所谓半保留复制就是以

1、三、判断题1.所谓半保留复制就是以 DNA亲本链作为合成新子链 DNA的模板，这样产生的新的双链 DNA分子由一条旧链和一条新链组成。2.DNA的复制需要 DNA聚合酶和RNA聚合酶。3在高盐和低温条件下由 DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看作是一个复性(退火)反应。4. 在核酸双螺旋(如DNA)中形成发夹环结构的频率比单链分子低。发夹结构的产生需要回文序列使双链形成对称的发夹，呈十字结构。5B型双螺旋是 DNA的普遍构型，而 Z型则被确定为仅存在于某些低等真核细胞中。6病毒的遗传因子可包括 l到300个基因。与生命有机体不同，病毒的遗传因子可能是 DNA或 RNA

2、(但不可能同时兼有!)，因此 DNA不是完全通用的遗传物质。7. Cot12与基因组大小相关。8C0C1/2与基因组复杂性相关。9非组蛋白染色体蛋白负责30nm纤丝高度有序的压缩。10.大肠杆菌中，复制叉以每秒5O0个碱基对的速度向前移动，复制叉前的 DNA以大约 3000rmin的速度旋转。11.“模板”或“反义” DNA链可定义为：模板链是被RNA聚合酶识别并合成一个互补的mRNA，这一 mRNA是蛋白质合成的模板。12.在DNA复制中，假定都从53同样方向读序时，新合成 DNA链中的核苷酸序列同模板链一样。13.DNA的53合成意味着当在裸露3-OH的基团中添加dNTP时，除去无机焦磷酸

3、DNA链就会伸长。14.在先导链上 DNA沿53方向合成，在后随链上则沿35方向合成。15.如果 DNA沿35合成，那它则需以5三磷酸或3脱氧核苷三磷酸为末端的链作为前体。16.大肠杆菌 DNA聚合酶缺失35校正外切核酸酶活性时会降低 DNA合成的速率但不影响它的可靠性。17.复制叉上的单链结合蛋白通过覆盖碱基使DNA的两条单链分开，这样就避免了碱基配对。18.只要子链和亲本链中的一条或两条被甲基化，大肠杆菌中的错配校正系统就可以把它们区别开来，但如果两条链都没有甲基化则不行。19.大肠杆菌、酵母和真核生物病毒DNA的新一轮复制是在一个特定的位点起始的，这个位点由几个短的序列构成，可用于结合起

4、始蛋白复合体。20.拓扑异构酶之所以不需要ATP来断裂和重接 DNA链，是因为磷酸二酯键的能量被暂时贮存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。21.酵母中的拓扑异构酶突变体能够进行 DNA复制，但是在有丝分裂过程中它们的染色体不能分开。22.靠依赖于DNA的DNA聚合酶所进行的 DNA复制要求有作为一个引发物的游离3OH的存在。游离的3OH可以通过以下三种途径获得：合成一个RNA引物、DNA自我引发的或者一个末端蛋白通过磷酸二酯键共价结合到一个核苷酸。23.当 DNA两条链的复制同时发生时，它是由一个酶复合物： DNA聚合酶负责的真核生物的复制利用3个独立作用的 DNA聚合酶，Pol的一个拷贝(为了

5、起始)和Po1的两个拷贝(DNA多聚体化，当MFl将RNA引发体移去之后填入)。24.从ori开始的噬菌体复制的起始是被两个噬菌体蛋白 O和 P所控制的，在大肠杆菌E.coli中 O和 P是 DnaA和 DnaC蛋白的类似物。基于这种比较，O蛋白代表一个解旋酶而 P蛋白调节解旋酶和引发酶结合。25拓扑异构酶 和可以使 DNA产生正向超螺旋。26拓扑异构酶 解旋需要ATP酶。27. RNA聚合酶 合成 DNA复制的RNA引物。28线粒体 DNA的复制需要使用 DNA引物。29. 噬菌体整合到大肠杆菌基因组上是由一个位点专一的拓扑异构酶(入整合酶)催化的，它可以识别在两条染色体上短的特异 DNA序

6、列。30在真核生物染色体 DNA复制期间，会形成链状 DNA。31所有已知的基因转变都需要一定量的 DNA合成。32根据不同物种同一蛋白质中氨基酸的不同来估计突变率往往较实际的突变率低，因为一些突变体由于危及蛋白质功能，在选择压力下从种群中消失。33因为组蛋白 H4在所有物种中都是样的，可以预期该蛋白基因在不同物种中也是一样的。34DNA修复机制有很多种，但所有这些机制都依赖于二倍体染色体上两套遗传信息的存在。35.自发的脱膘呤作用和由尿嘧啶DNA糖基化酶切去一个已脱碱基的胞嘧啶都会产生可被无膘呤嘧啶内切核酸酶作为底物识别的同样的中间产物。36.DNA修复的第一步是由专用于修复过程的酶催化的，

7、下面的步骤由 DNA代谢过程中的常用酶催化。37.大肠杆菌中 SOS反应的最主要作用是通过在原始 DNA损伤区附近导人补偿突变来提高细胞存活率。38.DNA中四个常用碱基自发脱氨基的产物，都能被识别出来。39.在细菌细胞中，短片段修复是由损伤诱导的。相反，长片段修复是组成型的，且往往涉及长约150O一9000bp损伤 DNA片段的替换。40.真核生物中 DNA的修复没有原核生物重要，这是因为体细胞的二倍体特征。41.一般性重组需要交换的双方都有一长段同源 DNA序列，而位点专一重组仅需要短而专一的核苷酸序列。某些情况下，只需要交换双方中的一方具有该序列即可。42.一般性重组包括 DNA片段的物

