实验一特殊显微镜的工作原理和使用_第1页
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文档简介

1、放大倍数和数值孔径放大倍数和数值孔径10/0.25 , 40/0.65 ,100/1.3标准机械筒长和盖玻片厚度标准机械筒长和盖玻片厚度160/0.17160/0或或160/160/-/0或或/-油浸物镜:油浸物镜:oil、oel、Hi等等水浸物镜:水浸物镜:W或或Water甘油浸物镜:甘油浸物镜:Glyz和和Glye复消色差物镜:复消色差物镜:APO半复消色差物镜:半复消色差物镜:FL平场物镜:平场物镜:PL丁达尔现象丁达尔现象明场普通显微镜成像光路图明场普通显微镜成像光路图暗场照明光路图暗场照明光路图普通显微镜普通显微镜暗视场显微镜暗视场显微镜相差显微镜相差显微镜人口腔上皮细胞在不同显微镜

2、下的图像人口腔上皮细胞在不同显微镜下的图像-明相差明相差+暗相差暗相差相差环相差环特点特点:鉴定活体细胞最实用、最经济的方法鉴定活体细胞最实用、最经济的方法缺点缺点:需要光强高需要光强高切片不能太厚切片不能太厚(510um)盖片、载片需符合标准盖片、载片需符合标准最好配用单色滤光镜最好配用单色滤光镜荧光效果不如明场物镜荧光效果不如明场物镜激发方式激发方式 激发波长激发波长 应用范围应用范围U U激发激发334334病理切片,细菌、病理切片,细菌、FITCFITC染料、染料、V V激发激发365.405.365.405.435435自发荧光、一般荧光抗自发荧光、一般荧光抗体、四环素染色物体、四环

3、素染色物B B激发激发405.435.405.435.490490FITCFITC染料、吖啶橙染色、染料、吖啶橙染色、染色体、红细胞、癌细染色体、红细胞、癌细胞、蛔虫胞、蛔虫G G激发激发546546浮尔根染色、浮尔根染色、DNADNA荧光素荧光素激发波长激发波长 发射波长发射波长DAPI372372456456AMCA350350450450Hoechst 33258365365465465FITC490490520520Acridine Orange490490590590Acridine Yellow470470550550CY3552552565565TRITC541541572572Propidium Iodide530530615615优点:n检出能力高n对细胞的刺激小n能进行多重染色用途:n物体构造的观察n荧光的有无、色调比较进行物质判别n发荧光量的测定对物质定性、定量分析荧光显微镜的优点和用途荧光显微镜的优点和用途 WUWU WIBWIBDUALDUAL BANDBANDWIBAWIBAWIGWIGWIBWIB双重染色标本的单色和双色观察双重染色标本的单色和双色观察原位杂交技术原位杂交技术 用于培养细胞用于培养细胞的观察或者

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