实验一小鼠实验技术

1、实验一实验一 小鼠基本实验技术和各种小鼠基本实验技术和各种检验标本的采集检验标本的采集首都医科大学实验动物部首都医科大学实验动物部首都医科大学基础医学院实验动物学系首都医科大学基础医学院实验动物学系孙孙 泉泉四次实验课安排 小鼠的基本实验技术和各种检验标本的采集技术（第3周，3月19日） 大鼠的基本实验技术和各种检验标本的采集技术（第4周，3月26日） 大鼠阻塞性黄疸及急性胰腺炎模型的制作（第5周，4月2日） 兔的基本实验技术和静脉插管技术（第6周，4月9日）考核方式 出勤；20% 实验操作情况；30% 实验报告：实验目的；实验器材；实验内容；总结；50%注意事项 注意安全：抓取；注射器等。

2、上课纪律：按时上课，穿实验服，保持安静。 保持卫生：每次课安排4个同学打扫卫生，动物尸体放入尸体房。 分组情况：1305教室:18人；1306教室:18人一一. .实验目的实验目的 掌握小鼠的抓取和固定掌握小鼠的抓取和固定 掌握小鼠的编号与标记方法掌握小鼠的编号与标记方法 掌握小鼠的常用给药方法掌握小鼠的常用给药方法 掌握小鼠的常用麻醉方法掌握小鼠的常用麻醉方法 掌握小鼠的安死术掌握小鼠的安死术 掌握小鼠的采血方法掌握小鼠的采血方法 了解小鼠的采尿、粪的方法了解小鼠的采尿、粪的方法 了解小鼠各种脏器标本的采集方法了解小鼠各种脏器标本的采集方法 二二. .操作内容操作内容分组：两人一组，每组小鼠

3、分组：两人一组，每组小鼠2只，各只，各1只。只。品系：品系：ICR1.小鼠的抓取和固定小鼠的抓取和固定单手固定：肌肉、腹腔、灌胃单手固定：肌肉、腹腔、灌胃 双手固定：肥胖或妊娠小鼠；双人配合 固定器：尾静脉注射与采血； 固定板：外科手术或解剖；2.小鼠的性别鉴定及称重小鼠的性别鉴定及称重 将小鼠抓取后，放在烧杯中，称量体重，记录体重。将小鼠抓取后，放在烧杯中，称量体重，记录体重。 辨别雌雄 根据排泄孔和生殖孔的距离辨别。 距离近的为雌性 距离远的为雄性3.小鼠的编号与标记方法小鼠的编号与标记方法 染色法：染色法：一般用于短期实验；一般用于短期实验；常用的染液有常用的染液有3%-5%的苦味酸溶液

4、（黄色）、的苦味酸溶液（黄色）、0.5%的中性品红溶液（红色）的中性品红溶液（红色）；逆毛流方向涂上有色斑点；逆毛流方向涂上有色斑点；编号的原则是编号的原则是“从上到下，从左到右从上到下，从左到右” 一种颜色代表十位，另一种颜色代表个位，这样可标记到一种颜色代表十位，另一种颜色代表个位，这样可标记到99号号 穿耳孔法： 用动物专用耳孔器在动物耳朵的不同部位打一小孔或打成缺口来表示一定号码的方法。 左耳代表十位，右耳代表个位。这种方法可标记100只左右的动物。4.小鼠的常用给药方法小鼠的常用给药方法尾静脉注射尾静脉注射 小鼠：小鼠：0.05ml/10g体重体重0.1ml/10g体重体重放入固定器

5、，露出尾部， 准备好注射液；酒精擦拭尾部；左手食指托住尾部下方，拇指配合，右手持注射器针尖轻轻抬起与血管平行刺入，轻推药液血管由红变白；用干棉球按住注射点，将针头拨出，用力按压止血。 皮下注射：皮下注射：俯卧固定；颈背部皮肤；左手拇指和食指捏住皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮下；进针时感觉有阻力，继续刺入，突然阻力消失，活动针头 皮内注射：皮内注射：与皮肤平行刺入捏住的皮肤；注射时感觉阻力很大，并且手指有膨胀，注射部位局部形成皮丘，注射毕，为避免药液流出，停留片刻，再将针头拨出 腹腔注射：腹腔注射：仰面保定；腹正中线左右两侧，与腹股沟平行的部位，用酒精棉球消毒右手持针，30-45角刺入不要太