8、理交换，该过程涉及 DNA骨架上磷酸二酯键的断裂 和重新形成。43.RecA蛋白同时具有位点专一的单链切割的活性和将单链从双螺旋 DNA分子上脱离 的解旋酶的功能，但需要依赖于ATP活性。44.大肠杆菌的单链结合蛋白通过与糖磷酸骨架结合并使碱基暴露，从而解开单链上的短发夹结构。45.RecA蛋白同时与单链、双链 DNA结合，因此它能催化它们之间的联会。46.交叉链互换包括交叉链和未交叉链，至少其中一条链的磷酸骨架断裂才可能使这个过程逆转。47.基因转变是真菌类偶然改变性别的方式；正常情况下，一次接合产生等量的雄性与雌性孢子，但偶然也会出现13或31的比例。48.当两个 DNA的突变片段相互间不

9、能反式互补，则可以推测这两个突变影响了同一种功能。这样的两个突变和每个不能反式互补的突变分为同一个互补群，并被认为是一个独立遗传单位的一部分。这个遗传单位可能是一个顺反子，或者如果突变稳定地干扰了转录过程，这可能是一个多顺反子转录单位。49.编码区以外的突变不会导致细胞或生物体表型改变。50.若一个二倍体酵母细胞中发生了一个错义突变，而这一突变将另外一个不同的氨基酸引入了一个分解代谢酶的催化位点，从而使得这个酶可以利用别的底物。这就是所谓的功能获得性突变。51因为 T4噬菌体至少编码30种参与基因组复制和转录的酶，它和寄主 DNA和RNA聚合酶都是独立的，但它必须依赖寄主蛋白质的复制机制。52

10、.小的DNA病毒，如 SV40和噬X174完全依赖寄主复制机制来复制它们的 DNA。53. 负链病毒不包含编码蛋白的基因。54追踪有外壳病毒的一个生活周期就等于游历整个细胞。55当一个噬菌体侵染一个合适的大肠杆菌寄主细胞时，通常是裂解性侵染，释放出几百个子代噬菌体；更少见的是，它会整合到寄主染色体中，产生带有原噬菌体染色体的溶原菌。56通过从寄主细胞表面出芽生殖的病毒常因为出芽造成细胞表面改变而致癌。57一种把新病毒按 DNA或RNA分类的简易方法是看它的生长是否受放线菌素 D的抑制。放线菌素 D只阻遏依赖DNA的RNA合成，而对依赖RNA的复制酶无影响，如果病毒生长受它抑制，那肯定是 DNA

11、病毒。58大病毒比小病毒更有可能存在重叠基因，因为它们有更多的基因。59因为类病毒不编码任何蛋白但又能够复制并在植物中造成严重的疾病，所以非常特殊。60.负责噬菌体 DNA合成的酶是在裂解循环的晚期形成的。61.溶源化是一个双链 DNA病毒的生活周期中的一种状态，是当病毒的基因组整合进一个宿主细胞的基因组时形成的状态。62.c蛋白的稳定性是影响溶源和裂解循环之间开关的一个关键。63.为了把噬菌体附着位点(attp)和在细菌染色体上的附着位点(attB)结合重组起来，噬菌体 DNA在感染大肠杆菌后靠末端cos位点退火成环。64下面哪些结构物能够诱导乳糖操纵子?哪些是半乳糖苷酶的底物? (a)l，

12、4半乳糖苷 (b)l，4半乳糖苷 (c)1，6半乳糖苷 (d)l，6半乳糖苷 (e)上面既没有诱导物，也没有底物65下面哪些说法是正确的? (a)Lac A的突变体是半乳糖苷透性酶的缺陷 (b)在非诱导的情况下，每个细胞大约有4分子的半乳糖苷酶 (c)乳糖是一种安慰诱导物 (d)RNA聚合酶同操纵基因结合 (e)多顺反子 mRNA是协同调节的原因 (f) Lac阻遏物是一种由4个相同的亚基组成的四聚体 (g)腺苷酸环化酶将 cAMP降解成 AMP (h) CAP和 CRP蛋白是相同的 (i)-35和-10序列对于RNA聚合酶识别启动子都是很重要的 (j)色氨酸的合成受基因表达、阻遏、弱化作用和

13、反馈抑制的控制 (k)Trp的引导 mRNA能够同时形成三个“茎环”结构 (l)在转录终止子柄部的 A-T碱基对可以增强结构的稳定性 (m)真核生物和原核生物的转录和翻译都是偶联的 (n)在色氨酸浓度的控制下，核糖体停泊在 Trp引导区串色氨酸密码子上，但并不与之脱离 (o)Ara C蛋白既可作为激活蛋白，又可作为阻遏蛋白起作用 (p)Ara C的表达不受调控66转录的起始位点(stp)决定在模板链上嘧啶核苷酸的位置，在此形成第一个杂合的 RNA和 DNA碱基对。67反转录病毒侵染常常同时导致子代病毒的非致死释放和被侵染细胞内致癌的永久性基因改变。68转座酶可以识别整合区周围足够多的序列，这样

