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文档简介

1、 第二章第二章 血细胞手工检验血细胞手工检验 第四节血小板检验第四节血小板检验 福建医科大学福建医科大学 医学检验系医学检验系 第三节第三节 血小板检查血小板检查 概述概述 血小板(血小板(platelet)是由骨髓中成熟的巨核)是由骨髓中成熟的巨核细胞的胞质分割而生成。其生成受细胞的胞质分割而生成。其生成受血小板生成素血小板生成素(thrombopoietin,TPO)的调节。)的调节。 血小板具有血小板具有维持血管内皮完整性的功能、聚维持血管内皮完整性的功能、聚集、释放、促凝和血块收缩功能。集、释放、促凝和血块收缩功能。一、血小板计数一、血小板计数 血小板计数血小板计数(platelet

2、count, PLT)是测)是测定全血中血小板的浓度,定全血中血小板的浓度,是止血凝血检是止血凝血检查最常见的试验之一。查最常见的试验之一。血小板计数的适应证为:血小板计数的适应证为:不明原因的出血。不明原因的出血。排除出血性疾病。排除出血性疾病。化疗和放疗病人的监测。化疗和放疗病人的监测。疑为骨髓造血系统疾病。疑为骨髓造血系统疾病。疑为血小板疑为血小板生成减少生成减少、血小板、血小板破坏增加破坏增加、血小板、血小板消耗消耗过多过多或或反应性血小板增多。反应性血小板增多。血小板计数检测原理血小板计数检测原理 1血细胞分析仪计数法血细胞分析仪计数法 : 简便、快速、重复性好,准确性高;可同时测简

3、便、快速、重复性好,准确性高;可同时测定血小板、定血小板、MPV及及PDW等多个指标已广泛用于临等多个指标已广泛用于临床。床。 但不能完全排除非血小板有形成分的干扰。但不能完全排除非血小板有形成分的干扰。 其异常结果仍需其异常结果仍需镜检复核镜检复核。方法学评价方法学评价 2.普通光学显微镜直接计数法:普通光学显微镜直接计数法: 原理原理 血液血液(20l)经稀释液经稀释液(0.38ml)稀释和破坏红细稀释和破坏红细胞后,充入血细胞计数板内,在显微镜下计数一胞后,充入血细胞计数板内,在显微镜下计数一定范围内定范围内(中央大方格内的中央及四角共中央大方格内的中央及四角共5个中方个中方格格)的血小

4、板数量,经换算求出每升血液中的血小的血小板数量,经换算求出每升血液中的血小板数量。板数量。 参考值:(参考值:(100300)109/L 2.普通光学显微镜直接计数法:普通光学显微镜直接计数法: 优质的优质的稀释液应同时是:稀释液应同时是: 1)有效地阻止凝血;)有效地阻止凝血; 2)很快地固定血小板,防止血小板聚集和变)很快地固定血小板,防止血小板聚集和变形;形; 3)溶血稀释液要求红细胞破坏完全;)溶血稀释液要求红细胞破坏完全; 4)组成简单、容易保存、不长细菌。)组成简单、容易保存、不长细菌。 2.普通光学显微镜直接计数法:普通光学显微镜直接计数法: 稀释液稀释液草酸铵草酸铵 :对红细胞

5、破坏力强,血小板形态清楚。为常对红细胞破坏力强,血小板形态清楚。为常规计数方法,规计数方法,草酸铵为首选稀释液。草酸铵为首选稀释液。复方尿素:复方尿素:尿素可溶解红细胞、甲醛可固定血小板和防尿素可溶解红细胞、甲醛可固定血小板和防腐,稀释后血小板胀大易辨认腐,稀释后血小板胀大易辨认 尿素容易分解,尿素容易分解,试剂容试剂容易失效。尿素不能完全破坏红细胞易失效。尿素不能完全破坏红细胞 。不破坏红细胞稀释法:不破坏红细胞稀释法:复方碘稀释液。红细胞未破坏,复方碘稀释液。红细胞未破坏,试剂试剂 易长菌,干扰计数,已被淘汰易长菌,干扰计数,已被淘汰 。 4.流式细胞仪法:流式细胞仪法:特异、准确、但需特

6、殊仪器和特异、准确、但需特殊仪器和试剂。是目前血小板计数试剂。是目前血小板计数参考方法。参考方法。3.相差显微镜直接计数法:相差显微镜直接计数法: 准确性高,血小板准确性高,血小板易于识别,并可于照相后核对计数结果,是手易于识别,并可于照相后核对计数结果,是手工血小板计数的参考方法。但由于所用仪器昂工血小板计数的参考方法。但由于所用仪器昂贵,临床上较少选用。贵,临床上较少选用。质量保证质量保证 检测前检测前采血采血抗凝剂抗凝剂储存时间储存时间 检测中检测中器器 材材充池前充池前 摇动血小板悬液摇动血小板悬液2min或或200次以上次以上充充 池池充池后充池后 静置静置15min 采血后采血后1

