血型检查方法学评价及其质量控制ppt课件

1、血型检查方法学评价及其质量控制血型概述 血型是人类血液以血型抗原为表现型的遗传性状，ABO血型系统和Rh血型系统是红细胞的两大血型抗原抗体系统，在临床输血和血液遗传学研讨上有重要意义。 血型鉴定(blood typing)是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定是保证输血平安的前提条件。主要内容ABO血型系统ABO血型系统抗原ABO血型系统抗体ABO血型系统亚型ABO血型鉴定 检测原理鉴定方法方法学评价质量控制RH血型系统RH血型系统抗原RH血型系统抗体RH血型鉴定 检测原理鉴定方法方法学评价质量控制ABO血型系统抗体分为天然抗体和免疫性抗体天然抗体主要为IgM型免疫球蛋白免疫性抗体那么来自母婴血

2、型不合的妊娠或血型不合的输血，通常是来自母体的IgG型免疫球蛋白。ABO血型系统抗体两种抗体的比较特性IgM型IgG型分子量（kD）1000160耐热性（70）破坏稳定与红细胞结合最适温度（）4-2537与红细胞反应介质生理盐水酶处理或清蛋白溶液被血型物质中和能不能通过胎盘不能能ABO血型系统亚型A抗原的主要亚型有A1和A2，均能与抗A血清发生直接凝集反响。AB血型中也存在相应的A1 B和A2 B亚型。B亚型较少见，且抗原性弱，故临床意义不大。ABO血型检测原理血型抗原与相应抗体在反响介质中构成红细胞和相应血型抗体结合的免疫复合物，出现肉眼可见的凝集景象。正向定型direct typing反向

3、定型indirect typing鉴定方法血凝实验 玻片法试管法全自动微板法 流式细胞技术酶联免疫吸附实验微柱凝胶实验鉴定方法盐水凝集法salt medium test鉴定方法正定型，玻片法鉴定方法玻片法评价它是目前临床常用的血型鉴定的初筛实验方法。具有操作简便，节省资料的优点。但弱凝集反响需求借助显微镜察看确定。鉴定方法反定型，试管法鉴定方法试管法评价优点试管法是交叉配血实验中最根底的实验方法之一。与玻片法原理一样，但是借助试管更大的反响空间，并对待测红细胞予以一定的浓度的稀释或者参与更多的待测红细胞，经过低速离心后可根据有无肉眼可见凝集反响来判别结果。由于待测红细胞经过稀释，在一定程度上减

4、少了血液中非特异性抗体的浓度，从而提高了实验的敏感性。比玻片法更具有准确可靠的优点。鉴定方法试管法评价缺陷只能检测出完全抗体抗A、抗B引起的血型不合，对免疫性抗体引起的血型不合不能检出，有输血史或不明输血史及妊娠史不能用该法。本实验中的生理盐水对血清浆中的抗体有稀释作用，易导致配血结果假阴性。易受冷凝集素的干扰。方法学评价盐水凝集法 操作简便，无需特殊仪器。玻片法：无需离心，适用于血型普查。但反响时间长，灵敏度差，凝集较弱时易导致定型错误。不适于反向定型。试管法：用离心法加速反响，所需时间短，适于急诊定型。因离心加强红细胞凝集，可发现较弱的凝集景象，有助于检出亚型，故为常用血型鉴定方法。只能检

5、测完全抗体易受冷凝集素干扰鉴定方法凝胶微柱法鉴定方法凝胶微柱法的结果方法学评价凝胶微柱法反复性好，特异性和灵敏度高，结果准确。试剂本钱较高，需用离心设备。根据不同需求可选用中性凝胶、特异凝胶或抗球蛋白凝胶作为反响介质。结果既可肉眼察看，也可用血型分析仪分析。鉴定方法全自动微板法规范化加样、孵育、离心、悬浮、静止反响前后吸光度值添加数值的计算对血型进展正定型与反定型方法学评价全自动微板法此法正反定型实验，准确率高，且能提高检测灵敏度，使弱凝集样本更加易显现。快速、准确、自动化程度高等优点，适宜批量操作。血型微量化检测具有节约大量昂贵抗血清、缩短检测时间、操作程序简单等优点，目前在各大采供血机构已

