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文档简介
1、实验四 血糖的测定-邻甲苯胺法标准曲线法1实 验 目 的掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。掌握标准曲线法在定量分析中的应用2实 验 原 理本实验采用临床上常用的邻甲苯胺法，利用葡萄糖在热的醋酸溶液中脱水后与邻甲苯胺缩合，生成青色的Schiff碱，对波长630nm的光有特征吸收，可比色定量测定。由于邻甲苯胺只与醛糖作用而显色，故此种测定法不受血液中其他还原物质的干扰，测定时也无需去除血浆或血清中的蛋白质。3 原理反应式4实 验 操 作一、标准曲线的制备（标准品梯度稀释） 取l0ml容量瓶5只，分别编号1，2，3，4，5，依次加入葡萄糖贮存标准液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0(ml)，再
2、以饱和苯甲酸溶液稀释至l0ml刻度，混匀。上述溶液l00ml葡萄糖含量分别为50，100，200，300，400(mg)。5二、显 色取7只试管，编号，按下表操作。混匀后，置沸水浴中煮沸15min，取出，在冰水浴中冷却。邻甲苯胺法测定血糖操作表6比色及结果以“0”号管为对照，用分光光度计在630nm处比色测定，以各管的吸光度为纵坐标，相应管中葡萄糖含量为横坐标，绘制标准曲线。根据测定管吸光度，通过标准曲线即查得含量。7附：标准样品法定量测定 试剂 空白管 标准管 检测管 蒸馏水 0.1ml _ _ 邻甲苯胺 5ml 5ml 5ml 葡萄糖标准品 _ 0.1ml _ 待检血清 _ _ 0.1ml取3只试管，编号，按下表操作。混匀后，置沸水浴中煮沸15min，取出，在冰水浴中冷却。以空白号管为对照，用分光光度计在630n
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