霉菌形态及菌落特征的观察山东大学-供参考

1、霉菌的培养与形态观察 实验目的 掌握霉菌的观察法小室观察法。了解四种常见霉菌形态。实验原理1、霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约 310m ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。2、观察方法观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。3、载玻片培养观察法（小室培养法）用无菌操作将

2、培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。实验器材菌种：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉 ( Rhizopus sp. ) ， 毛霉（ Mucor sp. ），培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物 培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表）仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U 型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等实验内容配置150ml的P

3、DA（霉菌）培养基，然后高温灭菌。培养小室的灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一形玻棒，其上放一洁净载玻片和两块盖玻片，盖上皿盖，包扎后于110灭菌2030分钟，烘干备用。 倒平板：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各67ml 注入另两个灭菌平皿中，使之凝固成薄层。 用解剖刀切培养基：在无菌操作的情况下，利用解剖刀将培养基切成1cmx1cm的琼脂块，并将其移至上述培养室中的载玻片上（每片放两块 )。 在培养基边缘接种：通过无菌操作，用接种环从斜面培养物上挑取很少量的孢子，接种于培养小室中琼脂块的边缘上，用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。培养：通过无菌操作，在培养小室中的圆滤纸上加 3ml

4、 灭菌的20 %的甘油（用于保持平皿内的湿度 ) ，盖上皿盖，28 正置培养一周。 镜检：取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高倍镜。实验结果实验绘图四种霉菌： A曲霉 B曲霉局部放大图 A青霉 B青霉局部放大图 毛霉 毛霉分析图根霉： 根霉整体装片 根霉放大图实验结果描述菌种曲霉根霉毛霉青霉形态特征具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端膨大成球状顶囊，表面辐射出一层或两层小梗，小梗上着生成串的球形分生孢子。分生孢子梗生于足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连。菌丝无隔、多核、分枝状，有匍匐菌丝和假根。在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗，其顶端膨大成球形孢子囊。囊的基部有囊托，中间有球形或半球形囊轴。菌丝无隔、多核、分枝状，无假根或匍匐菌丝。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。各分枝顶端着生球形孢子囊，无囊托。菌丝有横隔，分生孢子梗亦有横隔，光滑或粗糙。基部无足细胞，顶端不形成膨大的顶囊，其分生孢子梗经过多次分枝，产生几轮对称或不对称的小梗，形如扫帚，称为帚状体。实验结果分析及感悟本次试验学会了霉菌的基本培养方法，对霉菌的形态特征