《专题一复习》PPT课件

1、专题一 基因工程 （第一课时） 郑州二中 王丽娴高中生物复习1整理课件学习目标1、通过知识梳理，复习巩固基因工程的原理和操作程序。2、通过相近概念的比较及针对性练习，掌握本节重难点和易错点。2整理课件基因工程 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。（DNA重组技术）3整理课件知识网络构建基因工程基本工具操作程序应用分子手术刀：_分子缝合针：_分子运输车：_转基因植物1、操作环境：_2、操作水平：_3、原理：_4、优点： 与杂交育种相比：克服了_ 与诱变育种相比：_改造生物遗传性状限制酶

2、DNA连接酶运载体基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定目的基因的获取转基因动物基因工程药物基因治疗体外分子水平基因重组远缘杂交不亲和性定向蛋白质工程崛起的原因基本原理4整理课件一、基本工具1、分子手术刀：限制酶功能：识别DNA分子的_核苷酸序列，使每一条链中_部位的_键断开。练习：请标出EcoRI、SmaI酶所识别的核苷酸序列，并写出剪切后形成的末端及其名称特定特定磷酸二酯G A A T T CC T T A A GG G G C C CC C C G G GEcoRISmal黏末端平末端5整理课件EcoR黏性末端黏性末端6整理课件Sma平末端平末端7整理课件2、分子缝

3、合针：DNA连接酶功能：将切下来的_拼接成新的DNA分子， 连接_键。种类：T4DNA连接酶既能“缝合”_末端，也能“缝 合”_末端 E.coliDNA连接酶只能“缝合”双链互补的_末端。3、分子运输车：运载体 化学本质：常用载体质粒 特点其他载体：噬菌体衍生物、动植物病毒等DNA片段3，5磷酸二酯平黏黏能自我复制有一个至多个_位点有特殊的_对宿主无害双链环状DNA分子限制酶切标记基因8整理课件二、基本操作程序1、目的基因的获取：目的基因：主要指_，如生物抗逆性基因获取方法：_、_、_2、基因表达载体的构建：编码蛋白质的基因从基因文库中获取PCR扩增人工合成质粒目的基因_个切口_个切口重组质粒

4、_种限制性内切酶一一两DNA连接_酶表达载体（基因工程的核心）9整理课件3、将目的基因导入受体细胞转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持_的过程。导入方法（连线）：受体细胞动物细胞植物细胞微生物细胞导入方法a.农杆菌转化法( )b.显微注射法c.基因枪法（ ）d.感受态细胞法（Ca2+处理法）e.花粉管通道法稳定和表达双子叶、裸子植物单子叶植物10整理课件4、目的基因的检测与鉴定目的基因mRNA蛋白质个体性状DNA分子杂交分子杂交抗原-抗体杂交抗虫抗病接种实验是否出现杂交带是否出现杂交带是否抗虫，是否抗病是否出现杂交带转录翻译检测检测检测检测现象现象现象现象个体水平鉴定分子水平检测

5、11整理课件三、易错点突破：1、相关问题：（1）基因重组有哪些类型？（2）天然质粒与表达载体之间有什么区别和联系？ 表达载体是天然质粒经过修饰，加入启动子、终止子、目的基因。基因工程减四分体时期，一对同源染色体上，相邻的非姐妹染 色单体交叉互换。减后期非同源染色体的自由组合肺炎双球菌的转化12整理课件（3）如何检测目的基因是否成功表达？（4）基因工程基本操作程序中哪些步骤需要碱基互补配对？三、易错点突破：分子水平：是否翻译-抗原-抗体杂交个体水平：是否具有特定性状-抗虫、抗病、抗逆等 只有第三步将目的基因导入受体细胞不需要碱基互补配对。（第一步存在逆转录法获得DNA，第二步存在粘性末端连接现象

6、，第四步检测存在分子水平杂交）13整理课件2、几种酶的比较连接两个DNA片段连接单个脱氧核苷酸使DNA双链互补碱基间的氢键断裂连接单个核糖核苷酸使目的基因或载体有特定末端形成重组DNA分子形成两条DNA单链形成mRNA单链14整理课件3、辨析下列概念（1）、基因文库、基因组文库、部分基因文库、cDNA文库（2）、启动子，终止子；起始密码子、终止密码子基因文库基因组文库部分基因组文库：cDNA文库启动子、终止子位于DNA上，启动或终止转录。起始密码子、终止密码子位于mRNA上，起始或终止翻译。15整理课件你完成目标了吗？1、通过知识梳理，复习巩固基因工程的原理和操作程序。2、通过列表比较及针对性练习，掌握本节重难点和易错点。16整理课件综合练习：1、(2012.山东理综) 毛角蛋白型中间丝(KIF )基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF 基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。(1)过程中最常用的运载工具是_，所需要的酶是限制酶和_。(2)在过程中，用_处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是_。质粒DNA连接酶胰蛋白酶和胶原蛋白酶维持培养基的PH值(3)在过程中，用_处理以获取更多