五味子药材检验标准操作规程

1、五味子药材检验操作规程1 范围 本标准建立了五味子药材的检验操作规程。本标准适用于五味子药材的检验。 2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，其最新版本适用于本标准。中华人民共和国药典 2010版一部 五味子药材质量标准 编号 3 职责 检验人员、复核人员对实施本标准负责。4 操作规程4.1 试药与试剂 甲酸乙酯、甲酸、石油醚（36-60）水合氯醛、甘油醋酸试液、稀甘油、羧甲基纤维素钠、硅胶GF254薄层板、三氯甲烷、甲醇、 水、五味子对照药材、五味子甲素对照品。4.2 设备及仪器放大镜、直尺、生物显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、酒精灯、层析缸、天平、3号药典筛、回

2、流装置、点样毛细管、紫外光灯、水浴锅、坩埚、扁形称量瓶、高效液相色仪、烘箱、具塞锥形瓶、20量瓶、高温电阻炉、电炉、干燥器。4.3 检验项目 性状（1） 操作方法 取用供试品，用目视或用放大镜观察，并用直尺测量其直径；闻其气，用口尝其味。（2） 记录 记录观察的形状，供试品其直径数值和气味。（3） 结果判定 呈不规则的球形或扁球形，直径58mm。表面红色、紫红色或暗红色，皱缩，显油润；有的表面呈黑红色或出现“白霜”。果肉柔软，种子12，肾形，表面棕黄色，有光泽，种皮薄而脆。果肉气微，味酸；种子破碎后，有香气，味辛、微苦。判为符合规定。 鉴别.1 显微鉴别（1） 操作方法 取本品横切面和粉末，滴

3、加水合氯醛试液后，加热透化，再加稀甘油装片，在显微镜下观察。（2） 记录 记录横切面和粉末鉴别特征。（3） 结果判定 横切面：外果皮为1列方形或长方形细胞，壁稍厚，外被角质层。散有油细胞；中果皮薄壁细胞10余列，含淀粉粒，散有小型外韧性维管束；内果皮为1列小方形薄壁细胞。种皮最外层为1列径向延长的石细胞，壁厚，纹孔及孔沟细密；其下为数列类圆形、三角形或多角形石细胞，纹孔较大；石细胞层下为数列薄壁细胞，种脊部位有维管束；油细胞层为1列长方形细胞，含棕黄色油滴；再下为35列小型细胞；种皮内表皮为1列小细胞，壁稍厚，胚乳细胞含脂肪油滴及糊粉粒。判为符合规定。 粉末暗紫色，种皮表皮石细胞表面呈多角形或

4、长多角形，直径1850m，壁厚，孔沟极细密，胞腔内含深棕色物。种皮内层石细胞呈多角形、类圆形或不规则形，直径约至83m，壁稍厚，纹孔较大。果皮表皮细胞表面观类多角形，垂周壁略呈连珠状增厚，表面有角质线纹；表皮中散有油细胞。中果皮细胞皱缩，含暗棕色物，并含淀粉粒。判为符合规定。.2 理化鉴别 照薄层色谱法（中国药典2010版一部附录VI B）。（1）操作方法 取本品粉末1g，加三氯甲烷20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取五味子甲素对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1ml的溶液，作为对照品溶液。照薄

5、层色谱法（附录B）试验，吸取上述三种溶液各2l，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（3060）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。（2） 记录 记录供试品和对照药材的用量，吸附剂、展开剂及其配比、点样量、薄层色谱图及结果。（3） 结果判定 供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。判为符合规定。 检查：.1 杂质 照杂质检查法（中国药典2010版一部附录 A）。（1）操作方法 取本品量，摊开，用肉眼或放大镜观察，将杂质拣出；如其中有可以筛分的杂质，则通过适当的筛，将杂质分出，将各类杂质分别称重

6、，计算其在供试品中的含量（%）。（2）记录 记录供试品取用量、杂质重量、杂质含量的计算和结果。计算公式： m z 杂质含量= 100% m y式中：my为样品重；(g) m z为杂质重；(g)（3）结果判断本品的杂质小于或等于1%，判为符合规定。.2 水分 照水分测定法（中国药典2010版一部附录 H第一法）。（1）操作方法 取本品25g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定，打开瓶盖在100105干燥5小时，将瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量（%）