14、，转座子不整合到基因的中间，因为破坏基因对细胞是致死的。69转座要求供体和受体位点之间有同源性。70TnA家族的转座子通常转移三种基因：转座酶、解离酶和氨苄抗性基因。71Tn10高水平表达转座酶。72水晰的基因组比人的基因组大。73高等真核生物的大部分 DNA是不编码蛋白质的。74. 假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上。75在有丝分裂中，端粒对于染色体的正确分离是必要的。76大多数看家基因编码低丰度的 mRNA。77所有真核生物的基因都是通过对转录起始的控制进行调控的。78所有高等真核生物的启动子中都有TATA盒结构。79只有活性染色质转录的基因对 DNase 敏感。80. 内含子通

15、常可以在相关基因的同一位置发现。8140以上的Drosophila cirilis基因组是由简单的7bp序列重复数百万次组成。82卫星 DNA在强选择压力下存在。83真核细胞中的RNA聚合酶仅在细胞核中有活性。84. 在RNA的合成过程中，RNA链沿35方向延长。85. 候选三磷酸核苷通过对生长中RNA链的磷酸的亲和攻击加到链上。86核不均一RNA是mRNA和rRNA的前体而不是tRNA的前体。87密码子AUG专门起 mRNA分子编码区的终止作用。88tRNAfMet的反密码于是 TAC。89. RNA聚合酶能以两个方向同启动子结合，并启动相邻基因的转录。但是，模板链的选择由另外的蛋白因子确定

16、。90细菌细胞用一种RNA聚合酶转录所有的RNA，而真核细胞则有三种不同的RNA聚合酶。91. 转录因子具有独立的 DNA结合和转录激活结构域。92.每个转录因子结合位点被单个转录因子识别。93.纠正下列一段话中的错误： 在E. Coli中，通过RNA聚合酶同操纵基因的结合来起始转录。与转录起点碱基互 补的dNTP同亚基结合，然后是第二个dNTP通过与第一个 dNTP形成25磷酸 二酯键而结合上。当生成的RNA链约有12个核苷酸长度时， 亚基脱离 DNA聚合酶，RN链在全酶的作用下继续延伸。当 DNA聚合酶在RNA链上遇到终止密码子时，转录作用停止。94. 在tRNA分子中普遍存在的修饰核苷酸

17、是在掺入tRNA转录物结合前由标准核苷酸共价修饰而来。95如果tRNATyr加的反密码子发生单个碱基变化后成为丝氨酸的反密码子，被加入到无细胞系统，所得的蛋白质在原来应为丝氨酸的位置都变成了酪氨酸。96. 在肽链延伸的过程中，加入下一个氨基酸比加人氨酰 tRNA 更能激活每个氨酰tRNA间的连接。97摇摆碱基位于密码子的第三位和反密码子的第一位。98核糖体小亚基最基本的功能是连接mRNA与tRNA，大亚基则催化肽键的形成。99. 蛋白质合成时，每加人一个氨基酸要水解4个高能磷酸键(4个密码子)，所消耗的总能量比起 DNA转录(每加入一个核苷酸用两个高能磷酸键，6个密码子)要少。100因为 AU

18、G是蛋白质合成的起始密码子，所以甲硫氨酸只存在于蛋白质的 N末端。101通过延缓负载tRNA与核糖体结合以及它进一步应用于蛋白质合成的时间，可使与不适当碱基配对的tRNA离开核糖体，提高蛋白质合成的可靠性。102. 延伸因子eEF1帮助氨酰tRNA进入 A位点依赖于ATP内一个高能键的断裂。103三种RNA必须相互作用以起始及维持蛋白质的合成。104G-U碱基负责fMet-tRNA对GUG的识别。105.限制与修饰现象是宿主的一种保护体系，它是通过对外源 DNA的修饰和对自身 DNA的限制实现的。106.限制性内切核酸酶在 DNA中的识别切割位点的二级三级结构也影响酶切效率。一般来说，完全切割

19、质粒或病毒 DNA，要比切割线状 DNA需要更多的酶，最高的需要20倍。107.如果限制性内切核酸酶的识别位点位于 DNA分子的末端，那么接近末端的程度也 影响切割，如Hpa和Mbo要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。108.能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌，其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。109限制性图谱与限制性片段长度多态性(RFLP)图谱的最显著的区别在于前者是一个物理图谱而后者是一个连锁图。110用限制性内切核酸酶Hpa分别切割载体 DNA和供体 DNA后，可用Ecoli DNA 连接酶进行连接。111已知某一内切核酸酶在一环状 DNA上有3个切点，因此

20、，用此酶切割该环状 DNA，可得到3个片段。112.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链 DNA，又能作用于单链 DNA。113基因工程中使用的类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。114.DNA多态性就是限制性片段长度多态性。115.用限制性内切核酸酶 Pst切割质粒 pBR322后，再用外切核酸酶.coli进行系列缺失，可得到一系列大小不同的缺失突变体。116.甘油会使许多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一些酶的星活性的主要原因之一，防止的办法是酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在5以下。117.具有EcoR 末端的外源片段只能以一个方向插入到EcoR