6、深，把针尖向上挑起皮肤和肌肉，证明未刺入内脏，回抽无血，即可注入药液。 灌胃法：灌胃法：先将动物保定，身体成一条直线；灌胃针头的前端放进动物口腔，顺着上腭插入咽部先少量注入药液，如果小鼠无强烈挣扎，证明未插入气管 肌肉注射：肌肉注射：注射针穿过皮肤至肌肉，回抽无血，即可注射药液 5.小鼠的常用麻醉方法小鼠的常用麻醉方法 抓取、称重抓取、称重 将小鼠抓取后，放在烧杯中，称量体重，将小鼠抓取后，放在烧杯中，称量体重，记录体重。记录体重。 计算麻醉药用量计算麻醉药用量 记录给药、进入兴奋期、麻醉期的时间。记录给药、进入兴奋期、麻醉期的时间。 呼吸麻醉呼吸麻醉 （了解）（了解） 小鼠常用麻醉药的剂量及

7、注射途径小鼠常用麻醉药的剂量及注射途径动动 物物给药途径给药途径盐酸氯胺酮盐酸氯胺酮戊巴比妥戊巴比妥硫喷妥钠硫喷妥钠 水合氯醛水合氯醛小鼠小鼠i.vi.Pi.m224435502550400单位：单位：mg/kg i.v静脉注射；静脉注射；i.p腹腔注射腹腔注射；i.m肌肉注射肌肉注射观察麻醉期 全身麻醉的第一期（随意兴奋期）全身麻醉的第一期（随意兴奋期）：出现运动和运动失调； 全身麻醉的第二期（不随意兴奋期）：全身麻醉的第二期（不随意兴奋期）：是由意识完全丧失至深而规则的自动呼吸开始时止。 全身麻醉的第三期（外科麻醉期）：全身麻醉的第三期（外科麻醉期）：角膜反射由迟钝渐趋消失，翻正反射消失，

8、疼痛反射消角膜反射由迟钝渐趋消失，翻正反射消失，疼痛反射消失，失， 全身麻醉的第四期全身麻醉的第四期 （延髓麻痹期）：（延髓麻痹期）：进入此期，麻醉已严重过量，故临床上严禁出现此期。 尾尖采血法；尾尖采血法； 眼眶静脉丛采血法；眼眶静脉丛采血法； 心脏采血法；心脏采血法；6.小鼠的常用的采血方法小鼠的常用的采血方法7. 小鼠的采尿、粪的方法小鼠的采尿、粪的方法代谢笼代谢笼l少量采集：在抓取固定时受到刺激排出少少量采集：在抓取固定时受到刺激排出少量尿液和粪便量尿液和粪便l长期大量采集：使用代谢笼长期大量采集：使用代谢笼8.安死术安死术 1.颈椎脱臼法颈椎脱臼法用左手按住动物的头部于实验台上，右手

9、抓住尾根部，快速、不间断地向后、略向上使劲拉，以致脊椎脱臼，脊髓与脑干断离而死亡。2.过量麻醉法过量麻醉法 给动物注射正常麻醉34倍的药量。3.空气栓塞法空气栓塞法 向动物的静脉注射23mL左右的空气。9. 小鼠各种脏器标本的采集方法小鼠各种脏器标本的采集方法腹腔脏器腹腔脏器1：肝，胃，十二指肠，空肠，回肠，结肠：肝，胃，十二指肠，空肠，回肠，结肠小鼠各种脏器标本的采集方法小鼠各种脏器标本的采集方法腹腔脏器腹腔脏器2：胰脏，脾脏，肾脏，肾上腺：胰脏，脾脏，肾脏，肾上腺胸腔器官胸腔器官小鼠各种脏器标本的采集方法小鼠各种脏器标本的采集方法生殖器官生殖器官小鼠各种脏器标本的采集方法小鼠各种脏器标本的采集方法生殖器官和脑组织生殖器官和脑组织大鼠、小鼠常用麻醉药的剂量及注射途径大鼠、小鼠常用麻醉药的剂量及注射途径 动动 物物给药途径给药途径盐酸氯胺盐酸氯胺酮酮戊巴比妥戊巴比妥硫喷妥钠硫喷妥钠水合氯醛水合氯