《药物毒理学》实验教学大纲

1、药物毒理学实验教学大纲（供药学本科专业使用） 前言本大纲适用于药学本科专业学生使用。本课程的主要任务是开拓学生智能，培养学生严肃、严谨、严格的科学态度和良好的实验素养，提高学生的动手能力和独立工作能力，培养学生毒理实验的基本操作技术。通过本门课程的教学活动，训练学生进行科学实验的方法和技能，使学生逐步学会对实验现象进行观察、分析、联想思维和归纳总结，培养学生独立工作和分析，解决问题的能力。现将大纲使用中有关问题说明如下：一、为了使教师和学生更好地掌握教材，大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解三个级别，教学内容与教学级别对应。二

2、、教师在保证大纲内容的前提下，可根据不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。三、总教学学时为12学时。四、使用教材：药物毒理学实验讲义（自编） 正文实验一 实验动物的一般操作技术一、教学目的毒理学研究需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用，获得毒物的毒性、剂量反应关系、毒作用机制等方面的资料。因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。通过本次实验学习毒理学实验有关动物实验的基本操作技术，掌握实验动物的选择、动物抓取、染毒方法和生物材料的采集等技术。二、教学要求通过本实验，掌握正确的实验动物的一般操作技术。三、教学内容1、健康动物的选择。2、实验动物的性别鉴定。3

3、、实验动物的抓取方法。4、实验动物的编号、标记方法。5、实验动物的随机分组方法。6、实验动物的被毛去除方法。7、实验动物染毒途径和方法。8、实验动物生物材料采集和制备。9、实验动物的处死方法。实验二 小鼠骨髓细胞微核的诱导一、教学目的通过本实验使学生掌握实验设计的基础理论和方法（包括动物选择、实验分组、对照原则、处理因素的标准化等多方面知识），综合药理学、毒理学知识，掌握小鼠骨髓多染红细胞（PCE）微核测定方法，了解外源性化合物对骨髓细胞染色体的损伤作用。二、教学要求掌握微核实验的一般程序和实践意义；掌握对实验动物进行药物处理的一般程序；掌握进行实验设计的一般程序和规则；了解微核发生的机制。具

4、体如下：1、运用学过的药理学、毒理学及统计学、实验设计的相关知识，独立设计实验环节。（1）根据所选药品的理化性质，设计给药染毒的方案。（2）对照组方案的设计。（3）实验技术路线的设计（设计可行的操作步骤）。（4）实验结果分析方案的设计（选择合适的统计软件和统计方法等）。2、学生在设计方案前要求查阅文献资料，要杜绝闭门造车和生搬硬套别的方案的现象。实验方案须交指导教师修改后，然后开始实验。3、实验过程中要严格遵守操作规程，独立完成。4、实验结果应根据实验获得的数据进行整理，对一个教学实验小组或全实验室的数据进行整理、归纳、分析和对比，进行统计学处理。5.应对实验结果进行讨论，讨论部分包括实验结果

5、的分析、实验设计、实验方法及实验中出现异常现象的分析、认识、体会和建议等。三、教学内容1、按照教学内容的要求进行实验设计2、实验原理：微核是指细胞中主核之外的颗粒，染色与细胞核一致，相当于细胞直径的1/201/5，呈圆形或杏仁状。微核是细胞内染色体断裂或纺锤丝受影响而在细胞有丝分裂时滞留在胞核外的遗传物质。因而，微核试验能检测药物或和其它物质因素诱导产生的染色体完整性改变和染色体分离改变这两种遗传学终点。微核可出现于多种细胞，但在有核细胞中难于与正常核的分叶及核突出物区分，故常计数PCE细胞中的微核，因为红细胞在成熟之前最后一次分离后数小时将主核排出但仍保留微核于PCE细胞中。3、器材和试剂。

6、4、试验动物及处理。动物选择、染毒途径、剂量选择5、骨髓液的制备和涂片。6、固定。7、染色。8、观察计数。9、结果分析与评价。实验三： 小鼠精子畸形的诱导一、教学目的精子致畸实验是检测受试化学毒物破坏哺乳动物精子正常形态的实验学方法。通过该实验，学习和掌握小鼠精子畸形实验的原理和步骤。二、教学要求掌握小鼠精子畸形实验的一般程序和意义；掌握实验设计的一般程序和规则；了解精子畸形产生的机制。具体如下：1、根据药物毒理学理论课所学知识，就以上实验目的设计出实验方案（包括所选用材料、实验技术、方法）。 2、实验方案须交指导教师修改后，然后开始实验。 3、实验过程中要严格遵守操作规程，独立完成。 4、以

7、小组为单位整理实验数据，进行统计分析。三、教学内容1.按教学要求进行实验设计，在实验设计的基础上开始试验。2、实验原理精子畸形是指精子的形状异常和异常精子数量增多。生殖系统对化学毒物的作用十分敏感，在其它系统还未出现毒性反应之前，生殖系统可能已出现了损害作用。正常情况下，哺乳动物的精液中也存在少量的畸形精子，但在某些化学毒物的作用下，特别是在可引起生殖细胞遗传性损伤的化学毒物作用下，哺乳动物睾丸产生的畸形精子数量可大量增加。因此，可以用检查雄性动物接触化学毒物后精子畸形率的高低，来反映该化学毒物的生殖毒性和对生殖细胞潜在的致突变性。化学毒物引起精子畸形的机制尚未完全清楚。正常情况下，精子的成熟

8、和正常形态发生过程受多种基因调控，一旦这些基因中的一个或多个在化学毒物的作用下发生突变，就会导致畸形精子数量的大量增加。一般认为，常染色体上的基因控制精子畸形、Y-性连锁基因控制畸形精子的表现，某些特异的染色体重排，如性、常染色体易位，是化学毒物诱发哺乳动物精子畸形率增高的主要机制。3、仪器与试剂4、操作步骤（1）动物的处理：经口给予，连续5天 。各种致突变物作用于精子的不同发育阶段，可在接触某种致突变物后不同时间出现精子畸形，故有条件时，可于给受试物后第1、4、10周处死动物，检查精子形态。（2）剂量与分组：受试物应设三个剂量组，最高剂量组原则上为动物出现严重中毒表现和/或个别动物出现死亡的

9、剂量，一般可取1/2 LD50，低剂量组应不表现出毒性，分别取1/4和1/8 LD50 作为中、低剂量。另设溶剂对照组和阳性对照组。（3）染毒与采样。（4）制片。（5）阅片。（6）结果分析与评价。实验四 氨茶碱片经口急性毒性试验一、教学目的了解一次或24小时内多次给予受试药物后，动物所产生的急性毒性反应及其严重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，观察受试物毒性反应与剂量的关系，求出半数致死剂量（LD50）。二、教学要求药物经口染毒的方法是药物毒理学中重要的基本技术之一，经口急性毒性试验是研究药物毒性效应的基本试验。通过该实验掌握药物急性毒性试验的实验设计原则，熟悉经口灌胃技术及LD50的计算方法。三、教学内容1、健康实验动物的选择和性别鉴定。2、实验动物称重、编号和随机分组方法。3、受试化学物溶液的配制。4、小鼠和大鼠灌胃操作技术。5、毒性症状的观察和LD50计算。 教学组织与考核方法一、实施机构：由药学院药物毒理教研室执行。二、组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。三、教学方法： 1、实验教学：采用启发式、讨论式、交互