21、 末端的载体中。118.从Esherichia coliK中分离的限制性内切核酸酶命名为 EcoK。119.同一种限制性内切核酸酶切割靶 DNA，得到的片段的两个末端都是相同的。120.在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他的限制性酶就不能切割了121.稀有酶是指那些识别序列很长又不常用的限制性内切核酸酶。122.T4 DNA连接酶和E.coli连接酶都能催化平末端和粘性末端的连接。123.T4 DNA连接酶和E.coli连接酶都能催化双链 DNA和单链 DNA的连接。124.反转录酶能够以单链RNA或单链 DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。以 R

22、NA为模板合成的 DNA是互补 DNA(complementalyDNA, cDNA)。若是以 DNA模板合成 DNA，dNTP的掺人速度很低(约5个核苷酸秒)，比 T7 DNA 聚合酶的合成速度差不多低100倍。125.以RNA为模板，用反转录酶可同时产生单链和双链的cDNA，双链 DNA是由自身引物引导合成。但这种自身引物引导的合成效率远低于外加寡核苷酸引物引导的合成。126.Ba131核酸酶(Ba131 nuclease)是 Ca2+依赖性的，在反应混合物中加入 EDTA便可抑制它的活性。127.外切核酸酶不能在双链 DNA的 gap和 nick处切割 DNA。128.当一个 DNA结合

23、蛋白同它识别的核苷酸序列结合以后，就保护了它们的磷酸二酯键免遭切割，其结果，电泳胶上就有明显可见的空缺带(与对照相比)，这就是 DNA 足迹法。129.T4 DNA连接酶和E.coli连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。130.多核苷酸激酶之所以能够用于 DNA片段的标记，是因为它能够将单个的32P标记的单核苷酸加到每一 DNA链的5端。131.在反转录过程中，使用 AMV比使用 M-MLV可得到较多的产物。132.真核生物可能有两种DNA连接酶，连接酶和连接酶 都能在 DNA合成和连接中起作用。133.DNA聚合酶有三种酶活性，其中35外切核酸酶的活性在较多的dNTP存在 下，常

24、被53合成酶的活性所掩盖。134用同一种酶切割载体和外源 DNA得到粘性末端后，为防止它们自身环化，要用 CIP将它们脱磷酸。135.外切核酸酶的作用产物可以作为末端转移酶的作用底物。136.用外切酶作系列缺失突变时，可以从突出的3端开始。137.nick和gap的含义是不同的，前者指 DNA的单链中有较小的缺失，后者仅是断开 了一个磷酸二酯键。138.迄今发现的质粒 DNA都是环状的。139.线性质粒同环状质粒一样都不带有宿主必需的基因。140.有 a、b、c三个质粒，因为 a和 b能够共存于一个细胞，a和 c也可共存于同一个细胞，所以 b和 c一定能够共存于同一个细胞。141.插入元件(I

25、S)也是一种转座元件，它除了有转座酶基因外，还有附加基因。142.如果两个不同的质粒可以稳定地共存于同一个细胞中，这两种质粒则属于同一个不亲和群。143.一个带有反向重复序列的双链 DNA经变性后，复性时其单链可形成发夹环。144.能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。145.任何一种质粒都可以用氯霉素扩增的方法，增加它的拷贝数。146.只有完整的复制子才能进行独立复制，一个失去了复制起点的复制子不能进行独立复制。147CsCl-EB密度梯度离心法纯化SC DNA原理是根据 EB可以较多地插入到 SC DNA 中，因而沉降速度较快。148质粒 Co1El同 pSC101共整合后，得到重组

26、质粒 pSC134，具有两个复制起点，这两个起点在任何细胞中都是可以使用的。149pBR322可以用于粘性末端连接、平末端连接和同聚物接尾法连接，无论用哪种方法连接，都可以用同一种酶回收外源片段。150所谓穿梭质粒载体是能够在两种以上的不同宿主细胞中复制的质粒，所用的复制起点不同。151.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。152. Co1El是唯一用作基因工程的自然质粒载体，它具有四环素抗性标记，因而很容易选择。153.某一染色体 DNA经内切酶Sal切割后，产生了若干个具有粘性末端的 DNA片段，将这些片段分别在 T4 DNA连接酶的作用下自身连接成环，然后导人受体细胞，

27、都可以进行独立地复制。154如果细菌的某种表型特征在UV处理下丧失后不再恢复，这种表型有可能是质粒赋予的。155基因克隆中，低拷贝数的质粒载体是没有用的。156.代型载体(replacement vector)是指同一种限制性内切核酸酶在DNA中具有两 个切点。外源 DNA通过取代这两个切点间的片段被克隆。157现在最常用的 pUC载体是 pUC18，它的分子量小，具有多克隆位点和易于选择的分子标记，并且是松弛型复制。另外，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链 DNA。158.噬菌粒(phagemid)pUC118pUC119载体是集质粒和丝状噬菌体有利特征于一身 的载体，既能合成单链 DNA

28、，又能合成双链 DNA。159.噬菌体 DNA和 M13单链噬菌体 DNA在成熟前的 DNA复制都是用滚环模型。160.M13噬菌体每个世代裂解宿主后，可释放100个子代噬菌体。161.以粘粒为载体的重组体虽然在平板上生长的速度不同，但是转化子中插入片段的扩增量是相同的。162.氯霉素扩增 DNA时，加氯霉素的时间是重要的，因为加得太早，菌数不够，加入时间过迟，菌龄过老，容易自溶。163所谓引物就是同 DNA互补的一小段RNA分子。164脉冲凝胶电泳采用一个很强的电场来分离非常长的DNA分子，其原理在于迫使 DNA分子根据长度的不同而具有不同的速度，并按大小顺序通过凝胶。165Agarose-

