实验设计：糖皮质激素在应激反应中的作用

1、实验题目：糖皮质激素在应激反应中的作用一.原理 .（1）糖皮质激素主要由肾上腺皮质束状带细胞分泌。糖皮质激素主 要有皮质醇（cortisol）和皮质酮（corticosterone），在人以皮质 醇为主。肾上腺皮质激素主要在肝脏进行代谢，代谢产物随尿液排出 体外。肝脏中存在11-HSDo 11-HSD1可以使组织中活性糖皮质激素的 水平增高，加强糖皮质激素的作用；而11-HSD2则降解糖皮质激素。（2）糖皮质激素参与应激反应。机体遭遇内、外环境和社会、心理 等伤害刺激时（如创伤、严重感染、高温、高寒、消耗性疾病、强烈 精神刺激、精神紧张等），垂体一肾上腺皮质轴被激活，促肾上腺皮 质激素（ACT

2、H ）和糖皮质激素分泌增加，出现非特异性的适应反应， 称为应激反应（stress reaction）。应激反应与刺激的性质无关， 任何伤害的刺激达到一定强度都可引起应激反应。而应激反应又可以从以下几个方面调节机体的适应能力：减少应激刺激引起的一些物质（缓激肽、蛋白水解酶及前列腺素 等）的产生量及其不良作用，稳定细胞膜和溶酶体膜。促进脂肪和蛋白质代谢，促进糖异生，使能量代放运转以糖代谢 为中心，降低外周组织葡萄糖利用，维持血糖平衡，保持葡萄糖 对重要器官（如脑和心）的供应；在维持血压方面起允许作用，增强儿茶酚胺对血管的调节作用，是心肌收缩力加强，血压升高。一定强度的应激性刺激引起的应激反应是机体

3、的适应性和防御 性反应，可提高机体对伤害性刺激的耐受力；然而，强烈或持久的应 激刺激引起机体过强的应激反应，对机体可造成伤害，甚至导致应激 性疾病，如严重创伤、大面积烧伤、大手术等引起的应激性溃疡等。 二目的：探究糖皮质激素在应激反应中的作用。三实验对象：大白鼠 四验器材和药品：哺乳动物手术器械一套，蛙板、生理盐水、蒸馏水、盛有冰水的面盆、 注射器、10%的水合氯醛、碘酊、酒精、地塞米松等。五.试验步骤配置10%的水合氯醛溶液：称取10克水和氯醛，用蒸馏水溶解， 再用蒸馏水稀释到100毫升，就得到10%水合氯醛溶液。选取已禁食一夜的体重相同、生理状况和健康状况相近且经测试游 泳技能近似的30只

4、大白鼠，分为A、B、C三组，每组10只将全部大鼠腹腔注射10%的水合氯醛，按照0.3ml/100g个剂量注 射。3到5分钟后可通过麻醉指征观察麻醉是否麻醉好。待大鼠麻醉 后，仰卧并固定在蛙板上。手术：对A组鼠进行肾上腺皮质摘除手术，手术操作如下。方法：剪去腰部的毛，用75%酒精消毒术部皮肤。从最后胸椎处 向后沿背部正中线做约2cm长的皮肤切口。先把切口牵向左侧，于最 后肋骨后缘和背最长肌的外缘分离肌肉。用镊子扩大切口，以小镊子 夹盐水棉球轻轻推开腹腔内脏器和组织，在肾脏前内侧脊柱下方就可 看到淡黄色的肾上腺，与其周围不规则的脂肪组织有明显区别。摘除 肾上腺皮质。同法摘除右侧肾上腺皮质（右侧肾上

5、腺位置稍靠前，注 意勿伤附近血管），缝合肌肉和皮肤，并涂以碘酊。对B组进行假手术对照，但不摘除肾上腺皮质，按上述步骤缝合。C 组做空白对照。三组鼠做好明显的记号。待各鼠恢复清醒和活动后，在实验室的 喂养室里饲养一个星期，待手术恢复（在此期间不可使其受到大的应 激刺激）。一个星期之后，会有部分大鼠死亡，淘汰掉那些死亡的，将存活的 按组将A、B、C组大白鼠同时投入盛有冰水的面盆中，按动秒表，记 录各组大鼠在水中的游泳时间，并观察泳姿和速度，直至它开始下沉 时为止，各鼠开始下沉时立即捞出。计算出各组大鼠在水中游泳的平 均时间并比较，同时比较各组动物的游泳姿势与速度。捞出大白鼠后，立即对A组鼠静脉注射

6、0.25mg/100g的地塞米松， B、C组注射等量等浓度的生理盐水。观察各组鼠的活动情况。待三组大白鼠的活动恢复后，可再次重复步骤5。六.实验流程图准备30只大白鼠，分A、B、C三组|对所有大白鼠进行麻醉处理对ABC三组分别进行相应处理并标记| 将已处理的大鼠放入冰水并观察记录捞出刚下沉的大鼠并对A鼠注射糖皮质激素，对B、C鼠注射等量生理盐水 观察记录各鼠活动情况七.预测结果ABC第一次游泳该组小鼠游泳 速度较慢，并较 快的开始下沉， 小鼠的状态较 为低靡或死亡该组游泳速度 快，在水中游泳 的时间长，状态 良好。该组情况和C组 类似。第二次游泳小鼠较前次明 显兴奋，在水中 游泳的时间加 长实

7、验结果与第一次相比无明显变化实验结果与第一次相比无明显变化注：第一游泳是指未注射糖皮质激素之前，第二游泳是指注射糖皮质 激素之后。八分析糖皮质激素在应激反应中有3个作用1稳定细胞膜和溶酶体膜2促进糖异生，升高血糖3加强心收缩力，升高血压所以在实验中表现为注射了糖皮质激素之后的A组鼠，能在水中游动 的时间较长，而正常的鼠在水中游动的时间也比较长。若出现这种现 象，便可以说明糖皮质激素在应激反应中具有以上3中作用。由于切除肾上腺皮质会对大鼠生理机能长生巨大的损害，可能 导致白鼠很快死亡。或者不能出现预期的实验现象，所以在手术后应 尽快实验，手术要尽量减少感染和伤害。注意事项：掌握麻醉深度，水合氯醛剂量过大会致死。仔细找准手术部位；避免切口过长或内脏移位、出血较多等过度损 伤。标记要可靠、醒目并避免对鼠的伤害(如剪耳、断尾等)。饲养期间尽量避免给大鼠过大的应急刺激，以免其死亡。各鼠放于冰水中后开始下沉时应迅速取出，防止其溺水死亡。防控感染方法：用抗生素预防，在第一次手术前一天用头孢拉定 (200