7、。（2）记录 记录供试品取用量、干燥温度、干燥时间、水分的计算和结果。计算公式： m p+ my - m z 水分= 100% m y式中：m p为恒重的称量瓶；（g） m y为样品重；(g) m z为恒重的（瓶+样品）(g)（3）结果判断本品的水分小于或等于16.0%，判为符合规定。.3 总灰分 照灰分测定法（中国药典2010版一部附录 K）（1） 操作方法 取本品35g，至灼灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01g），缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化，逐渐升高温度至500600，使完全灰化并至恒重。 根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。（2）记录 记录供试品取用量、炽灼温度

8、、炽灼时间、灰分的计算和结果。计算公式： mzmp 总灰分= 100% my式中：mp 为坩埚恒重；my为样品重；mz为炽灼后（坩埚+样品）恒重（3）结果判断 本品的灰分小于或等于7.0%，判为符合规定。4.3.4含量测定 照高效液相色谱法（附录 ）测定。（1）操作方法色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（65：36）为流动相；检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备 取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含五味子醇甲0.3mg的溶液，即得。供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.25g，精密称定，置

9、20ml量瓶中，加甲醇约18ml，超声处理（功率250W，频率20kHz）20分钟，取出，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10l，注入液相色谱仪，测定，即得。（2）记录 记录对照品浓度、对照品峰面积、样品峰面积、样品称样量、含量的计算和结果。A样C标V样计算公式 ： C样= 100% A标m样1000式中：C样：样品百分含量A样：样品峰面积m样：样品称样量A标：对照品峰面积C标：对照品浓度V样：样品溶液体积（3）结果判定 本品含五味子醇甲（24327）不得少于0.40%。 五味子药材原始检验记录批 号数 量规 格检验项目请验部门检验日期年

10、月 日来 源报告日期年 月 日检验依据五味子药材质量标准及中国药典2010版一部【性状】 本品呈不规则的 形，直径 mm；表面 色，皱缩，显油润；表面呈 。果肉柔软，种子12，肾形，表面 色，油光泽，种皮 。果肉 ， ；种子破碎后，有 ，味 。 结论： 横切面：外果皮为1列 形细胞，壁稍厚，外被角质层，散有 ；中果皮薄壁细胞 余列，含 ，散有小型 ；内果皮为1列小方型 。种皮最外层为1列径向延长的 ，壁厚，纹孔及孔沟细密；其下为数列类圆形、三角形或多角形 ， ；石细胞层下为数列 ，种脊部位有 ；油细胞层为1列 ，含棕色油滴；再下为 列小形 ；种皮内表皮为1列 ，壁稍厚，胚乳细胞含 。 结论：

11、【鉴别】 粉末鉴别：粉末 色。种皮表皮石细胞表面观呈 形，直径1850m,壁厚，孔沟极细密，胞腔内含 物。种皮内层 呈多角形、类圆形或不规则形，直径约至83m，壁稍厚，纹孔较大。果皮表皮 表面观 ，垂周壁约呈连珠状增厚，表面有 ；表皮中散有 。中果皮 皱缩，含 物，并含 。 结论： 薄层鉴别：取本品粉末1g，加三氯甲烷20ml,加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取五味子对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取五味子甲素对照品，加三氯甲烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VI B）试验，吸取上述三种溶液各2l,分别点于同一

12、硅胶GF254薄层板上，以石油醚（3060）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干， 1： 2： 第1页 共3页 检验人： 复核人： 日 期： 年 月 日 日 期： 年 月 日置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照 3： 药材和对照品色谱 。 结论： 【检查】 杂质：照附录A杂质检查法，不得过1% 取本品 g； g，肉眼、放大镜观察，拣出杂质重 g； g。 100%= 100%= 平均值： = 结论： 水分 ：不得过16.0%(附录 H第一法)。项目序号称量瓶恒重样品重（瓶+样品）105干燥5h后重105继续烘1h后（瓶+样品）重如未恒重：105继

13、续烘1h（1）（2）计算：（1） 100%= （2） 100%= 平均值： = 结论： 总灰分： 不得过7.0%(附录 K)。项目序号坩埚恒重/g样品重/g（坩埚+样）550炽灼4h后重/g550继续炽灼1h后（坩埚+样）恒重/g如未恒重550继续炽灼1h（1）（2）计算： （1） 100%= （2） 100%= 平均值： = 结论： 【含量测定】第2页 共3页 检验人： 复核人： 日 期： 年 月 日 日 期： 年 月 日 色谱条件与系统适应性：C18柱，甲醇水（13：7）为流动相，检测波长为250nm。理论板数按 五味子醇甲计应不得低于2000。 对照品溶液制备：精密称取五味子醇甲对照品15mg，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液。 供试品溶液制备：取本品粉末（过三号筛）约0.3g精密称定， 置25ml瓶中，加甲醇约20ml，超声处理20分钟，取出，加