29、EB电泳法分离纯化 CCC DNA原理是根据 EB可以较多地插入到 CCC DNA 中，因而迁移速度较快。166.如果 PCR的每一次循环都把上一次循环中合成的 DNA都加了一倍，那么，10个循环就扩增了1000倍，20个循环就扩增了100万倍，30个循环就扩增了10亿倍。167PCR既能用于扩增任何天然存在的核苷酸序列，又能重新设计任何天然核苷酸序列的两个末端。因此，任意两个天然存在的 DNA序列都能快速有效的扩增，并拼接在一起。168最有效的制备纯RNA的方法是让其在细胞中超表达，然后提纯。169大量制备已被克隆基因编码蛋白产物的常用方法是体外转录和翻译。170.通过报告基因与来自于目的基

30、因上游和下游各种 DNA片段的结合，研究基因的调控序列。171.温度敏感突变型是非常有用的，在这些突变型中，可以通过对温度的改变控制这些突变体中异常表型的出现。172用人工合成的含有所需碱基变化的寡聚核苷酸，可以将特殊突变引入克隆的基因。173蛋白质的氨基酸序列中各种重要信号都可以通过短氨基酸序列同报告蛋白的融合进行研究。174简并引物是根据已知 DNA序列设计的引物群。175在 DNA贮存液中加一滴三氯甲烷，可防止真菌的污染。176密码的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码具有不同的使用频率。177插入到质粒 DNA中的 EB可以用正丁醇抽提除去。178碱法和煮沸法分离质粒 DNA的原理是不相

31、同的。179酚法和碱法分离质粒 DNA都要用溶菌酶破壁，但碱法用的溶菌酶的浓度要高。180外源基因(或 DNA片段)插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。181用不同的产生粘性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源 DNA，得到的粘性末端是不亲和的粘性末端。182.基因组 DNA文库是含有某一生物中全部 DNA序列随机克隆的克隆群，而cDNA文库是含有某一生物中所有表达基因随机克隆的克隆群。183.cDNA克隆较之基因组克隆最重要的优越性就是它们含有一个基因的完整序列。184通过差示杂交后制备的 cDNA文库使克隆那些只在特定分化细胞中表达基因的机率大为提高。185在染色体步移中

32、，可通过 DNA测序知道已到达所感兴趣的基因。186一旦有了一套已知顺序的基因组克隆，通过从文库中获得覆盖目的突变基因所在基因组区的所有克隆，就可以进行染色体步移。187根据遗传连锁作图把基因定位在基因组中是定位克隆的第一步，它为分离特定的人的基因提供了一个直接而快速的方法。188.人工感受态和自然感受态细胞都能吸收线性和环状单链 DNA。189.人工导入基因和正常染色体基因间的同源重组，可以发生基因置换。190.为了保证重组 DNA分子在受体细胞中能够稳定地独立存在下来,通常用recrm表型的细胞株作为受体菌。191.线性 DNA片段被导人哺乳动物细胞后，在细胞内酶的作用下，很快相互连接成重

33、复的DNA大片段)并能在随机位点整合到染色体中。192.不匹配的粘性末端是不能通过粘性末端连接的。193.用限制性内切核酸酶切割载体、供体 DNA后，要加入 EDTASDS中止液使限制性内切核酸酶失活，这样有利于重组连接。194.限制性内切核酸酶Bgl识别的序列为 A GATCT，BamH识别的序列为GGATCC，用它们分别切割载体 DNA和供体 DNA，不必使酶失活，就可以直接通过粘性末端连接法进行连接。195.具有E.coR 末端的外源片段只能以一个方向插入到E.coR 末端的载体中。196.不匹配的粘性末端可以通过部分填补后进行连接。197.低丰度的mRNA不仅拷贝数少，而且种类也少。1

34、98.同聚物接尾法构建重组体，不仅连接效率高，而且也很容易回收插入的片段199.以噬菌体为载体的筛选方法比较简便，凡能形成噬菌斑的就一定是重组体。200.核酸杂交探针就是带有放射性标记的 DNA分子。201.Northern杂交中，为了防止RNA形成部分环状发夹结构，影响迁移率，所以要 用变性缓冲液进行电泳。202探针的离体标记实际上是酶法标记。203切口移位法(nick translation)只能标记线性双链 DNA不能标记环状双链 DNA。204通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。205尼龙膜(nylon membrane)是核酸杂交的一种固

35、体支持物，具有同 DNA结合能力强、韧性强，可反复洗脱使用，并且杂交信号本底低等优点，就是成本高。206如果 DNA序列的某种变异在群体中是稀有的，称为突变；若是普遍的，则称为多态险。207用寡聚 DNA进行高度严紧的杂交可用于胎儿遗传病的诊断，可检测到因单个核苷酸变化而造成的基因突变。208.由于基因家族中成员之间是密切相关的，因此可以用其中一个成员作为探针进行高度严紧的杂交来检测其他成员。209通过用化学标记法取代放射性标记法，并采用一种抗体来特异性地识别这种化学修饰，使得原位杂交的分辨率大大提高。210在杂交之前先用凝胶电泳将粗提取物中的RNA或 DNA分子进行分离，假定杂交后只有一种或

