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文档简介
1、教学内容:知识点可溶性还原糖 脂肪 蛋白质实验原理幻灯片实验步骤 幻灯片7 幻灯片8 幻灯片9 成功关键注意事项 幻灯片10 幻灯片11 幻灯片12 幻灯片13讨论练习 幻灯片14 幻灯片16作业 幻灯片19.实验一 生物组中可溶性复原糖、脂肪、蛋白质的鉴定江苏省大丰市南阳中学 周维燕.教学目的: 知识目的:阐明实验原理颜色反响,识记和区分用于可溶性复原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的根本方法,学会描画实验景象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的运用方法。 才干目的:培育学生自动获取知识,运用知识分析景象,归纳总结的才干,培育学生实践操作的才干及从景象出发探
2、求事物本质的才干。 情感与价值目的:经过亲手实验体验科学家严谨治学的科学态度,培育实事求是的世界观。.一、实验原理1.可溶性复原糖 生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多,有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具复原性的半缩醛羟基,因此叫做复原糖;蔗糖分子内没有,为非复原糖。实验中所用的斐林试剂,只能鉴定生物组织中可溶性复原糖,而不能鉴定可溶性非复原糖及不能溶解的糖。斐林试剂为0.1g/mL的NaOH和 0.05g/mL的CuSO配制而成的淡蓝色Cu(OH)2沉淀的悬浊液,葡萄糖溶液在参与斐林试剂后,在加热条件下Cu(OH)2被复原为砖红色的Cu2O沉淀,而葡萄糖氧化成葡萄糖酸
3、。其反响式为:-CHO+Cu(OH)2-COOH+Cu2O砖红色.2.脂肪的鉴定 苏丹(苏丹)为一种脂肪染色剂(易溶解于酒精,不溶解于水)。苏丹染液遇脂肪的颜色反响为橘黄色,苏丹染液遇脂肪的颜色反响为红色。其反响式为: 脂肪苏丹 苏丹 橘黄色红色.3.蛋白质的鉴定 将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。反响式为: 双缩脲在碱性环境中能和硫酸铜结合成红紫色的络化物。蛋白质分子中含有的肽键构造与双缩脲构造类似,因此,蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反响:-CO NH -类似双缩尿H2NOC - NH - CONH2构造酸性条件下与Cu2+作用构成紫色络合物双缩尿反响.选材:含糖量较高的白色
4、或近于白色,苹果、梨最好 。 二、实验步骤与景象1.可溶性复原糖 制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨过滤:用单层纱布取液:mL显色反响 mL组织样液刚配制的斐林试剂mL景象: 呈现蓝色开水加热min变成砖红色.2.脂肪的鉴定 取材:花生种子浸泡h,去皮,将子叶削成薄片 制片:选取最薄的薄片移至载玻片中央在薄片上滴加苏丹 染液2 3滴,染色min滴加体积分数为50%的酒精溶液12滴,洗去浮色吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片察看:先在低倍镜下找到已着色的薄片,后用高倍镜察看结果:有被染成橘黄色的脂肪微粒.3.蛋白质的鉴定 选材与制备组织样液:黄豆组织样液或鸡蛋白稀释液黄豆浸泡 去皮切片研磨
5、过滤滤液 显色反响mL组织样液双缩脲试剂mL景象:无色双缩脲试剂滴紫色或紫红色.三、实验胜利的关键与本卷须知:1.实验胜利的关键在于实验资料的选择: 在做可溶性复原糖的鉴定实验中,最理想的实验资料是含糖量较高的生物组织(或器官),而且组织的颜色较浅,最好是白色或近于白色的植物组织,这样可以防止资料本身颜色对实验变化颜色的掩盖。经实验比较,颜色反响的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。 在做脂肪的鉴定实验中,实验资料最好选用富含脂肪的种子,且徒手切片要胜利,要务虚验技艺较高,无妨改成刮取花生子叶泥制造暂时装片,易做,效果又好。 在做糖和蛋白质的实验时,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物资
6、料常用的是大豆,动物资料常用的是鸡蛋,鉴定之前需求留出一部分样液,以便与鉴定后的样液的颜色做比较,这样可加强压服力。 . (1)斐林试剂很不稳定,故应将组成斐林试剂的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO溶液)分别配制、储存,运用时,再暂时配制,将45滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立刻便用。切勿将甲液和乙液分别参与组织样液中。 (2) 鉴定可溶性复原糖,加热试管时,应该用试管夹夹住试管上部,放入怒放水的大烧杯加热;留意试管底部不接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,呵斥烫伤。假设试管内溶液过于沸腾,可以提起试管夹,使试管与沸水接触
