成磷酸化的中间体，其功能是从细胞质基质中泵出H+进

13、入细胞器，有助于保持细胞质基质中性pH和细胞器内的酸性pH 。 植物细胞、真菌（包括酵母）和细菌的细胞膜上没有Na+-K+泵，而为H+泵，将H+泵出细胞，建立跨膜的H+电化学梯度（取代动物细胞Na+的电化学梯度），驱动转运溶质进入细胞。例如，细菌细胞对糖和氨基酸的摄入主要是由H+驱动的同向运输完成的。在这一过程中，H+泵产生细胞周围基质中的酸性pH。在一些光合细菌中，H+电化学梯度由光驱动的H+泵（如细菌视紫红质）活性建立。 它是一个跨膜7次的膜蛋白，其中两个极性的氨基酸侧链（球状体）可能与质子的转移有关细菌紫膜质分子的三维结构由Na+-K+泵（或H+-泵）与载体蛋白协同作用，靠间接消耗ATP

14、所完成的主动运输方式。（2）间接提供能量的主动运输 协同运输1）协同运输（cotransport）概念：2）类型：共运输对向运输小肠上皮细胞和肾小管上皮细胞吸收葡萄糖或转运氨基酸等有机物伴随Na+从细胞外流入细胞内，完成共运输的载体蛋白有两个结合位点，必须同时与Na+和特异的氨基酸或葡萄糖分子结合才能进行共运输。 共运输：物质运输方向与离子转运方向相同。例如：对向运输：动物细胞常通过Na+驱动的Na+-H+对向运输的方式来转运H+以调节细胞内的pH 。物质跨膜运输的方向与离子转运方向相反。例如：不分裂的细胞： pH 分裂细胞： pH =细胞中H+的减少主要由细胞膜上的Na+-H+交换载体完成，

15、即H+输出伴随Na+进入细胞。 线粒体中， Na+-H+对向运输是由H+电化学梯度驱动的，将Na+由线粒体内膜的基质一侧转运到出来。完成大分子与颗粒性物质的跨膜运输，又称膜泡运输或批量运输（bulk transport），涉及膜的断裂与融合，需要消耗能量，属于主动运输。三、胞吞与胞吐作用 1、特点通过细胞膜内陷形成胞吞泡，将外界物质裹进并输入细胞的过程。分为胞饮作用和吞噬作用两类。 2、胞吞作用（endocytosis）特征 胞吞泡大小不同 转运物质的方式不同 胞吞泡形成机制不同 胞饮作用 小于150nm 连续摄入溶液和分子，摄入是一个连续发生的过程 胞饮泡的形成需网格蛋白，形成有被小泡及与接

16、合素连接吞噬作用 大于250nm 需受体介导的信号触发过程 需要微丝及其结合蛋白参与 主要有三点区别：（1）胞饮与吞噬的主要区别 网格蛋白是由一重链和一轻链组成的二聚体，三个二聚体形成组成包被的结构单位三脚蛋白复合物。当配体与膜上的受体结合后，网格蛋白聚集在膜下的一侧，逐渐形成直径为50-100nm的质膜内陷，称为网格蛋白有被小窝。一种小分子GTP结合蛋白（ dynamin ）在深陷有被小窝的颈部装配成环，dynamin蛋白水解与其结合的GTP引起颈部缢缩，最终脱离质膜形成网格蛋白有被小泡。几秒钟后，网格蛋白便脱离包被小泡返回质膜附近重复使用，去被的囊泡与早期胞内体（early endosom

17、e）融合，将转运分子与部分胞外液体摄入细胞。 在大分子跨膜转运中，网格蛋白本身并不起捕获特异转运分子作用，有特异性选择作用的是接合素蛋白（adaptin），它既能结合网格蛋白，又能识别跨膜受体胞质面的尾部肽信号（peptide signal），通过网格蛋白包被小泡介导跨膜受体及其结合配体的选择性运输。 接合素蛋白也至少有两类：一类与网格蛋白结合，负责受体介导的内吞作用；另一类也与网格蛋白结合，但负责高尔基体向溶酶体的膜泡运输。 在膜泡运输中，包被蛋白除网格蛋白外，还有一类包被蛋白称为COP蛋白，形成的包被小泡称为COP蛋白包被小泡（COP-coated vesicle），后者介导内质网和高尔基

18、体之间非选择性的膜泡运输。如果用降解微丝的药物（细胞松弛素B）处理细胞，则可阻断吞噬泡的形成，但胞饮作用仍继续进行。 吞噬泡的形成则需要微丝+结合蛋白（2）受体介导的内吞作用及包被的组装 根据内吞的物质是否有专一性，可将内吞作用分为受体介导的内吞作用和非特异性的内吞作用。 受体介导的内吞作用是大多数动物细胞通过网格蛋白包被小泡从细胞外液摄取特定大分子的有效途径。 受体介导的内吞作用是一种选择浓缩机制，既可保证细胞大量地摄入特定的大分子，同时又避免了吸入细胞外大量的液体，与非特异性的内吞作用相比，可使特殊大分子的内化效率增加1000多倍。LDL的受体介导的内吞作用 LDL通过与细胞表面的低密度脂蛋白受体特异地结合形成受体-LDL复合物，几分钟内便通过网格蛋白包被小泡的内化作用进入细胞，经脱被作用并与胞内体（endosome）融合。 胆固醇主要在肝细胞中合成，随后与磷脂和蛋白质形成复合物，即低密度脂蛋白（low-de