36、少数几种大小的片段被探针杂交上了，就能肯定这种杂交是特异性的。211根据某一感兴趣蛋白质的序列、抗原性以及配基结合性质制备探针，可从 DNA文库中筛选到相应的基因。212.如果用其他的方法对某种蛋白质已进行过鉴定，那么要确定某一克隆是否含有该蛋白编码基因就相当容易了。213用DNA探针进行杂交反应非常敏感并具有选择性，可用来测定某一特定 DNA序列在细胞基因组中的拷贝数。214双重药物选择法富集哺乳动物细胞中稀有重组体的原理是：一种药物用于选择以任意方式整合外源 DNA的细胞，第二种药物杀死带有随机整合 DNA的细胞。215就像对培养中的鼠胚性干细胞进行遗传操作获得突变鼠一样，用 DNA转染培

37、养中的单个植物细胞，能够创造转基因植物。216NC(硝酸纤维素膜)和尼龙膜都可作为电转移 DNA支持物。217单克隆抗体是淋巴细胞和瘤细胞杂交后形成的单个杂交瘤细胞经无性繁殖而产生的特异性抗体。218用免疫化学法筛选重组体不需要外源基因的表达。219用 DNA探针同RNA 分子杂交在测定一已知基因在某一细胞中是否表达时是很有 用的，但不能用于检测转录起始位点、终止位点或内含子的位置。220. 核酸杂交的原理是根据 DNA分子间互补。221. 突出的3末端或凹缺的3末端都可以用Klenow大片段酶进行末端标记。222用多核苷酸激酶进行5末端标记前， DNA必须进行脱磷酸，否则无法标记。223.

38、X-gal显色反应的基本原理是使载体上与受体互补的肽失活。224Norhern印迹和 Southern印迹的基本原理是一样的，都是用于检测结构基因的表达。225. 在液相液相和液相固相杂交中，它们的杂交效率都是一样的。四、简答题1.为什么只有 DNA适合作为遗传物质?2.在体内，rRNA和 tRNA都具有代谢的稳定性，而 mRNA的寿命却很短,原因何在?3.碱基对间在生化和信息方面有什么区别?4.在何种情况下有可能预测某一给定的核苷酸链中“G”的百分含量?5.真核基因组的哪些参数影响 Cot12值?6.请问哪些条件可促使 DNA复性(退火)?7.为什么 DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?8.大

39、肠杆菌染色体的分子量大约是2.5×109Da1)，核苷酸的平均分子量是330Da，两个邻近核苷酸对之间的距离是0.34mn；双螺旋每一转的高度(即螺距)是3.4nm，请问： (l)该分子有多长? (2)该 DNA有多少转?9.曾经有一段时间认为，DNA无论来源如何，都是4个核甘酸的规则重复排列(如， ATCGATCGATCGATCG)，所以 DNA缺乏作为遗传物质的特异性。第一个直接推翻该四核苷酸定理的证据是什么?10.为什么在 DNA中通常只发现 AT和 CG碱基配对?11.列出最先证实是 DNA(或RNA)而不是蛋白质是遗传物质的一些证据。12.什么是连锁群?举一个属于连锁基因座

40、的例子。13.什么是顺反子?用“互补”和“等位基因”说明“基因”这个概念。14.对于所有具有催化能力的内含子，金属离子很重要。请举例说明金属离子是如何作用的。15.列出真核生物mRNA与原核生物mRNA的区别。16.列出各种tRNA所有相同的反应及个别 tRNA的特有反应。17.为什么真核生物核糖体RNA基因具有很多拷贝?18.为什么说信使RNA的命名源自对真核基因表达的研究，比说源自对原核基因表达的研究更为恰当?19.说明为什么mRNA仅占细胞RNA总量的一小部分(3一5)。20.为何rRNA和tRNA分子比 mRNA稳定?21.起始tRNA具有哪两种与其他 tRNA不同的特性?22.区别r

41、RNA和mRNA在翻译中的作用。23.氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接?24.简要说明证明信使的存在及其本质为RNA的证据。25.列举4种天然存在的具有催化活性的RNA。26.型内含子发生改变后，可以产生其他酶的活性吗?如果可以，是哪些活性?这意味着型内含子的催化中心有什么特点?27某些自剪接的内含子具有可读框，它们编码何种蛋白?这与内含子的移动有什么关系?28.描述 Meselson-Stahl试验，说明这一实验加深我们对遗传理解的重要性。29.请列举可以在线性染色体的末端建立线性复制的三种方式。30.为什么一些细菌完成分裂的时间比细菌基因组的复制所需的时间要少?为什么在选择营养条件下

42、，E. coli中可以存在多叉的染色体或多达4个以上的开环染色体拷贝， 而正常情况下染色体是单拷贝的?31.在 DNA聚合酶催化新链合成以前发生了什么反应?32.DNA复制起始过程如何受DNA甲基化状态影响?33.请指出在 oriC或X型起点起始的 DNA复制之间存在的重要差异。34.大肠杆菌被 T2噬菌体感染，当它的 DNA复制开始后提取噬菌体的 DNA，发现一些RNA与 DNA紧紧结合在一起，为什么?35.DNA连接酶对于 DNA的复制是很重要的，但RNA的合成一般却不需要连接酶。解释这个现象的原因。36.曾经认为 DNA的复制是全保留复制，每个双螺旋分子都作为新的子代双螺旋分子的模板。如

