稻草秸秆中木质素、纤维素测定方法

1、稻草秸秆中木质素、纤维素测定方法的研讨稻草秸秆中木质素、纤维素测定方法的稻草秸秆中木质素、纤维素测定方法的研讨研讨 姓名：蔚慧青 学号：201010836221v测定木质素、纤维素含量的方法很多测定木质素、纤维素含量的方法很多,如纤如纤维素含量的测定方法有浓酸水解定糖法、维素含量的测定方法有浓酸水解定糖法、硝酸乙醇法、氯化法等硝酸乙醇法、氯化法等;木质素含量的测定木质素含量的测定方法有浓酸水解法、紫外分光光度法、红方法有浓酸水解法、紫外分光光度法、红外光谱定量分析法和同位素标记法。由于外光谱定量分析法和同位素标记法。由于红外光谱法和同位素标记法对实验室要求红外光谱法和同位素标记法对实验室要求较

2、高较高,所以应用并不普遍。我们常用的是浓所以应用并不普遍。我们常用的是浓酸水解法。本试验应用酸水解法。本试验应用中性洗涤剂法、中性洗涤剂法、2M HCl水解法、水解法、72%H2SO4水解法及灰化法水解法及灰化法综合运用综合运用,一次性进行木质素、纤维素的测一次性进行木质素、纤维素的测定定,并将灰化时间缩短至并将灰化时间缩短至3h,所得结果较为准所得结果较为准确。确。1.1 材料材料 稻草经机器粉碎成稻草经机器粉碎成1cm长细秸长细秸,粉碎成粉碎成1cm长稻草粉分别经长稻草粉分别经Z17、921和和1024三种白腐真三种白腐真菌菌株发酵菌菌株发酵,每周取样一次每周取样一次,共共7周。周。1.2

3、 主要试剂主要试剂 中性洗涤剂中性洗涤剂:按按Van Soest方法配制；方法配制； 2M 盐酸溶液盐酸溶液:167ml浓盐酸浓盐酸(比重比重1.19)用蒸用蒸馏水定溶至馏水定溶至1000ml； 72% 浓酸溶液浓酸溶液: 665mlH2SO4(比重比重1. 84)加入加入300ml水中水中,冷至冷至20,补加水至补加水至1000ml。基过程本基过程本 1. 材料与方法材料与方法 1.1 材料材料 1.2 主要试剂主要试剂1.3 方法方法 2. 结果与讨论结果与讨论 2.1结果分析结果分析 2.2总结总结1.3 方法方法 取经取经803h烘至衡重的三个菌株各烘至衡重的三个菌株各5g。 1.3.

4、1 取取1.0000g样品置于样品置于100ml碘瓶中碘瓶中,加入加入70ml中性洗涤剂中性洗涤剂,之后放入已沸的高压锅之后放入已沸的高压锅,100保温保温40min,115121保温保温20min,取出用取出用3号号30ml沙芯坩埚过滤至沙芯坩埚过滤至pH 6.57.0,依次用依次用95%乙醇、乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤无水乙醇和丙酮洗涤2次次,将残渣置真空干燥器中将残渣置真空干燥器中,干燥干燥20min。 1.3.2 将残渣连同坩埚置于将残渣连同坩埚置于100ml烧杯中烧杯中,加入加入70ml 2M盐酸溶盐酸溶液液,然后放入已沸的高压锅然后放入已沸的高压锅,100保温保温50min,过滤至中

5、性过滤至中性,依次用依次用95%乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤乙醇、无水乙醇和丙酮洗涤2次次,残渣残渣80烘至衡重为烘至衡重为W1。 1.3.3 将残渣连同坩埚置于将残渣连同坩埚置于150ml烧杯中烧杯中,加入加入10ml致冷的致冷的72%硫酸硫酸,20e降解降解4h,后加入后加入90ml蒸馏水蒸馏水,室室温过夜温过夜,次日用蒸馏水洗残渣至次日用蒸馏水洗残渣至pH 6.5,烘干至衡重为烘干至衡重为W2,W1-W2为纤维素的含量。为纤维素的含量。 1.3.4 将残渣在将残渣在550e马福炉中灰化马福炉中灰化,干燥器中平衡干燥器中平衡至衡重为至衡重为W3,W2-W3即为木质素的含量即为木质素的含量2 结

6、果与讨论 本测定方法是在原有方法基础上加以改进,按照王玉万(1987)半纤维素、纤维素、木质素系统定量分析程序方法,纤维素测定前两步同上面方法(1.3.1、1.3.2,1.3.3),于620nm测OD由葡萄糖标准曲线求出糖量,乘上系数0.9,求得纤维素,将残渣80烘干,干燥器冷却30min,称重;在550e马福炉中灰化4小时,干燥器冷却30min,称重,前者称重数减去后者称重数即为木质素含量。而经我们改进后的方法就直接按上面方法(1.3.3,1.3.4),所测结果见表1。 结果分析结果分析v 三个菌株的木质素由接种前含三个菌株的木质素由接种前含16.63%经经49d培养分别减少至培养分别减少至

7、9.89%、10.30%、10.87%,纤维素含量由接种前含纤维素含量由接种前含30. 35%经经49d培养后培养后分别减少至分别减少至23.12%、22.72%、25.03%,说明说明木质素、纤维素含量都明显减少木质素、纤维素含量都明显减少,同我们以往同我们以往所做的分析结果基本相似。所做的分析结果基本相似。优点优点: (1) 节约试剂节约试剂:按照王玉万按照王玉万(1987)方法方法,纤维纤维素含量的测定需要蒽酮试剂素含量的测定需要蒽酮试剂,并且蒽酮试剂并且蒽酮试剂需要现配现用需要现配现用,相对来说我们的方法比较简相对来说我们的方法比较简便便,同时减轻了工作量同时减轻了工作量; (2) 减少人员减少人员,节约电源节约电源:王玉万的方法灰化王玉万的方法灰化需要需要4h,现在只要现在只要3h就可灰化好。而且所测就可灰化好。而且所测结果同以往我们所做的分析结果基本相似。结果同以往我们所做的分析结