7、h内完成计数内完成计数计计 数数 光线光线 非血小板非血小板 病理干扰病理干扰 检测后检测后核准血小板计数的方法:核准血小板计数的方法:用同用同1份血标本制备良好的血涂片,观察血小板数量、份血标本制备良好的血涂片,观察血小板数量、形态和分布情况,进行核对(正常可见形态和分布情况,进行核对(正常可见815个个/油镜视野、油镜视野、无大量大型血小板;无异常增多的红、白细胞碎片)。无大量大型血小板;无异常增多的红、白细胞碎片)。用血小板计数的参考方法核对计数结果。用血小板计数的参考方法核对计数结果。每份标本最好做每份标本最好做2次计数,若次计数,若2次计数误差小于次计数误差小于10%,取其均值报告;

8、若计数误差大于取其均值报告;若计数误差大于10%,应做第,应做第3次计数,次计数,取取2次相近结果的均值报告。次相近结果的均值报告。生理性改变生理性改变 每天可有每天可有6%10%的变化。的变化。临床意义临床意义增多见于增多见于:午后、冬季、高原居民、月经后、妊:午后、冬季、高原居民、月经后、妊娠中晚期运动、饱餐后静脉血。娠中晚期运动、饱餐后静脉血。减少见于:减少见于:早晨、春季、平原居民、月经前、早晨、春季、平原居民、月经前、分娩后、休息后、毛细血管血。分娩后、休息后、毛细血管血。 病理性变化病理性变化 减少与增多减少与增多 血小板减少:血小板减少:血小板低于血小板低于100109/L时为时

9、为血小板减少血小板减少(thrombocytopenia),为临床上),为临床上出血主要原因之一出血主要原因之一。当血小板当血小板低于(低于(2050)109/L时,可引起创伤出血时,可引起创伤出血或手术后出血;或手术后出血;血小板低于血小板低于20109/L时有较严重出血。时有较严重出血。输注血小板的指征:输注血小板的指征:血小板血小板低于低于20109/L,有,有出血难止症状。出血难止症状。病理性血小板减少的原因及意义病理性血小板减少的原因及意义 血小板增多:血小板增多:血小板超过血小板超过400109/L时为时为血小板血小板增多增多(thrombocytosis),血小板大于),血小板大

10、于1000109/L常有常有血栓形成的危险血栓形成的危险。在原因未明。在原因未明的血小板增多的病人中,约有的血小板增多的病人中,约有50%为恶性疾病。为恶性疾病。 病理性血小板增多的原因及意义病理性血小板增多的原因及意义 二、血小板形态检查二、血小板形态检查 (一)正常血小板形态(一)正常血小板形态 正常静息状态下,血小板为双面微凸的圆盘形,正常静息状态下,血小板为双面微凸的圆盘形,直直径为径为1.53m、平均体积为、平均体积为7.2fl的非细胞结构成分。的非细胞结构成分。 染色后镜下可呈散在或成簇分布,圆形、椭圆或不规染色后镜下可呈散在或成簇分布,圆形、椭圆或不规则。则。胞质呈淡蓝色或淡红胞

11、质呈淡蓝色或淡红,内含较多的细小,内含较多的细小紫红色颗粒。紫红色颗粒。血涂片上,为红细胞数的血涂片上,为红细胞数的1/301/20,通常每个通常每个油镜油镜视视野可见野可见725个,个,分散或分散或35成群分布。成群分布。 参考值:参考值: (100300)109/L (二)异常血小板形态(二)异常血小板形态 1.大小异常大小异常 1)大血小板:)大血小板:直径直径7m、常为、常为720m。见于。见于巨大巨大血小板综合征、血小板无力症、血小板综合征、血小板无力症、ITP、MDS等。等。2)小血小板:)小血小板:直径直径1.5m。假冒于缺铁贫、再障。假冒于缺铁贫、再障。2.形态异常:形态异常:超过超过10%才有临床意义。才有临床意义。1)血小板颗粒减少)血小板颗粒减少2)血小板卫星现象血小板卫星现象3)血小板)血小板“黏附黏附”红细胞红细胞 3.聚集性和分布异常聚集性和分布异常 正常抗凝血外周血涂片可见正常抗凝血外周血涂片可见35个聚集成簇或成团,个聚集成簇或成团,聚集与散在血小板比为聚集与散在血小板比为20:11)血小板聚集:)血小板聚集:多为血小板增多,大片聚集。多为血小板增多,大片聚集。 见于:特发性血小板增多症、慢粒。见于:特发性血小板增多症、慢粒。2)血小板)血小板成团或聚集减少:多为血小板减少。成团或聚集减少:多为血小板减少。

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