43、果真是这样，在Meselson和 Stahl的实验中他们将得到什么结果?37.描述 Matthew和Franklin所做的证明 DNA半保留复制的实验。38.解释在DNA复制过程中，后随链是怎样合成的。39描述滚环复制过程及其特征。40.假如发生了碱基对的错配会产生什么表型，它们怎样被修复?41.为什么 DNA的甲基化状态可以为复制的调节和 DNA的修复所利用?42.错配修复的方向可以怎样被调节(突变型到野生型或野生型到突变型)?43.RecA蛋白是怎样调节 SOS反应的?44.以图4.1A为例，画出图4.1B所示分子同源区域交叉重组的产物，图中用一条单线表示 DNA双螺旋，同源重组的靶位点用

44、箭头标出。图4.1各种重组的底物45.图4.2所示为两条同源的亲代双螺旋和两套可能的重组产物。请画图表示两亲代双螺旋间可以产生指定重组产物的 Holliday连接，在每条链的左端标明 Holliday连接的3或5端，这样亲代和重组双螺旋间的关系就比较清楚。请指明为了产生每套重组产物哪些链应被切去。最后，画出经过一轮 DNA复制后的重组产物。图4.2亲代与重组的双螺旋46.为什么基因内互补只发生在：(1)某一基因座的等位基因间；(2)这些基因座的特殊等位基因对间?47.有很多突变对于野生型基因是隐性的，也就是说，在一个含有突变型和野生型基因二倍体细胞中，野生型的特性能够得到表达。请根据对突变过程

45、的认识解释这一事实。对于说明为什么有些突变是显性的，有何见解?48.为了选择下面两种突变型，应对只含有葡萄糖、硫酸铵以及无机离子的基本培养基作何调整? (1) leu，亮氨酸营养缺陷型； (3)gal，不能以半乳糖作为唯一碳源的突变型。49.写出利用突变研究以下问题的步骤： (l)氨基酸 X的代谢途径； (2)Ecoli中细胞分裂的控制。50.在工业微生物菌种的选育中，人们喜欢用诱变的方法筛选解除了酶合成阻遏的突变株，而不要解除了酶活性反馈抑制的突变株。请解释原因。51.为什么一个基因座的正向突变发生的频率要比回复突变高?52.一个基因间阻遏物突变怎样阻遏了一个错义突变?53.为什么吖啶类染料

46、诱导的突变较碱基类似物诱导的突变对生物体更有害?54.羟胺对游离噬菌体和转化 DNA都是高度特异的致变剂。它只与 DNA中的C反应，使之转变成偶尔可与 A错配的形式。 (1)羟胺诱导的碱基替代是什么? (2)推测羟胺是否可回复自身诱导的突变? (3)羟胺可以回复5溴尿嘧啶诱导的突变吗? (4)5溴尿嘧啶可以回复羟胺诱导的突变吗?55.在下列哪些基因中你可以分离到温度敏感突变和琥珀突变? (l) lacO；(2) lacZ; (3) lacP；(4) lacI56.区别反向突变、回复突变和第二位点回复突变。57.指出突变频率和突变率的区别。58.简述大肠杆菌中的增变基因。59.简述怎样利用化学诱

47、变剂在细菌中的诱变来检测它们致癌作用。60.简述 Muller5技术，并说明如何利用它测得 X射线对果蝇突变频率的影响。61.列举几种具以下特征突变：(1)不能合成特殊多肽；(2)组成型合成多肽。62.突变能影响高等真核生物结构基因表达的几个水平?并指出每种突变最明显的分子表型。63.当E.coli菌株 K同时被两个特异的 T4噬菌体 r突变体所感染时，感染细胞裂解并释放出正常数量的噬菌体后代。这些后代是重组的结果还是互补作用的结果?应怎 样辨别?64.在E.coli中， A和 B基因座相隔了大约5的基因组，另一对标记 C和 D间隔1的基因组。哪对能被(1)共转化；(2)共转导?65.当一个烈

48、性噬菌体的所有基因全部表达时，如果不对转录进行时序性调控，将出现 什么问题?66.为什么噬菌体感染产生的溶源菌通常对其他的噬菌体的感染有免疫?67.请预测具有下列突变的噬菌体感染细菌的表型。并说明原因： (1)产生一个抗蛋白酶的 c蛋白的突变。 (2)具有阻止蛋白结合的OR2的突变。 (3)使N基因失去作用的突变。 (4)编码 c I蛋白的基因突变。68鉴定化合物的致癌性的一个通用实验是爱姆斯试验，通过营养缺陷型菌的回复突变 确定其致癌性。用人噬菌体和E.coli设计一个实验使之能用于致癌物的检测。69为什么像流感病毒这样的RNA 病毒的生命周期，有力地支持了以下这一论点：与其说病毒是生命有机

49、体，不如说它是“寄生的遗传因子”。70.大肠杆菌噬菌体 T2的染色体是一个线性 DNA分子，它的两端都有冗余并且可作循 环变换。解释冗余的含义并说明这些分子是怎样产生的。71.烈性噬菌体和温和噬菌体的区别是什么?72.从噬菌体 MS2中提取出来的裸露染色体可以感染大肠杆菌的原生质球(去除胞壁的细菌)，这会产生和具感染能力的噬菌体一样的噬菌体颗粒。如果染色体先用RNA酶处理，就会失去感染能力；另外，如果标记感染的RNA，在子代中不出现标记。解释这些现象。73.从噬菌体中提取的 DNA用两种只攻击单链 DNA的外切核酸酶处理。外切核酸酶 A只从突出的5端消化 DNA，而外切核酸酶 B只攻击自由的3