7、面减少,以免溶液溢出。 A.可溶性复原糖 2.本卷须知:. (3) 在鉴定脂肪的实验中,假设用花生种子作实验资料,必需提早浸泡34小时,浸泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,那么组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽能够的薄。 (4) 染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色,染色和洗浮色时间不宜过长否那么酒精将脂肪溶解影响实验效果,察看时找最薄处最好只需12层细胞。B.脂肪的鉴定 . (5)在蛋白质的鉴定实验中,假设用蛋白质作实验资料,必需稀释,假设稀释不够,与双缩脲试剂发生反响后会粘固在试管内壁上,使反响不彻底,且试管不易洗刷干净。 (6)双缩脲试剂的运用,应先双缩脲加试剂A(0.1g/m
8、L的NaOH溶液),呵斥碱性的反响环境,再加试剂B(0.01g/mL的CuSO溶液)。C.蛋白质的鉴定 . 1结论:上述实验证明苹果果肉中、花生种子中、黄豆组织中各存在什么样物质? 答: 。 2讨论:为什么根据某些化学反响可以使生物组织中的有关有机物产生固定的颜色反响可以鉴定生物组织有糖、脂肪、蛋白质的存在? 四、讨论与练习:可溶性复原糖、脂肪、蛋白质 由于某些化学试剂与生物组织中的化合物发生一定的化学反响后,可产生新的化合物,而这种化合物是有固定的颜色的。因此,根据待检测物与某些化学试剂反响的固有颜色,如砖红色、橘黄色、紫色等。可以鉴定生物组织中存在有糖、脂肪、蛋白质。. 各种可供实验的材料
9、梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子小麦种子 其中适宜于鉴定糖的是 ,理由是梨的组织细胞 ,他计划用什么试剂鉴定? 。 小麦种子不如花生种子更适宜用来鉴定脂肪,这是由于 ,他计划用什么试剂鉴定? . 适宜于鉴定蛋白质的是 ,理由是 ,鉴定所用的试剂是 。 3. 讨论: 做生物组织中可溶性复原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时,需求根据实验需求选择不同的实验资料。清根据下表所列各种资料回答以下问题:梨 颜色为白色,并且糖含量较高 斐林试剂或班氏试剂脂肪含量不如花生高,也不容易做切片 用苏丹或苏丹试剂黄豆和花生 蛋白质含量高 双缩脲试剂.1、某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性复原糖,但这些单子叶植
10、物的叶子不宜作实验资料,缘由是:这些叶子的颜色较深,对复原性糖与斐林试剂的颜色反响起遮盖作用 、以下哪组试剂在运用过程中,必需加热:A.斐林试剂鉴定可溶性复原糖的过程中B.苏丹染液在鉴定动物组织中的脂肪时C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时D.碘化钾溶液鉴定淀粉时 课堂练习:.、某学生在鉴定脂肪的实验中,在显微镜下察看花生子叶切片,当转动细调理器时,有一部分细胞看的清楚,另一部分较模糊,这是由于 A.反光镜未调理好 B.标本切的厚薄不均C.细调理器未调理好D.显微镜物镜损坏 、苏丹溶液的配制的方法是: 称取0.1g苏丹干粉,溶于100mL酒精的体积分数为95溶液中,待全部溶解后再运用,为什么用酒精而不用
11、蒸馏水?苏丹染液易溶解于酒精中 ,不易溶解于水。.、鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是A先加A液,混合后再加B液摇匀察看B先加B液,混合后再加A液摇匀察看CA、B混合后参与,摇匀察看DA、B液同时参与样液,摇匀后察看 、在生物组织中可溶性复原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验资料的选择中,错误的选项是A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可用于进展可溶性复原糖的鉴定B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚,适用于脂肪鉴定C、大豆种子蛋白质含量高,可用于蛋白质的鉴定D、 鸡蛋清含蛋白质多,是蛋白质鉴定的理想资料 .五、作业: 1将可溶性糖、脂肪、蛋白质鉴定原理及结沦填写在上。 2斐林试剂主要用来鉴定可溶性复原糖,其主要成分为NaOH和CuSO4的混合液,用他已有的化学知识判别,这两种物质混合以后能发
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