黄芩中黄芩苷类化合物的提取

1、黄芩中黄芩中黄芩苷类黄芩苷类化合物的提取、化合物的提取、分离与鉴定分离与鉴定2022-5-19黄黄芩芩苷苷（B Ba ai ic ca al li in n）O OO OO OO OH HO OH HO OH HO OH HH HO OC CO OO OH HO O汉汉黄黄芩芩苷苷（W Wo og go on no os si id de e）O OO OO OO OH HO OH HO OH HO OH HC CO OO OH HO OO OC CH H3 3O OO OH HO OH HO OH HO O黄黄芩芩素素（B Ba ai ic ca al le ei in n）O OO OH

2、HO OO OC CH H3 3H HO O汉汉黄黄芩芩素素（W Wo og go on ni in n）水解水解黄芩中黄酮类化合物的基本结构黄芩中黄酮类化合物的基本结构葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸苷元苷元黄芩苷的相关特性黄芩苷的相关特性淡黄色淡黄色的针晶，因含有的针晶，因含有-OH-OH、-COOH-COOH而显酸性，可溶于碱性而显酸性，可溶于碱性试剂中。试剂中。理化性质药理价值抗氧化抗氧化-清除氧自由基及抗氧化作用清除氧自由基及抗氧化作用抗菌抗菌-对微生物的抑制作用对微生物的抑制作用抗抗HIV-HIV-对人类免疫病毒对人类免疫病毒HIVHIV的抑制的抑制免疫调节免疫调节-对免疫功能的调节作用对免疫

3、功能的调节作用张喜平，田华，程琪辉.黄芩苷的药理作用研究现状.中国药理学通报，2003,19（11）：12121215提提取取流流程程黄芩粗粉（100g）滤液1滤渣投入8倍量的沸水中，煎煮20min,用脱脂棉过滤（第一次）投入6倍量沸水煎煮2次（第二次、第三次），每次20min,用脱脂棉过滤滤液2、3滤渣合并滤液1、2、3，滴加浓硫酸至pH 1-2,充分搅拌，加热至80，保温30min，滤过滤液沉淀原理：黄芩苷和苷元在热水中的溶解度较大，在酸中不溶而析出。离心机的使用4 3000 34 3000 3转子数转子数 转速转速 时间时间原理：通过离心机转子高速旋转产生的强大原理：通过离心机转子高速旋

4、转产生的强大离心力离心力，悬浮液与，悬浮液与悬浮颗粒之间因为重力的差异，而导致不同的悬浮颗粒之间因为重力的差异，而导致不同的沉降速度沉降速度。样品要对称放置样品要对称放置停止后才能打开停止后才能打开离心机使用注意样品瓶外面无水样品瓶外面无水打开打开交交叉叉对对称称第二次下进下进上出上出索式提取器索式提取器沉淀转入锥形瓶中，加浓度95%的乙醇超声洗涤2-3次，每次50 mL,离心乙醇液沉淀（主含黄芩苷）将其置于索式提取器中，加甲醇提取至液色极淡为止甲醇提取液结晶浓缩至10 mL，放置析晶，抽滤结晶结晶结晶法结晶法1.结晶法的操作结晶法的操作2.结晶溶剂的选择结晶溶剂的选择将需要结晶处理的固体物质

5、或粗晶加热溶解在一定量的溶剂中，制成过饱和溶液，趁热过滤，除去不溶性杂质，将滤液慢慢冷却放置，析出结晶，过滤即得。结晶溶剂的选择是关键。对结晶溶剂的要求：对欲纯化成分加热时溶解，冷却时析出； 对杂质则冷热都不溶或都溶； 溶剂的沸点适中； 与欲结晶的成分不发生化学反应； 尽可能安全、价廉、易得等。常用结晶溶剂：水、甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等等。第三次第三次结晶（黄芩苷）取结晶1g置圆底烧瓶中，加甲醇100 mL,加热回流20 min，趁热过滤甲醇溶液浓缩至10 mL，放置析晶，抽滤精制黄芩苷由于上节课得到的黄芩苷结晶太少，回流这一步就暂时不做。鉴鉴 定定1.1.显色反应显色反应盐酸镁

6、粉反应：取样品少许，加稀乙醇热溶，加镁粉少许，滴加浓盐酸数滴，观察溶液颜色的变化。 三氯化铁反应：取样品少许，溶于水或乙醇中，加1%三氯化铁醇溶液一滴，观察溶液颜色的变化。Molish反应：取样品少许置于试管中，加0.5 ml 乙醇溶解，再加入1%-萘酚溶液数滴；然后沿管壁加入浓盐酸约0.5ml，观察两溶液界面处颜色的变化。ABC上节课的黄芩苷结晶2.色谱鉴定（1 1）样品的制备（黄芩苷的水解）：样品的制备（黄芩苷的水解）： 精密称取黄芩苷约0.5g，置干燥25ml锥形瓶中，加入浓硫酸3ml，用玻棒搅拌均匀，滴加蒸馏水约2ml使黄芩苷溶解，得透明橙红色溶液。水浴加热15min左右，放冷。将此溶

7、液在搅拌下倾入20ml冰水中，析出黄色沉淀，抽滤并用水洗涤至无酸性反应，干燥。 水解所得黄色沉淀，用氯仿反复提取，合并氯仿溶液，浓缩回收氯仿至干，残留物再用甲醇重结晶得黄色针晶，为黄芩素，供苷元的鉴定。(不做) 滤去苷元后的水溶液，加固体碳酸钡使水溶液至中性，滤去碳酸钡沉淀。滤液浓缩至23ml，供糖的鉴定。酚羟基的酚羟基的鉴别鉴别10 mL左右左右2 2个点个点样品：水解所得糖的溶液。对照品：葡萄糖醛酸展开剂：正丁醇-醋酸-水（4:1:5，上层）显色剂：苯胺-邻苯二甲酸试液于105烘10min，显色。（2）糖的纸色谱鉴定黄芩苷的聚酰胺薄层色谱鉴定 样品：自制黄芩苷的乙醇溶液 对照品：黄芩苷对照品的乙醇溶液 展开剂：冰乙酸（610 mL） 显色剂：2%的三氯