50、端。这种处理对噬菌体 DNA的生物活性有什么影响?74比较真核生物与原核生物转录起始的第一步有什么个同。75转录涉及模板链和编码链的分离，解释在转录中单链 DNA是怎样被保护的。76概括说明因子对启动子调节的辅助功能。77什么是增效与减效突变?78细菌促旋酶突变通常是致死的，但是促旋酶拓扑异构酶突变却可以成活，其原何在?79解释因子是怎样选择专一性启动子共有序列而启动不同基因表达的(考虑对环境压力的应答)。80 rpoN基因编码因子:54，它具有不同于已知原核生物的因子的特征。请与E. coli的因子：70(RpoD)作比较讨论这些特征。81在原核生物中，核心酶与 DNA的松散结合和紧密结合之

51、间存在种平衡，为什么这比核心多聚酶自身形成游离与结合平衡更有利?82正调控和负调控的主要不同是什么?83区别(1)启动子增效突变与启动子减效突变；(2)上游序列和下游序列。84解释为什么操纵子和启动子是反式隐性、顺式显性的，而编码阻碍蛋白的基因既是反式显性又是顺式显性。85为什么只有 DNA双螺旋中的一条链能被正常的转录?86哪三个序列对原核生物mRNA的精确转录是必不可少的?87说明因 RNA聚合酶启动子不同的相互作用如何导致不同基因的转录。88原核生物的核糖体 RNA和 tRNA的相对较稳定并且半衰期长，而 mRNA却不稳定，很快被降解，请解释这种稳定性的差异。89列举两种受调控蛋白控制的

52、、与氨基酸的生物合成有关的操纵子。90什么是安慰诱导物?91葡萄糖是如何影响涉及糖代谢的操纵子(葡萄糖敏感型操纵子)的表达?92在大多数细菌操纵子中，结构基因通常紧靠在一起并由单个操纵序列启动子区调控，而在一些例子中结构基因分散在染色体上。请问这些基因是如何以简单的方式达到协同调节的。93. 反转录病毒与反转录转座子有什么不同?94. gag和pol基因的蛋白产物是怎样生成的? mRNA编码的 Env蛋白是怎样生成的?95. 蛋白酶为什么对反转录病毒生活史很重要?96. 列出转化病毒正链RNA掺入到宿主双链 DNA的详细过程。97. 噬菌体整合到宿主基因组后，46个宿主 DNA的核苷酸被复制，

53、这是为什么?这与转座子插入新位点有何相似之处?另外，两个核苷酸从5U3的5和3被切除，这意味着遗传信息从反转录病毒中被丢失吗?98反转录病毒怎样获得像onc基因这样的细胞基因?获得此类基因会对反转录病毒基 因产生影响吗?一个反转录病毒怎样才会丢失如 pol和 env这样的重要的基因而复制?99描述酵母 Ty元件的结构。它与反转录病毒有何相似之处?为什么它不形成感染粒子? 100你如何证明 Ty元件在转座时经历了一个RNA中间体?101FB元件与copia因子有何不同?102列出病毒和非病毒超家族反转录转座子之间的4种差异。103为什么说 Alu元件可能作为 DNA复制的起点?有什么理由不支持这

54、种假说呢?104描述两种转座子引起基因组重排的方式。105 IS元件整合到靶位点时会发生什么?106一个复合转座子和一个 IS元件之间的关系是什么?107列出一个转座子插入到一个新位点所要求的步骤。108当(l)DNA在两个定向重复之间(2)DNA在两个反向重复之间发生重组的效应各是什么?109在什么过程中会形成一个共整合体?它的结构是什么?110Tn10元件只有在自己的转座酶基因具有活性时发生转座(与利用基因组中 Tn10元件表达的转座酶的情况正好相反)，这种偏爱的原因是什么?111什么是杂种不育?是什么引起的?112即使不携带癌基因，反转录病毒依然会导致癌变转化。列举这种现象发生的三种方式

55、。113简述大肠杆菌的插入序列，并指出它们对自发突变的重要性。114比较基因组的大小和基因组复杂性的不同：个基因组有两个序列，一个是 A，另个是 B，各将2000bP长。其中个是由400bp的序列重复5次而成，另一个则由50bp的序列重复40次而成，问： (1)这个基因组的大小怎样? (2)这个基因组的复杂性如何?115. 一个基因如何产生两种不同类型的mRNA分子?116. 在一个克隆基因的分析中发现：个含有转录位点上游3.8kb DNA的克隆，其 mRNA直接转录活性比仅含有3.1kb上游 DNA的克隆的转录活性大50倍。这表明了什么?117被加工的假基因与其他假基因有哪些不同?它是如何产生的？118非转录间隔区与转录间隔区分别位于 rRNA重复的什么位置?转录间隔区与内含子 有何区别?119请描述 C值矛盾，并举一个例说明。120在酵母基因中，其生活必需基因占多大比例?为什么有些基因可能是不必要的?121酵母mRNA的大小一般与基因的大小相致。而哺乳动物 mRNA比对应的基因明显小。为什么?122在一个