6、得到广泛运用。鉴定方法流式细胞技术稀释：将待测血样的红细胞用生理盐水稀释成百分之五的红细胞悬液。标志：分装各管分别等比参与荧光素标志抗体，避光放置15min待受检红细胞上的血型抗原与相应荧光标志抗体结合后，用生理盐水洗涤离心除去未结合抗体。检测：重悬后立刻用流式细胞仪检测与荧光标志抗体结合的红细胞，经过软件分析，从而得到待测样本的红细胞血型。方法学评价流式细胞术在细胞分型方面具有速度快、灵敏度高、特异性好，检测结果准确，反复性好。特别合顺运用于ABO血型亚型的快速鉴定。目前有研讨指出流式细胞技术亦可经过分别孕妇血液中的胎儿红细胞用于产前非侵入性胎儿血型检测。质量控制1.规范血清 要求：新颖，在

7、有效期内，效价高，凝集力强，严防污染常用的抗血清有：人血清ABO血型抗体：稳定性高，已灭活补体人ABO血型单克隆抗体：稳定性较人血清抗体的稳定性差质量控制2.被检红细胞 标本新颖，严防污染。某些疾病出现假凝集，可加做本身血清和红细胞，本身红细胞和生理盐水对照实验及结合反定型结果进展鉴定。当疑有血浆成分干扰血型鉴定时可用生理盐水反复洗涤红细胞以除干扰。质量控制3.实验器材 器材清洁、枯燥、标志清楚。用试管法定型时，应同时进展正向和反向定型。须设置对照。红细胞浓度按要求配置，红细胞与相应抗体的比例适当。反响温度、反响时间、离心时间。弱A亚型和弱B亚型，肉眼判别必同时须用显微镜复查。Rh血型系统抗原

8、及抗体Rh血型系统抗原目前已发现的Rh抗原有45种，其中与人类关系最为亲密的是D、E、C、c、e五种。D抗原的抗原性最强。Rh血型系统抗体绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的IgG型免疫性抗体。主要Rh血型系统抗体有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五种，其中抗D最为常见。Rh血型检测方法酶介质法聚凝胺实验polybrene testRh血型检测方法抗球蛋白实验antiglobulin testRh血型检测方法人源盐水介质抗D实验低离子强度溶液实验Company Logo方法学评价 方 法 评 价酶介质法（直接法） 简单、快速、经济，但灵敏度低。酶介质法（间接法） 简单、经济、灵敏。可

9、鉴定抗原和检测抗体。 但较费时，准确性和稳定性较差低离子强度溶液试验 反应时间短，灵敏度高聚凝胺试验 快速、灵敏、准确性高，应用较多抗球蛋白试验 检查不完全抗体最可靠方法，但操作复杂， 费时，试剂较贵。多用于新生儿溶血病的诊 断及因血型不合输血产生的血型抗体的检测人源盐水介质抗D试验 操作简单，特异性和灵敏度均高，应用广泛， 但试剂昂贵质量保证检测前标本处置：标本新颖，严防污染。为防止假阴性，被检红细胞要用生理盐水充分洗涤。试剂和器材：运用有效期内的合格试剂。抗血清要妥善保管，防治污染。运用的仪器、器材清洁枯燥。质量保证检测中抗原抗体比例、介质浓度反响时间、反响温度、离心条件阴性对照、阳性对照

10、及试剂对照红细胞上的Rh抗原与相应抗体反响构成的凝集较弱，察看结果不可用力振摇当结果可疑时，须用显微镜察看确认质量保证检测后复查实验全过程，填写实验报告，查对无误后方可发出报告。标本置4保管1周以上，以备复查。临床上血型检查的质量控制1、 医务人员的问题临床医生临床护士抽取血标本时，未校正患者的姓名、床号检验科人员没有对报告核对正确，呵斥血型鉴定错误临床上血型检查的质量控制2、 被检红细胞血型测定的错误血型：检测时只用肉眼察看结果，微弱、细小的凝集未看到冷凝集素：在支原体肺炎、肝硬化等疾病患者血清中，冷凝集素很高，严重干扰血型鉴定。ABO亚型：抗原构造和位点数改动导致的弱表现。ABO血型抗体减弱：当献血者血清中抗A和抗B效价减弱，其反定型格局总表现为AB型。临床上血型检查的质量控制3、 其它要素输血或妊娠：产生不规那么抗体类B抗原：某些受肠道革兰氏阴性杆菌感染的病人，红细胞获得了类B抗原，A型病人可误定为AB型，O型误定为B型磺胺类药物：注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗体，而青霉素已吸附在红细胞外表，当此